Name: 쥐의 부분 이종화 힌드래그 이식 모델 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2021-06-09T14:45:00.000+00:00
Duration: 6 min 19 s
Description: 학습하세요 쥐의 부분 이종화 힌드래그 이식 수술 모델을 통해 혈관화 복합 동종이식에서 보존 및 면역 거부 반응 연구를 수행하는 방법을. 이 기법은 신뢰할 수 있고 재현 가능한 단기 연구에 적합합니다.

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이 작품은 상 No. 아래 의회 지시 의학 연구 프로그램을 통해 보건 담당 국방부 차관실에 의해 지원되었다. W81XWH-17-1-0680. 의견, 해석, 결론 및 권고사항은 저자의 의견이며 반드시 국방부의 승인을 받지는 않습니다.

모든 동물은 실험실 동물의 관리 및 사용에 대한 NIH 가이드에 따라 인도적 치료를 받았습니다. 기관 동물 관리 및 사용 위원회 (IACUC 프로토콜 2017N000184) 및 동물 관리 및 사용 검토 사무실 (ACURO)는 모든 동물 프로토콜을 승인했습니다. 근친 남성 루이스 쥐 (250-400 g) 모든 실험에 사용 되었다.
1. 수술
<ol><li>루이스 쥐를 이소플루란 흡입을 사용하여 마취한다. 유도 챔버에서 5% 이소플루란으로 마취를 유도하고 호흡 콘을 통해 1.5-3%의 이소플루란 흡입으로 마취를 유지한다.</li>
	<li>생존 시술에 수술 전에 눈 윤활유를 적용하십시오. 수술 부위를 면도하고, 탈필 크림, 스크럽, 무균 커튼으로 커튼으로 치료합니다.</li>
	<li>절개 전과 시술 중에 정기적으로 발가락 핀치 테스트를 통해 총 마취를 확인하십시오. 전체 절차 전반에 걸쳐 심장과 호흡 속도를 모니터링합니다. 모든 수술의 경우 멸균 기기, 소모품, 커튼 및 장갑을 사용하여 멸균 상태를 유지하십시오. 프로시저에 사용되는 계측기 목록은 재료 표를 참조하십시오.</li>
</ol>2. 기증자 오른쪽 부분 뒷다리 조달
<ol><li>다리의 단면 세 번째에서 발목 위의 피부의 할례 절개를 합니다.</li>
	<li>양극성 집게를 사용하여 포라이트 동맥의 사페누스 동맥과 말단 가지를 골격화하고 소생시킵니다. 위장골혈증, 솔레우스, 티비알리스 전방, 이두근 이두근이 노출될 때까지 이두근을 잘라냅니다.</li>
	<li>오른쪽 잉게날 주름에 2.5cm 절개를 합니다. 잉게날 지방 패드를 해부하고 대퇴 혈관을 노출하기 위해 그것을 철회. 잉게인인대와 클램핑 포스프를 파악하여 잉게날 지방 패드를 disinal을 잡습니다. 참고: 잉구인 지방 패드는 부분 사지의 수확에 포함되어 있습니다.</li>
	<li>대퇴 혈관을 해부, 머피 가지를 개별화 (깊은 근육 담보 지점은 일반적으로 인기구 인대와 상복부 지점 사이의 중간에 위치), 8-0으로 ligate 나일론 넥타이.</li>
	<li>27.5 G 바늘을 사용하여 음경 등쪽 정맥에 주입된 100 IU/kg 헤파린으로 기증자 쥐를 헤파리니즈합니다.</li>
	<li>엉덩이 주위의 피부 절개를 완료합니다.</li>
	<li>양극성 집게를 사용하여 이두근 여성스러움과 글루테우스 피상화 근육을 소작합니다. 중대퇴골 길이의 상시 신경을 코터리화하고 잘라냅니다. 대퇴골문장의 수준에서 대퇴골을 근접적으로 노출한다. 참고: 애드덕터와 사분면 근육은 조달에서 제외됩니다. 지명된 페디클이 유지됩니다.</li>
	<li>잉게인인의 수준에서 8/0 나일론 넥타이와 Ligate 대퇴골 혈관. 24 G 혈관 카테터를 삽입할 수 있도록 합자 바로 아래 대퇴 동맥에 동맥 절제술을 수행하고 팽창시키세요.</li>
	<li>대퇴골의 전방을 드러내며 페디클 아래에 남은 근육을 cauterize하고 잘라냅니다.</li>
	<li>골 커터를 사용하여 경골과 대퇴골을 각각 근접및 disismly(중간 길이)로 자른다.</li>
	<li>부분 힌드레다리를 헤파린 식염수(100 IU/mL)로 2mL로 플러시하여 명확한 정맥 유출을 얻습니다. 미생물이송(그림 1)까지멸균 거즈에 얼음에 보관하십시오.</li>
	<li>동물은 전신 마취하에 있는 동안, 동물이 생명의 흔적을 보이지 때까지 산기화에 의해 안락사를 수행 (호흡 움직임과 심장 박동없음).</li>
</ol><img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/62586/62586fig01.jpg"> 그림 1: 쥐 부분 뒷다리 수확. 24 G 협심증은 대퇴 동맥에 삽입되어 이성균 미생물 혈관 전달을 준비합니다. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/62586/62586fig01large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.</a>
