Name: 래트 무릎의 순환 로딩 유도 관절내 연골 병변 모델을 생성하기 위한 비침습적 방법 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2021-07-05T14:30:00.000+00:00
Duration: 5 min 4 s
Description: 학습하세요 비침습적 순환 압축 로딩을 이용하여 래트 무릎 관절내 연골 병변을 유도하는 방법을. 이 기법은 수술 없이 연골 손상을 재현하며, 경험이 없는 연구자도 쉽게 반복할 수 있어 골관절염 연구에 활용됩니다.

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이 연구는 JSPS KAKENHI 보조금 (번호 JP18H03129 및 JP18K19739)에 의해 부분적으로 지원되었습니다. 이 연구는 또한 유니스 케네디 슈라이버 국립 아동 건강 및 인간 발달 연구소 (NICHD), 국립 신경 장애 및 뇌졸중 연구소 (NINDS) 및 국립 보건원 (NIBIB)의 지원을받는 재생 재활 연구 및 훈련 연합 (AR3T)의 자금 지원을 받았습니다. 내용은 전적으로 저자의 책임이며 반드시 국립 보건원의 공식 견해를 나타내는 것은 아닙니다.

이 프로토콜은 교토 대학 동물 연구위원회 (승인 번호 : Med kyo 17616)의 승인을 받았습니다.
1. 쥐 무릎에 생체 내 순환 압박 수행
<ol><li>실험동물 마취 유도<ol><li>12주령의 Wistar 랫트(256.8 ± 8.7 g)를 마취 박스에 5% 이소플루란 용액을 흡입하여 마취를 유도하였다.</li>
		<li>메데토미딘, 미다졸람, 부토르파놀을 포함한 3가지 마취제9의 혼합물을 쥐 체중 2mg/kg에 복강 주사하고 오른쪽 무릎 관절 주변을 면도합니다. 발가락 꼬집음에 대한 페달 반사가 부족하여 충분한 마취를 확인하십시오.</li>
	</ol></li>
	<li>마취 된 쥐를 고정 장치에 장착하십시오.<ol><li>마취된 쥐를 베이스 플레이트(그림 1)의 배에 놓고 오른쪽 무릎을 오목한 홈이 있는 작은 수지 조각에 부착합니다. 오른쪽 뒷다리를 고관절 확장, 무릎 굴곡 및 발목 확장 위치에 놓고 무릎을 약 140° 구부립니다. 움직일 수있는 고정 장치의 쐐기 모양의 홈에 쥐의 발 뒤꿈치를 수용하십시오.</li>
		<li>고정 장치를 응력/인장 시험 기기로 옮깁니다( 재료 표 참조). 로드셀과의 접촉이 없는지 확인한 후 응력/인장 시험 기기 제어 소프트웨어(재료 표)를 열고 교정 버튼을 클릭합니다. 교정 후 프레임 상단을로드 셀에 조심스럽게 부착하십시오. 무릎 관절을 프레임에 밀접하게 부착하려면 예압이 5N에 도달할 때까지 이동식 주 작동 패널의 회전 손잡이를 천천히 켭니다.</li>
	</ol></li>
	<li>로딩 방법을 빌드하고 압축 테스트를 설정합니다.<ol><li>주 메뉴에서 새 메서드 만들기를 클릭합니다| 시스템 레이블. 테스트 모드를 주기로 설정하고 테스트 유형을 압축으로 설정합니다. 센서 레이블을 클릭하고 테스트 탭을 선택하여 한계가 60N 이내인지 확인합니다. 또한 스트로크 탭을 선택하고 한계가 500mm 이내인지 확인합니다. 알림: 위의 단계는 응력 지점에 큰 변위가 있는 경우 즉시 작동을 중지합니다.</li>
		<li>테스트 컨트롤 레이블 아래에서 성장 기원을 선택하여 0.3%/전체 배율로 기본 프로그램을 시작합니다. 로딩 사이클의 4개 섹션 중 1번째 및 3번째 섹션에서 제어되는 스트로크 속도를 1mm/s로 설정합니다. 2번째 섹션의 최대 테스트 힘을 20N으로 설정하고 4번째 섹션의 최소 테스트 힘을 5N으로 설정합니다. "유지 지속 시간"을 피크 부하의 경우 0.5초, 최소 부하의 경우 10초로 설정합니다(그림 2). 알림: 이 단계는 모든 사이클을 정의하므로 조인트 표면이 서로 접촉하고 적절한 속도로 움직이며 동작이 유지되는지 확인하십시오.</li>
		<li>페이지 하단의 사전 로드 탭에서 On 이 선택되어 있고 처짐 제거 속도가 100mm/min으로 설정되어 있으며 최대 힘이 5N인지 확인합니다. 시편 레이블에서 재질 을 금속으로 설정합니다. 참고: 이러한 세부 설정은 각 제조업체에 따라 다를 수 있습니다.</li>
		<li>주 메뉴의 메서드 및 테스트 선택 섹션에서 방금 빌드한 메서드를 선택하고 시작을 클릭하여 테스트를 시작합니다. 알림: 하단의 표는 피크 하중 및 변위의 실제 측정값을 보여줍니다.</li>
		<li>주기 수를 60으로 설정합니다. 참고: 전체 로딩 세션에는 약 12분 동안 지속되는 60개의 사이클이 포함됩니다. 대조군에서, 랫트는 동일한 조건 하에서 12분 예비로딩 동안 5N 예비로딩을 받았다.</li>
	</ol></li>
	<li>적재 후 쥐를 새장으로 돌려 보내고 완전히 회복 될 때까지 모니터링하십시오. 케이지에서 12-12 시간의 밝은 어두운 일정을 유지하여 충분한 공간과 음식을 자유롭게 유지하십시오 . 필요한 실험 기간 후에, 분석을 위해 복강 내 주사 또는 이산화탄소 흡입 (1 h-8 주)에 주사 된 3 개의 마취제 혼합물의 과다 복용으로 랫트를 희생시킨다.</li>
</ol>

