래트 무릎의 순환 로딩 유도 관절내 연골 병변 모델을 생성하기 위한 비침습적 방법

이 프로토콜은 동물의 무릎의 외과 적 개입이나 구조화 된 파괴없이 동물, 더 큰 동물에서 연골 손상을 일으킬 수 있음을 보여줍니다. 가장 큰 장점은 경험이 없어도 시술자가 반복적이라는 것이 입증되어 어떤 수술 방법으로도 달성하기 어렵다는 것입니다. 마취 된 쥐를 고정 장치에 장착하여 시작하십시오.

마취 된 쥐를베이스 플레이트의 배꼽에 놓고 오른쪽 무릎을 오목한 홈이있는 작은 수지 조각에 붙입니다. 오른쪽 뒷다리를 고관절 확장, 무릎 굴곡 및 발목 확장 위치에 놓고 무릎을 약 140도 구부립니다. 움직일 수있는 고정 장치의 쐐기 모양의 홈에 쥐의 발 뒤꿈치를 수용하십시오.

고정 장치를 응력 및 인장 시험 기기로 옮기고 로드셀과 접촉하지 않았는지 확인하십시오. 응력 및 인장 시험기 제어 소프트웨어를 열고 보정 버튼을 클릭합니다. 교정 후 프레임 상단을로드 셀에 조심스럽게 부착하십시오.

예압이 5뉴턴에 도달할 때까지 이동식 메인 작동 패널의 회전 손잡이를 천천히 켜서 무릎 관절이 프레임에 밀접하게 부착된 상태를 유지합니다. 주 메뉴에서 새 메서드 및 시스템 레이블 만들기를 클릭합니다. 테스트 모드를 주기로 설정하고 테스트 종류를 압축으로 설정합니다.

센서 레이블을 클릭하고 테스트 탭을 선택하여 한계가 60뉴턴 이내인지 확인합니다. 그런 다음 스트로크 탭을 선택하고 한계가 500mm 이내인지 확인합니다. 테스트 제어 레이블 아래에서 성장 기원을 선택하여 0.3% 또는 전체 규모로 기본 프로그램을 시작합니다.

첫 번째와 세 번째 섹션에서 제어되는 스트로크 속도를 초당 1mm로 설정한 다음 두 번째 섹션의 최대 테스트 힘을 20뉴턴으로 설정하고 네 번째 섹션의 최소 테스트 힘을 5뉴턴으로 설정합니다. 전체 지속 시간을 최대 부하의 경우 0.5초, 최소 부하의 경우 10초로 설정합니다. 페이지 하단의 예압 탭에서 on이 선택되어 있고 처짐 제거 속도가 분당 100mm로 설정되어 있고 최대 힘이 5뉴턴인지 확인합니다.

시편 레이블에 재료를 금속으로 설정합니다. 주 메뉴의 메서드 및 테스트 선택 섹션에서 방금 빌드한 메서드를 선택하고 시작을 클릭하여 테스트를 시작합니다. 주기 수를 60으로 설정합니다.

로딩 후 쥐를 케이지로 되돌리고 분석 시간이 될 때까지 충분한 공간과 음식 adlibitum이있는 케이지에서 12-12 시간의 밝은 어두운 일정을 유지하십시오. 20 뉴턴의 순환 로딩을받은 샘플에서 연골 세포 생존력의 단기 변화가 연구되었다. 죽은 연골 세포의 수는 외상 후 12 시간에 증가했습니다.

반대로, 살아있는 연골 세포의 수는 계속 감소했다. 20 뉴턴의 동적 로딩을받은 쥐 무릎의 관절 연골이 손상되었고 모든 샘플에서 외측 대퇴 과두에서 하나의 국소 병변 영역이 확인되었습니다. 병변 크기는 8주간의 관찰 기간 동안 점진적으로 증가하지 않았다.

병변과 영향을받지 않은 연골의 계면에 해당하는 경계가 감염된 부위에서 관찰 될 수 있습니다. 가장 중요한 것은 테스트 힘과 사이클 수의 적절한 설정입니다. 이 기술을 사용하면 혈액의 관절 범위에 대한 기계적 부하를 제어 할 수 있으므로 기계적 부하가 골관절염의 발병 또는 예방에 어떤 영향을 미치는지 탐구 할 수 있습니다.