3. 받는 사람 수술
<ol><li>절개하기 전에 목 뒤쪽을 면도하고 buprenorphine 0.01-0.05 mg/kg을 피하로 투여하십시오. 가열 패드에 쥐를 척추 위치에 놓습니다.</li>
	<li>오른쪽 잉구인 주름에 2.5cm 절개를 합니다. 잉게인 지방 패드를 해부하고 대퇴 혈관을 노출하기 위해 그것을 기울입니다. 후크를 사용하여 인내 인대와 클램핑 포스프를 철회하여 잉게날 지방 패드를 disinal지방 패드를 더 이상 유지합니다.</li>
	<li>대퇴선박을 해부하고, 머피 가지를 개별화하고, 8/0 나일론 넥타이로 리게이트를 한다.</li>
	<li>8/0 나일론 넥타이를 사용하여 상복부 선박 위에 두 선박을 분리합니다. 근사 클램프를 근교로 배치하고 혈관 끝을 팽창시; 헤파린 식염수로 헹구는 다.</li>
	<li>엉덩이 위의 왼쪽 측면에 절개를하고, 잉게날 주름에 피하 터널피 포켓을 만듭니다. 참고: 절개는 동물이 정상적인 뒷다리 동작을 유지하도록 엉덩이의 운동 범위 이상으로 만들어집니다. 또한, 접목 삽입과 미세 혈관 전달 부위 사이의 분리 된 다리를 유지하면 접목의 더 나은 고정을 할 수 있습니다(도 2).</li>
	<li>미세 혈관 전달을 위한 피하 터널을 통해 부분 사지및 잉게인 지방 패드의 근접 부분을 놓습니다. 10/0 나일론 봉합사를 사용하여 정맥 및 동맥 해부학을 수행합니다. 근사 클램프를 모두 제거하고 사지의 부활을 관찰합니다. 각 해부학의 가관성을 평가하기 위해 두 선박에 "착유 테스트"를 수행합니다. 참고: 정맥 해부학에 8~9개의 봉합사가 필요하며, 동맥 해부학의 경우 평균 6봉합사가 필요합니다.</li>
	<li>이식된 사지의 내측에 세로 피부 절개를 하고 이식편을 삽입합니다. 이식편의 과도한 피부를 제거하고, 흡수성 4/0 봉합사를 사용하여 별도의 봉합사및 실행 봉합사로 상처를 닫습니다.</li>
	<li>이식된 사지의 잉구지방 패드와 두 개의 분리된 흡수성 봉합사를 사용하여 수용자를 함께 봉합하고, 미세혈관 해부학의 마지막 검진 후 맨 끝에 있는 잉구 주름을 닫는다. 참고: 인구이날 지방 패드는 해부학 위에 지방의 보호 층을 추가하고 이식편과 페디클의 고정 된 위치를 보장하기 위해 단단히 봉합됩니다. 세심한 폐쇄는 상처 치유에 더 좋습니다. 또한 상처에서 잔류 출혈을 방지하고 자기 절단의 위험을 감소시다.</li>
	<li>양변 출혈의 양에 따라 식염수 1-3mL로 유체 손실을 피하로 보상합니다.</li>
	<li>동물의 목에 엘리자베스 칼라를 놓고 피부에 2 개의 느슨한 봉합사를 바르고 올바른 위치에 유지합니다.</li>
	<li>이소플루란 흡입을 중지하고, 완전히 의식하고 외래할 때까지 온난화 패드에 동물을 지속적으로 모니터링합니다.</li>
</ol><img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/62586/62586fig02.jpg"> 그림 2: 골조의 발병 전에 perioperative 이미지. 약 1cm의 잇수다리는 잉게날 주름 절개와 엉덩이 위의 이식편 의 삽입 사이에 보존된다. 접목은 교량 아래에 배치되어 미세 혈관 전달을 위해 안정적으로 유지됩니다. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/62586/62586fig02large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.</a>
4. 수술 후 치료
<ol><li>동물을 72시간 동안 매일 두 번 모니터링한 다음 수술 후 날(POD) 7일까지 매일 한 번, 일주일에 두 번 모니터링합니다. 참고: 모니터링은 동물 및 이식 상태(창백한 눈은 동물 통증, 비정상적인 이식 색상/온도의 지표로서 추가 유체, 포르피린 염색이 필요할 수 있음)에 맞게 조정되어야 하며, 수의사와 추가 주의를 기울여야 합니다. 단일 하우징은 접목에 손상을 피하기 위해 전체 연구 기간 동안 받는 쥐에 필요합니다.</li>
	<li>IACUC 지침에 따라 부프레노르핀 및/또는 비스테로이드 항염증제 약물의 피하 주사로 진통을 수행하십시오.</li>
	<li>접목을 평가하고 동일한 장치를 사용하여 사진과 함께 매일 신체 검사를 수행합니다. 참고: 이식편 피부에 제모 크림을 사용하면 이식의 피부 색을 더 잘 평가하는 데 도움이 됩니다.</li>
</ol>