<ol><li>De Souza, R. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Non-invasive+axial+loading+of+mouse+tibiae+increases+cortical+bone+formation+and+modifies+trabecular+organization%3A+a+new+model+to+study+cortical+and+cancellous+compartments+in+a+single+loaded+element%5BTitle%5D)+AND+%22Bone%22%5BJournal%5D)">Non-invasive axial loading of mouse tibiae increases cortical bone formation and modifies trabecular organization: a new model to study cortical and cancellous compartments in a single loaded element.</a> Bone. 37 (6), 810-818 (2005).</li>
<li>Poulet, B., Hamilton, R. W., Shefelbine, S., Pitsillides, A. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterizing+a+novel+and+adjustable+noninvasive+murine+joint+loading+model%5BTitle%5D)+AND+%22Arthritis+and+Rheumatism%22%5BJournal%5D)">Characterizing a novel and adjustable noninvasive murine joint loading model.</a> Arthritis and Rheumatism. 63 (1), 137-147 (2011).</li>
<li>Wu, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Early+response+of+mouse+joint+tissue+to+noninvasive+knee+injury+suggests+treatment+targets%5BTitle%5D)+AND+%22Arthritis+and+Rheumatism%22%5BJournal%5D)">Early response of mouse joint tissue to noninvasive knee injury suggests treatment targets.</a> Arthritis and Rheumatism. 66 (5), 1256-1265 (2014).</li>
<li>Poulet, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intermittent+applied+mechanical+loading+induces+subchondral+bone+thickening+that+may+be+intensified+locally+by+contiguous+articular+cartilage+lesions%5BTitle%5D)+AND+%22Osteoarthritis+Cartilage%22%5BJournal%5D)">Intermittent applied mechanical loading induces subchondral bone thickening that may be intensified locally by contiguous articular cartilage lesions.</a> Osteoarthritis Cartilage. 23 (6), 940-948 (2015).</li>
<li>Ko, F. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Progressive+cell-mediated+changes+in+articular+cartilage+and+bone+in+mice+are+initiated+by+a+single+session+of+controlled+cyclic+compressive+loading%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Orthopaedic+Research%22%5BJournal%5D)">Progressive cell-mediated changes in articular cartilage and bone in mice are initiated by a single session of controlled cyclic compressive loading.</a> Journal of Orthopaedic Research. 34 (11), 1941-1949 (2016).</li>
<li>Adebayo, O. O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+subchondral+bone+properties+and+changes+in+development+of+load-induced+osteoarthritis+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Osteoarthritis+Cartilage%22%5BJournal%5D)">Role of subchondral bone properties and changes in development of load-induced osteoarthritis in mice.</a> Osteoarthritis Cartilage. 25 (12), 2108-2118 (2017).</li>
<li>Ko, F. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+cyclic+compression+causes+cartilage+degeneration+and+subchondral+bone+changes+in+mouse+tibiae%5BTitle%5D)+AND+%22Arthritis+and+Rheumatism%22%5BJournal%5D)">In vivo cyclic compression causes cartilage degeneration and subchondral bone changes in mouse tibiae.</a> Arthritis and Rheumatism. 65 (6), 1569-1578 (2013).</li>
<li>Ji, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+in+vivo+cyclic+compressive+loading+on+the+distribution+of+local+Col2+and+superficial+lubricin+in+rat+knee+cartilage%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Orthopaedic+Research%22%5BJournal%5D)">Effects of in vivo cyclic compressive loading on the distribution of local Col2 and superficial lubricin in rat knee cartilage.</a> Journal of Orthopaedic Research. 39 (3), 543-552 (2021).</li>
<li>Kawai, S., Takagi, Y., Kaneko, S., Kurosawa, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+three+types+of+mixed+anesthetic+agents+alternate+to+ketamine+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+Animals%22%5BJournal%5D)">Effect of three types of mixed anesthetic agents alternate to ketamine in mice.</a> Experimental Animals. 60 (5), 481-487 (2011).</li>
<li>Iijima, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Destabilization+of+the+medial+meniscus+leads+to+subchondral+bone+defects+and+site-specific+cartilage+degeneration+in+an+experimental+rat+model%5BTitle%5D)+AND+%22Osteoarthritis+Cartilage%22%5BJournal%5D)">Destabilization of the medial meniscus leads to subchondral bone defects and site-specific cartilage degeneration in an experimental rat model.</a> Osteoarthritis Cartilage. 22 (7), 1036-1043 (2014).</li>
</ol>

