쥐의 개체 위치 작업을 사용하여 피사체 내 실험 설계

객체 위치 작업을 사용하면 설치류의 자발적인 탐색 동작을 활용하여 공간 메모리의 형성 또는 유지에 대한 다양한 메커니즘을 조사할 수 있습니다. 이 프로토콜을 사용하면 개체 위치 작업을 최대 4배 까지 반복하여 통계적 능력과 외과 적 시술을 수반하는 연구의 효율성과 출력을 높일 수 있습니다. 불투명한 비다공성 하드 플라스틱으로 만든 사각형 경기장을 얻으려면 최소 60센티미터 너비, 높이 50cm입니다.

자동화 된 소프트웨어에 의해 쥐의 움직임을 성공적으로 기록하기 위해 바닥 색상이 쥐의 것과 대조되는지 확인합니다. 경기장을 상자 안에 놓거나 커튼으로 둘러싸인 플랫폼에 놓습니다. 컨텍스트를 만들려면 다른 색상이나 패턴에 삽입 가능한 벽의 두 번째 레이어를 경기장에 삽입합니다.

쥐가 도달할 수 없도록 뚜렷한 기하학적 모양과 색상이 충분히 높은 3D 공간 신호를 걸어 놓습니다. 다공성, 구치할 수 없는 다양한 오브젝트를 장착하고, 뚜렷한 기하학적 모양과 질감으로 청소하기 쉬운 오브젝트를 경기장 바닥에 부착합니다. 비 사각형 모양의 양동이에 침구 재질로 채웁니다.

실험에서 사용할 오브젝트와 다른 모양과 크기의 5~10개의 오브젝트를 무작위로 버킷에 넣습니다. 세션 1의 경우 모든 홈 케이지를 실험실로 가져와 쥐가 방에 습관화하여 최소 30 분 동안 정착하게하십시오. 같은 케이지에서 2~4마리의 쥐를 양동이에 넣고 약 20분간 넣습니다.

쥐의 각 그룹 사이의 배설물을 제거하여 양동이를 청소. 모든 쥐를 집 새장에 넣고 하우징 룸으로 돌려보라고 한다. 세션 2의 경우 모든 케이지를 실험실로 가져와 서 최소 30분 동안 둡니다.

각 쥐를 양동이에 개별적으로 넣고 10분 간 넣습니다. 쥐를 다시 집 케이지에 넣고 각 쥐 후 양동이를 청소합니다. 완료되면 모든 케이지를 하우징 룸으로 되돌려 놓습니다.

세션 4의 경우 모든 케이지를 실험실로 가져와 서 최소 30분 간 둡니다. 20분 동안 문맥이나 공간 적 단서없이 빈 경기장에 같은 케이지에서 2 ~4 마리의 쥐를 함께 놓습니다. 모든 쥐를 다시 홈 케이지에 넣고 각 쥐 그룹 후에 70 %의 에탄올로 경기장을 닦으부습니다.

빈 경기장을 수정하여 오브젝트를 경기장에 넣지 않고 첫 번째 컨텍스트를 만듭니다. 세션의 경우 컨텍스트 습관 중 하나는 모든 케이지를 실험실로 가져와 최소 30분 동안 둡니다. 레코더를 시작한 다음 첫 번째 쥐를 경기장 중앙에 놓고 쥐가 경기장을 10 분 동안 탐험 할 수 있도록하십시오.

그런 다음 레코더를 멈추고 쥐를 다시 홈 케이지에 배치합니다. 모든 케이지를 완료하면 하우징 룸으로 반환합니다. 각 쥐에 대해, 세션에 대한이 과정을 반복 2 그리고 3 이틀 동안 연속, 총 쥐 당 컨텍스트 습관의 세 세션이 있도록.