<ol><li>Lanteiri, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Feasibility%2C+reproducibility%2C+risks+and+benefits+of+face+transplantation%3A+a+prospective+study+of+outcomes%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Transplantation%22%5BJournal%5D)">Feasibility, reproducibility, risks and benefits of face transplantation: a prospective study of outcomes.</a> American Journal of Transplantation. 11 (2), 367-378 (2011).</li>
<li>Park, S. H., Eun, S. C., Kwon, S. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hand+transplantation%3A+current+status+and+immunologic+obstacles%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+and+Clinical+Transplantation%22%5BJournal%5D)">Hand transplantation: current status and immunologic obstacles.</a> Experimental and Clinical Transplantation. 17 (1), 97-104 (2019).</li>
<li>Cetrulo, C. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Penis+transplantation%3A+first+US+experience%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+Surgery%22%5BJournal%5D)">Penis transplantation: first US experience.</a> Annals of Surgery. 267 (5), 983-988 (2018).</li>
<li>Grajek, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((First+complex+allotransplantation+of+neck+organs%3A+larynx%2C+trachea%2C+pharynx%2C+esophagus%2C+thyroid%2C+parathyroid+glands%2C+and+anterior+cervical+wall%3A+a+case+report%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+Surgery%22%5BJournal%5D)">First complex allotransplantation of neck organs: larynx, trachea, pharynx, esophagus, thyroid, parathyroid glands, and anterior cervical wall: a case report.</a> Annals of Surgery. 266 (2), 19-24 (2017).</li>
<li>Pribaz, J. J., Caterson, E. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evolution+and+limitations+of+conventional+autologous+reconstruction+of+the+head+and+neck%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Craniofacial+Surgery%22%5BJournal%5D)">Evolution and limitations of conventional autologous reconstruction of the head and neck.</a> Journal of Craniofacial Surgery. 24 (1), 99-107 (2013).</li>
<li>Lipson, R. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vascularized+limb+transplantation+in+the+rat.+I.+Results+with+syngeneic+grafts%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Vascularized limb transplantation in the rat. I. Results with syngeneic grafts.</a> Transplantation. 35 (4), 293-299 (1983).</li>
<li>Lipson, R. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vascularized+limb+transplantation+in+the+rat.+II.+Results+with+allogeneic+grafts%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Vascularized limb transplantation in the rat. II. Results with allogeneic grafts.</a> Transplantation. 35 (4), 300-304 (1983).</li>
<li>Adamson, L. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+modified+model+of+hindlimb+osteomyocutaneous+flap+for+the+study+of+tolerance+to+composite+tissue+allografts%5BTitle%5D)+AND+%22Microsurgery%22%5BJournal%5D)">A modified model of hindlimb osteomyocutaneous flap for the study of tolerance to composite tissue allografts.</a> Microsurgery. 27 (7), 630-636 (2007).</li>
<li>Arav, A., Friedman, O., Natan, Y., Gur, E., Shani, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rat+hindlimb+cryopreservation+and+transplantation%3A+a+step+toward+%22organ+banking%22%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Transplantation%22%5BJournal%5D)">Rat hindlimb cryopreservation and transplantation: a step toward "organ banking".</a> American Journal of Transplantation. 17 (11), 2820-2828 (2017).</li>
<li>Gok, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+an+ex-situ+limb+perfusion+system+for+a+rodent+model%5BTitle%5D)+AND+%22ASAIO+Journal%22%5BJournal%5D)">Development of an ex-situ limb perfusion system for a rodent model.</a> ASAIO Journal. 65 (2), 167-172 (2019).</li>
<li>Gok, E., Rojas-Pena, A., Bartlett, R. H., Ozer, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rodent+skeletal+muscle+metabolomic+changes+associated+with+static+cold+storage%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation+Proceedings%22%5BJournal%5D)">Rodent skeletal muscle metabolomic changes associated with static cold storage.</a> Transplantation Proceedings. 51 (3), 979-986 (2019).</li>