저자는 이해 상충이 없음을 선언합니다.

처음으로, 현재 프로토콜은 마우스2와 같은 더 작은 설치류에서의 관절 내 손상 모델과 유사하게 쥐의 외측 대퇴 과두에 로딩 유도 연골 병변의 모델을 확립하는 방법을 보여줍니다. 그러나 마우스의 로딩 프로토콜은 심각한 골괴사 형성 및 십자 인대 병변을 유발하여 주기적 압축의 효과를 평가하는 데 이상적이지 않았습니다. 현재의 프로토콜은 훨씬 낮은 로딩 포스를 가진 쥐에서 국소 연골 병변을 생성했습니다. 적절한 크기, 속도 및 스트레스 지속 시간만이 뼈 조직을 손상시키지 않고 연골을 파괴할 수 있기 때문에 올바른 로딩 방법 설정은 프로토콜에 매우 중요합니다.
변위 한계 설정 (프로토콜 단계 1.3.1)은 인대 파열시 또는 쥐가 로딩 세션 중에 마취에서 깨어난 경우 즉시 기기를 중지하기 때문에 중요합니다. 최적의 최대 하중과 쥐의 나이는 아직 결정되지 않았습니다. 그러나 예비 실험에서 50N 이상의 하중은 쥐의 무릎에서 ACL 파열 가능성이 높...

전통적으로 내측 반월판의 전방 십자 인대 (ACL) 절개 또는 불안정화는 작은 동물의 외상 후 골관절염 (PTOA)을 조사하는 데 최적으로 간주되었습니다. 최근 몇 년 동안 비 침습적 순환 압축 모델이 PTOA를 연구하는 데 사용되었습니다. 이 모델은 원래기계적 하중1에 대한 해면골 반응을 조사하기 위해 설계되었으며 PTOA 연구 2,3,4,5,6을 위한 비수술적 동물 모델로 수정되었습니다. 이론적 근거는 주기적인 외력을 가하여 관절 연골을 충돌시켜 일련의 염증 반응을 유발하는 것입니다. 그러나이 모델은 마우스에만 적용되었으며 더 큰 동물에 대한 적절한 하중 크기는 논의되지 않았습니다.
이전 모델의 또 다른 문제점은 대용량 프로토콜이 너무 많은 사이클을 포함하여,여러 샘플에서 원치 않는 부작용인 연골하 뼈의 과도한 비후를 유발한다는 것이다7. 따라서, 큰 동물에 대해 적절한 크기와 더 낮은 로딩 부작용을 갖는 주기적 압축의 새로운 방법이 개발되었다8. 현재 기사의 전반적인 목표는 쥐에서 비침습적 순환 압축 모델의 프로토콜을 설명하고 연골 변성의 대표적인 결과를 관찰하는 것입니다. 현재 프로토콜은 쥐에 대한 비 침습적 순환 압축 모델의 적용에 관심이있는 독자를 도울 것입니다.