모든 케이지를 실험실로 가져와 서 적어도 30분 간 둡니다. 미리 준비된 스케줄을 사용하여 끈적끈적한 매트 나 양면 테이프를 사용하여 지정된 위치에 첫 번째 동일한 개체 쌍을 배치합니다. 레코더를 시작하고 벽에 직면각 오브젝트 또는 어떤 개체에 의해 점유되지 않는 모서리를 직면 각 개체에서 동일한 거리에 경기장에 첫 번째 쥐를 배치합니다.

약한 인코딩을 위해 쥐는 단일 시험을 위해 20 분 동안 경기장과 물체를 탐험 할 수 있습니다. 강한 인코딩을 위해 쥐는 같은 쥐에 대한 세 번의 시험으로 5 분 동안 탐험 할 수 있습니다. 레코더를 중지합니다.

쥐를 홈 케이지에 다시 넣고, 물체를 제거하고 각 녹음 후 에탄올로 경기장을 닦아냅니다. 모든 케이지를 실험실로 가져와 쥐를 최소 30분 동안 방치할 수 있도록 첫 번째 테스트에 미리 충분한 시간을 둡드립니다. 지정된 위치에 개체를 배치합니다.

레코더를 시작하고 어떤 물체에 의해 점유되지 않는 벽이나 모서리를 마주보고 경기장에 첫 번째 쥐를 배치합니다. 쥐가 경기장과 물체를 5분 동안 탐험할 수 있도록 합니다. 쥐를 다시 홈 케이지에 넣습니다.

물체를 제거하고 70%에탄올로 물체와 경기장을 모두 완전히 닦으십시오. 각 쥐에 대한 기록을 반복한 다음 케이지를 하우징 룸으로 다시 반환합니다. 각 쥐에 대해 인코딩 및 테스트 예심 모두에서 각 개체에 대한 탐색 시간을 점수매기합니다.

전체 기간 동안 및 테스트 시험에서 최고의 차별 성능을 위해 평가합니다. 각 개체에 대한 탐색 비율 또는 각 래트에 대한 차별 지수를 계산하고 그룹에 대한 평균 값을 계산합니다. 확률 수준 이상의 중요한 기본 설정을 감지하기 위해 하나의 샘플 T 테스트를 사용합니다.

강력한 인코딩 프로토콜은 1시간 24시간 지연된 테스트에서 50%의 확률 수준보다 평균 백분율 탐색이 훨씬 높은 새 위치에서 개체에 대한 선호도를 높였습니다. 약한 인코딩 프로토콜은 1시간 지연이 있는 테스트의 기회 수준에 비해 새 위치에서 개체에 대한 선호도가 크게 증가했지만 24시간 지연은 생성되지 않았습니다. 이 프로토콜의 중요한 장점은 쥐의 동일한 코호트를 가진 4개의 별개의 컨텍스트를 사용하여 4번 수행될 수 있다는 것입니다.

1시간 메모리와 24시간 메모리의 두 실험 그룹과 카운터 밸런싱을 사용하는 한 가지 가능한 방법의 결과는 여기에서 입증됩니다. 두 그룹은 컨텍스트 1과 2에 대해 균형을 이루었으며, 두 가지 추가 컨텍스트인 3개와 4개의 컨텍스트에서 반복되었습니다. 이 네 가지 컨텍스트의 결과는 각 컨텍스트에서 선호도와 확률 수준을 비교하여 각 실험 그룹의 메모리가 평가된 위치에 개별적으로 표시됩니다.

네 가지 컨텍스트 중에서 큰 차이가 발견되지 않았습니다. 더 나은 표현과 데이터의 주제 비교 내에서 두 개의 불균형 컨텍스트의 결과가 결합되어 피험자 비교, 즉 쌍이 있는 T 테스트 내에서 비교되었습니다. 이 작업은 동물이 테스트 중에 압도되거나 두려워하지 않도록 취급과 습관이 중요하다는 호기심에 의존하기 때문입니다.

약리학 및 광유전학 적 개입과 같은 추가 조작은 단기 및 장기 기억을 연구하고 이러한 기억을 향상시거나 손상시키기 위한 생체 이미징뿐만 아니라이 프로토콜에서 구현 될 수 있습니다.