<li>Brandacher, G., Grahammer, J., Sucher, R., Lee, W. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+for+basic+and+translational+research+in+reconstructive+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Birth+Defects+Research.+Part+C%2C+Embryo+Today%22%5BJournal%5D)">Animal models for basic and translational research in reconstructive transplantation.</a> Birth Defects Research. Part C, Embryo Today. 96 (1), 39-50 (2012).</li>
<li>Fleissig, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Modified+heterotopic+hindlimb+osteomyocutaneous+flap+model+in+the+rat+for+translational+vascularized+composite+allotransplantation+research%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%3A+JoVE%22%5BJournal%5D)">Modified heterotopic hindlimb osteomyocutaneous flap model in the rat for translational vascularized composite allotransplantation research.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (146), e59458(2019).</li>
<li>Ulusal, A. E., Ulusal, B. G., Hung, L. M., Wei, F. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Heterotopic+hindlimb+allotransplantation+in+rats%3A+an+alternative+model+for+immunological+research+in+composite-tissue+allotransplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Microsurgery%22%5BJournal%5D)">Heterotopic hindlimb allotransplantation in rats: an alternative model for immunological research in composite-tissue allotransplantation.</a> Microsurgery. 25 (5), 410-414 (2005).</li>
<li>Jang, Y., Park, Y. E., Yun, C. W., Kim, D. H., Chung, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+vest-collar+as+a+rodent+collar+to+prevent+licking+and+scratching+during+experiments%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Anim%22%5BJournal%5D)">The vest-collar as a rodent collar to prevent licking and scratching during experiments.</a> Lab Anim. 50 (4), 296-304 (2016).</li>
<li>Kern, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+rodent+orthotopic+forelimb+transplantation+model+that+allows+for+reliable+assessment+of+functional+recovery+resulting+from+nerve+regeneration%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Transplantation%22%5BJournal%5D)">A novel rodent orthotopic forelimb transplantation model that allows for reliable assessment of functional recovery resulting from nerve regeneration.</a> American Journal of Transplantation. 17 (3), 622-634 (2017).</li>
<li>Perez-Abadia, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Low-dose+immunosuppression+in+a+rat+hind-limb+transplantation+model%5BTitle%5D)+AND+%22Transplant+International%22%5BJournal%5D)">Low-dose immunosuppression in a rat hind-limb transplantation model.</a> Transplant International. 16 (12), 835-842 (2003).</li>
<li>Sucher, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Orthotopic+hind-limb+transplantation+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Orthotopic hind-limb transplantation in rats.</a> Journal of Visualized Experiments. (41), e2022(2010).</li>
<li>Fleissig, Y. Y., Beare, J. E., LeBlanc, A. J., Kaufman, C. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evolution+of+the+rat+hind+limb+transplant+as+an+experimental+model+of+vascularized+composite+allotransplantation%3A+Approaches+and+advantages%5BTitle%5D)+AND+%22SAGE+Open+Medicine%22%5BJournal%5D)">Evolution of the rat hind limb transplant as an experimental model of vascularized composite allotransplantation: Approaches and advantages.</a> SAGE Open Medicine. 8, 2050312120968721(2020).</li>
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<li>Nazzal, J. A., Johnson, T. S., Gordon, C. R., Randolph, M. A., Lee, W. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Heterotopic+limb+allotransplantation+model+to+study+skin+rejection+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Microsurgery%22%5BJournal%5D)">Heterotopic limb allotransplantation model to study skin rejection in the rat.</a> Microsurgery. 24 (6), 448-453 (2004).</li>
</ol>

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설치류의 정형소 사지 이식 모델은 문헌(15,16,17)에기재되어 있다. 그러나, 그들은 신경 수리가 필요, 근육 재부착, 그리고 대퇴골의 완벽한 골합성, 이는 매우 어려운 단계가 될 수 있습니다. 이러한 모델은 또한 설치류14에서더 높은 이환율 및 사망률과 연관되며, 특히 이식된 뒷다리의 정상적인 기능회복이 몇 달이 걸릴 수 있기 때문에 단기 후속 조치에서18개월이걸릴 수 있다. 그러나 성공시 이식 기능에 대한 장기적인 평가를 허용합니다. 이종외 사지 이식의 주요 제한은 이식편의 재관제 의 부족에 의해 유도된 근육 위축이다. 이전에 문헌에 발표된 바와 같이, 근육 섬유 부상은 5일 후 사멸19일이내에 발생할 수 있다. 이 한 달 후 상...

지난 2년간 VCA는 얼굴1,상반두 절단2,음경3및 기타 복잡한 조직 결함4,5를포함하여 심각한 손상을 입은 환자를 위한 혁신적인 치료법으로 진화해 왔다. 그러나, 평생 면역 억제의 결과는 아직도 이 복잡한 재건 수술의 더 넓은 적용을 방해합니다. 기본 연구는 거부 방지 전략을 개선하는 데 중요합니다. VCA 보존 시간을 늘리는 것은 이식 물류를 개선하고 기증자 풀을 늘리는 데도 필수적입니다 (VCA 기증자는 피부 톤, 해부학 크기, 성별을 포함한 견고한 장기 기증자보다 더 많은 기준을 충족해야하므로). 이러한 맥락에서, 쥐 사지 이식은 동종 이식6,7,신규 내성 유도 프로토콜8,보존 연구9,10,11의면역 거부에 대한 연구에서 널리 사용된다. 따라서 이러한 VCA 모델은 VCA 번역 연구를 마스터하는 핵심 요소입니다.
골연액은8,12,13,14에서VCA를 연구하는 신뢰할 수 있는 모델로 문헌에서 기술되었다. 직교 전지 이식은 이식 기능의 장기 평가를 허용하지만, 수술 후 사망률 및 사망률14와관련된 시간이 많이 소요되는 절차이다. 대조적으로, 이성애 사지 이식 모형은 비 기능적이지만, VCA에 재현가능한 연구를 가능하게 합니다. 수술 후 결과는 쥐 VCA 이식 연구의 시작 전에 안정적으로 예상될 수 있습니다. 이 연구는 3 주 간의 후속 기간 동안 수술 및 수술 후 발생할 수있는 빈번한 가능한 결과와 합병증을 포함하는 쥐의 부분 이성토성 골다움증 플랩 이식 모델을보고합니다.

<table><tbody><tr><td>24 GA angiocatheter</td><td>BD Insyte Autoguard</td><td>381412</td><td></td></tr><tr><td>4-0 봉합사 블랙 모노필라멘트 비흡수성 봉합</td>사 <td>Ethicon</td><td>1667</td><td>E-칼라를 목 뒤쪽으로 봉합하는 데 사용</td></tr><tr><td>4-0 봉합사 Coated Vicryl Plus Antibacterial</td><td>Ethicon</td><td>VCP496</td><td></td></tr><tr><td>Adson 조직 집게, 11cm, 1 x 2 치아 타이잉 플랫폼</td><td>ASSI ASSI</td><td>. </td><td></td>ATK26426</tr><tr><td>양극성 코드</td><td>ASSI</td><td>228000C</td><td></td></tr><tr><td>블랙 폴리아미드 모노필라멘트 USP 10-0, 4mm 3/8c</td><td>ARO수술용</td><td>T04A10N07-13</td><td>미세혈관 문합</td></tr><tr><td>Buprenorphine HCl</td><td>Pharmaceutical, Inc</td><td>42023-179-01</td><td></td></tr><tr><td>겸자</td><td>미세 과학 도구(FST)</td><td>18131-12</td><td></td></tr><tr><td>해부 가위 15cm, 원형 핸들 직경 8mm, 스트레이트 슬림 테이퍼드 블레이드 7mm, 립슐츠 패턴</td><td>ASSI</td><td>ASSI. </td><td></td>SAS15RVL</tr><tr><td>더블 마이크로 클램프 5.5 x 1.5mm</td><td>정밀 과학 도구(FST)</td><td>18040-22</td><td></td></tr><tr><td>엘리자베스 칼라</td><td>Braintree Scientific</td><td>EC-R1</td><td></td></tr><tr><td>집게 길이 13.5cm, 플랫 핸들, 너비 9mm 스트레이트 팁 직경 0.1mm (x2)</td><td>ASSI</td><td>ASSI. JFL31</td><td></td></tr><tr><td>Halsey Micro Needle Holder</td><td>Fine science tools (FST)</td><td>12500-12</td><td></td></tr><tr><td>Heparin Lock Flush Solution, USP, 100 units/mL</td><td>BD PosiFlush</td><td>306424</td><td></td></tr><tr><td>Isoflurane</td><td>Patterson Veterinary</td><td>14043-704-06</td><td></td></tr><tr><td>Jewelers Bipolar Forceps Non Stick 11cm, 직선 뾰족한 팁, 0.25mm 팁 직경</td><td>ASSI</td><td>ASSI. </td><td></td>BPNS11223</tr><tr><td>Lone Star Elastic Stays</td><td>CooperSurgical</td><td>3314-8G</td><td>대퇴 혈관 해부를 위해 서혜부 인대를 후퇴시키는 데 사용</td></tr><tr><td>Lone Star Self-Retaining Retractors</td><td>CooperSurgical</td><td>3301G</td><td></td></tr><tr><td>Micro-Mosquito Hemostats</td><td>Fine science tools (FST)</td> <td>13010-12</td><td>서혜부 지방 패드를 원위부로</td></tr> <tr><td>후퇴시키는 데 사용됩니다.바늘 홀더, 15cm 원형 핸들, 직경 8mm, 극상 곡선 죠 팁 직경 0.2mm, 잠금 장치 ASSI</td><td></td><td>ASSI 제외. B1582</td><td></td></tr><tr><td>나일론 봉합사 블랙 모노필라멘트 8-0, 6.5mm 3/8c</td><td>Ethilon</td><td>2808G</td><td>대퇴 혈관의 측부 가지를 접합하는 데 사용</td></tr><tr><td>오프셋 뼈 니퍼</td><td>정밀 과학 도구(FST)</td><td>16101-10</td><td></td></tr><tr><td>S& T 혈관 클램프 5.5 x 1.5 mm</td><td>정밀 과학 도구 (FST)</td> <td>00398-02</td><td></td></tr><tr><td>월튼 가위</td><td>정밀 과학 도구 (FST)</td> <td>14077-09</td><td></td></tr></tbody></table>

쥐의 부분 이종화 힌드래그 이식 모델

Partial Heterotopic Hindlimb Transplantation Model in Rats

혈관 화 복합 동종 이식 (VCA)는 복잡한 조직 결함 후 자가 외과 가능성없이 환자를위한 가장 진보 된 재건 옵션을 나타냅니다. 얼굴과 손 이식은 환자의 삶을 변화시켰으며, 새로운 미적 및 기능성 사회 기관을 제공합니다. 유망한 결과에도 불구하고 VCA는 평생 면역 억제 및 전염성 합병증으로 인해 여전히 실적이 저조합니다. 쥐는 면역 학적 경로 와 접목 거부 메커니즘을 조사 하는 생체 내 연구에 대 한 이상적인 동물 모델. 쥐는 또한 관류 및 냉동 보존 연구를 포함하여 새로운 복합 조직 이식 보존 기술에 널리 사용됩니다. 쥐에서 VCA에 사용 되는 모델 재현 해야 합니다., 신뢰할 수 있는, 낮은 수술 후 이환율과 사망률. 이종성 사지 이식 절차는 이 기준을 충족하고 치열 하 사지 이식 보다 수행 하기 쉽습니다. 설치류 미세 수술 모델을 마스터하려면 미세 수술 및 동물 관리에 대한 견고한 경험이 필요합니다. 본명에서 쥐에서 부분 이종요법 골염 플랩 이식의 신뢰할 수 있고 재현 가능한 모델을 보고, 수술 후 결과, 잠재적인 합병증의 예방 수단.

이 단일 연산자 연구에서, 30 개의 시너지 이종 부분 사지 이식이 수행되었다. 성공은 VCA 실패 또는 안락사를 요구하는 합병증의 부재로 수술 후 21일에 정의되었습니다. 접목의 정상적인 진화는 도 3로표현된다. 수령인의 부분 사지 조달 및 이식 개시에 대한 평균 기간은 각각 35 분과 105 분이었습니다. 평균 허혈 시간은 105 분이었다. 후속 기간 동안, 합병증의 두 가지 유형이 발생(표1)-조기 또는 늦게. 일부는 안락사를 필요로하고, 다른 사람들은 인양되었고, 모두 직원 수의사와 논의되었습니다(표 2). 이 연구는 설치류 미세 수술(보충 표 1)에서초보자를위한 저자의 경험과 조언을보고합니다.
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이 논문은 쥐에 있는 부분이성 골균 플랩 이식 프로토콜 및 중간 후속에 있는 그것의 잠재적인 결과를 제시합니다.

Vascularized composite allotransplantations (VCA) represent the most advanced reconstruction option for patients without autologous surgical possibilities ...

우리는 쥐에 있는 이성우 뒷다리 이식의 믿을 수 있고 재현가능한 외과 모형을 제시합니다. 이 기술은 VCA에 있는 보존 또는 면역 거부에 단기 적인 연구 결과 이상적입니다. 단계별 설명은 연수생이 신속하게 수술을 마스터 할 수 있습니다.시작하려면 다리의 단면 세 번째 에서 발목 위의 피부에 할례 절개를하십시오. 양극성 집게를 사용하여 포라이트 동맥의 사페누스 동맥과 말단 가지를 골격화하고 소생시킵니다. 위장골혈증, 솔레우스, 티비알리스 전방, 이두근 이두근이 노출될 때까지 이두근을 잘라냅니다.오른쪽 잉게날 주름에 2.5 센티미터 절개를하고 잉게인 지방 패드를 해부합니다. 잉구인인을 잡기 위해 물고기 후크 리트랙터를 사용합니다. 클램핑 집게로 구이성 지방 패드를 담그고 지방 패드를 철회하여 대퇴혈관을 노출시킵니다.대퇴선박을 해부하고, 머피 가지를 개별화하고, 8/0 나일론 넥타이로 리게이트를 한다. 27.5 게이지 바늘을 사용하여 음경 등쪽 정맥에 헤파린을 주입하여 기증자 쥐를 분리합니다. 엉덩이 주위의 피부 절개를 완료합니다.양극성 집게를 사용하여 이두근 여성용 골마비와 글루테우스 피상증 근육을 소생한 다음 중간 대퇴골 길이의 좌골 신경을 소생시키고 자른다. 대퇴골을 후방 대퇴 문장의 수준에서 근접하게 노출하고 인귀인인대의 수준에서 나일론 넥타이로 대퇴혈관을 호위한다. 합자 바로 아래에 있는 대퇴동맥에 대한 동맥 절제술을 수행하고 24게이지 협경화를 삽입합니다.대퇴골의 전방 측면을 노출하기 위해 페디클 아래에 남아있는 근육을 cauterize하고 잘라. 골 커터를 사용하여 경골을 근교로 자르고 대퇴골을 가능한 한 dis탈리게 자른다. 헤파린 식염수 의 두 밀리리터와 부분 뒷다리를 플러시하여 명확한 정맥 유출을 얻습니다.미생물 이송될 때까지 멸균 거즈에 뒤다리를 얼음 위에 놓습니다. 잉게인 지방 패드를 해부하고 대퇴 혈관을 노출하기 위해 disinal 지방 패드를 기울입니다. 후크를 사용하여 인내 인대와 클램핑 포스프를 철회하여 잉게날 지방 패드를 disinal지방 패드를 더 이상 유지합니다.대퇴선박을 해부하고, 머피 가지를 개별화하고, 나일론 넥타이를 가진 리게이트를 시연한다. 나일론 넥타이를 사용하여 상복부 선박 위에 두 선박을 리게이트합니다. 근사 클램프를 근교로 배치하고, 용기 렌즈를 팽창시키고, 헤파린 식염수로 헹구세요.엉덩이 위의 왼쪽 측면에 절개를하고 잉게인 주름에 피하 터널이있는 피하 포켓을 만듭니다. 미세 혈관 전달을 위한 피하 터널을 통해 부분 사지및 잉게인 지방 패드의 근접 부분을 놓습니다. 나일론 봉합사를 사용하여 정맥 과 동맥 해부학을 수행합니다.근사 클램프를 모두 제거하고 사지의 회전을 관찰합니다. 각 해부학의 가관성을 평가하기 위해 두 선박에 착유 테스트를 수행합니다. 이식된 사지의 내측에 세로 피부 절개를 하고 이식편을 삽입합니다.이식편의 과도한 피부를 제거하고 흡수 가능한 4/0 봉합사를 사용하여 별도의 봉합사및 실행 봉합사로 상처를 닫습니다. 이식된 사지의 잉구지방 패드와 수용자가 2개의 분리된 흡수성 봉합사를 사용하고, 미세혈관 해부학의 마지막 검진 후 잉게날 주름을 닫는다. 이성토성 뒷다리 모델의 진화는 연구가 끝날 때까지 모니터링되었다.모발 재성장은 수술 후 첫 주 동안 관찰되었고, 2주 후에 는 상처 가루가 나타났다. 혈관 화 복합 동종 이식 실패는 미세 혈관 혈전증으로 인해 첫 수술 후 주 동안 발생할 수 있습니다. 정맥 혈전증은 케이스의 20%에서 초기 안락사의 원인이었습니다, 모두는 수술 후 5일 전에 일어났습니다.피부는 파란색으로 나타났고 매일 어두워졌습니다. 자기 절단은 무감각 이식에 있는 심각한 관심사이고 수시로 수술 후 2일과 7일 사이에서 생깁니다. 접목 표면의 3분의 1 미만으로 제한되고 피부만 우려되는 경우, 흡수할 수 없는 봉합사를 사용한 외과적 신부및 봉합사는 직원과 상의할 수 있다.자기 절단의 예방은 수술 후 7 일까지 목에 바느질 된 e 칼라를 사용하고 동물의 외과 적 상처에 혈액이나 지각을 청소하는 데 의존합니다. 이식편의 여러 층의 심한 자가통은 동물의 안락사로 이어집니다. 진피 낭종은 수술 후 14 일 후에 나타났으며 때로는 누공 앞에 피부 괴사 센터를 가지고 있었습니다.이식 착고가 동물이 외래되는 것을 막지 못하고 접목 삽입 중에 페디클이 꼬이거나 단단하지 않도록하는 것이 중요합니다. 우리 팀은 이식 전에 조달된 사지에 있는 보존 연구 결과를 수행했습니다. 정전기 냉간 저장의 다른 지속 시간의 효과 뿐만 아니라 다른 사지 관류 프로토콜 평가 되었습니다.

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Research

연구

JoVE Journal

Immunology and Infection

면역학 및 감염학

여기서 우리는 금 본위 것으로 보인다 orthotopic 쥐 뒷다리 - 사지 이식 절차를...

쥐에서 Orthotopic 힌드 - 림브 이식

우리는 쥐의 이종성 복부 심장-폐 이식(HAHLT)에 대한 새로운 기술을 설명합니다. 이식 구성은 부분적으로 로드된 이식편 순환을 초래하여 직접적인 기능 평가를 가능하게 합니다. 이 모델은 이식된 이식편의 기능 및 면역학적 상태에 대한 급성 또는 만성 연구에 사용될 수 있습니다.

쥐 이소성 복부 심장 / 볼륨로드 구성에서 단일 폐 이식

혈관 화 된 복합 알로이 식은 이식 받는 사람에 게 생명을 바꾸는 혜택을 제공 하지만, 이식 거부와 레이의 생물학적 원인은 제대로 이해 되지 않습니다. 여기에 제시 된 설치류 수술 모델은 재현 가능 하 고 임상적으로 관련 된 모델을 제공 하 여 연구원 들이 그 발생을 막기 위해 거부 사건과 잠재적인 치료 전략을 평가할 수 있도록 합니다.

변형 된 이종 성 복합체 동종 요법 연구에 대 한 쥐에서 변성 이성애 자 골 진 피부 플랩 모델

이 프로토콜은 면역학 및 기능 적 회복의 동시 연구를 향해 기어드 혈관 복합 동종 이식 (VCA)의 견고하고 재현 가능한 모델을 제시한다. 손 바느질 혈관 아나토모와 신경 응착오른쪽 중간 허벅지 뒷다리 직교 이식에 세심한 기술에 투자 된 시간은 기능적 회복을 연구 할 수있는 능력을 산출한다.

다음 단계: 쥐의 기능적 회복을 극대화하기 위한 신경 응복 성 직교 힌지 이식 모델

우리는 쥐에 있는 이종 성 복부 심혼 이식의 모형을 기술합니다, 현재 전략의 수정을 암시하는, 이는 단순화한 외과 접근으로 이끌어 내는. 추가적으로, 우리는 쥐에 있는 추가 이식 면역학 분석을 허용하는 중요한 심장 근육 세포의 귀 주입에 의하여 새로운 거부 모델을 기술합니다.

쥐에 있는 이종 심혼 및 심장 근육 세포 이식을 위한 면역학 모형

이 프로토콜은 심장 판막의 동종 활성에 대한 연구를 허용하기 위해 신장 캡슐 아래에 대동맥 판막 전단지를 이식하는 간단하고 효율적인 방법을 설명합니다.

설치류의 이종 주제 심장 판막 이식을위한 단순화 된 모델

본 논문은 업데이트된 무균 기술, 진통 및 마취를 사용하여 이종 혈관 심장 이식을 위한 수정된 기술을 설명합니다.

무균 기술, 마취 및 진통의 현대 표준과 일치하는 수정된 쥐 이종 심장 이식 프로토콜

이 연구는 초보자가 배우고 수행할 수 있는 쥐의 재현 가능한 이종 복부 심장 이식 기술을 보여줍니다. 또한, 쥐의 새로운 대동맥 역류 모델은 이종 복부 심장 이식을 수행하고 수확 후 가이드와이어를 사용하여 기증자의 대동맥 판막을 손상시킴으로써 생성됩니다.

쥐의 수정된 이종 복부 심장 이식 및 새로운 대동맥 역류 모델

여기에 설명된 쥐 이소성 보조 간 이식 프로토콜은 간 동종이식 거부 반응의 메커니즘을 탐색하기 위한 실용적인 조사 도구를 제공합니다. 이 모델은 쥐의 정형소 간 이식의 수술 장애물과 동물의 스트레스를 완화하는 데 도움이 됩니다.

동종이식 거부 반응 연구를 위한 간절개술을 활용하는 이주제 보조 전체 간 쥐 이식 모델

우리는 이종 소성 후다리에서 목으로의 혈관 형성 종합 동체이식 마우스 모델을 제시합니다. 이 초미세수술 프로토콜은 0.3-0.5mm 혈관 문합을 포함하며, 나일론 필라멘트 유도와 정맥 커핑을 통합합니다. 이 연구는 관성 합성 동체 이식에서 내성, 허혈-재관류 손상, 면역학적 기전에 관한 번역 연구를 위한 신뢰할 수 있는 기반을 제공합니다.

쥐에서의 이소성 하지에서 목으로의 이식: 혈관 복합 동체이식의 초미세수술 모델

학습하세요 쥐의 부분 이종화 힌드래그 이식 수술 모델을 통해 혈관화 복합 동종이식에서 보존 및 면역 거부 반응 연구를 수행하는 방법을. 이 기법은 신뢰할 수 있고 재현 가능한 단기 연구에 적합합니다.

쥐의 부분 이종화 힌드래그 이식 모델

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