<table><tbody><tr><td>소동물용 마취기구</td><td>SHINANO MFG CO.,LTD.</td><td>SN-487-0T</td><td></td></tr><tr><td>자필 서명 AG-X</td><td>Shimadzu Corp</td><td>N.A.</td><td>정밀 범용 / 인장 시험기</td></tr><tr><td>Fluoview FV10i 현미경</td><td>Olympus Corp</td><td>N.A.</td><td>완전 자동화된 컨포칼 레이저 스캐닝 현미경</td></tr><tr><td>ISOFLURANE 흡입 솔루션</td><td>, Pfizer Japan Inc.</td><td>(01)14987114133400</td><td></td></tr><tr><td>LIVE/DEA 생존력/세포독성 키트</td><td>Thermo Fisher Scientific Japan Inc</td><td>L3224</td><td>세포의 생존력을 결정하기 위한 빠르고 쉬운 2색 분석</td></tr><tr><td>TRAPEZIUM X Software</td><td>Shimadzu Corp</td><td>N.A.</td><td>Autograph AG-X용 데이터 처리 소프트웨어</td></tr></tbody></table>

래트 무릎의 순환 로딩 유도 관절내 연골 병변 모델을 생성하기 위한 비침습적 방법

A Non-Invasive Method for Generating the Cyclic Loading-Induced Intra-Articular Cartilage Lesion Model of the Rat Knee

원발성 골관절염 (OA)의 병태 생리학은 아직 명확하지 않습니다. 그러나 상대적으로 젊은 연령 그룹에서 OA의 특정 하위 분류는 관절 연골 손상 및 인대 경련의 병력과 관련이 있을 수 있습니다. 무릎 OA의 수술 동물 모델은 외상 후 OA의 발병 및 진행을 이해하는 데 중요한 역할을 하며 이 질병에 대한 새로운 치료법 개발을 돕습니다. 그러나 최근 중재 평가에 영향을 미칠 수있는 외상성 염증을 피하기 위해 비수술 모델이 고려되었습니다. 
이 연구에서는 생체 내 주기적 압축 하중에 의해 유도된 관절 내 연골 병변 쥐 모델이 개발되어 연구자들은 (1) 국소 연골 손상을 일으킬 수 있는 최적의 하중 크기, 속도 및 지속 시간을 결정할 수 있었습니다. (2) 연골세포 활력의 외상 후 시공간적 병리학적 변화를 평가하고; (3) 관절 압축 하중에 대한 적응 및 복구 메커니즘에 관여하는 파괴 또는 보호 분자의 조직학적 발현을 평가합니다. 이 보고서는 쥐 모델에서이 새로운 연골 병변에 대한 실험 프로토콜을 설명합니다.

20 N 순환 로딩을 실시한 샘플에서 연골세포 생존율의 단기 변화(1시간 및 12시간)의 대표적인 결과가 얻어졌다. 그림 3에서 볼 수 있듯이 죽은 연골 세포의 수 (적색 형광)는 외상 후 12 시간에 증가했습니다. 반대로, 살아있는 연골 세포의 수 (녹색 형광)는 계속 감소했으며, 일부 샘플에는 감염된 부위에 살아있는 연골 세포가 포함되어 있지 않았습니다.
조직학은 20N 동적 로딩을받은 쥐 무릎의 관절 연골이 손상되었음을 보여 주었고, 모든 샘플에서 외측 대퇴 과두에서 하나의 국소 병변 영역이 확인되었습니다 (그림 4). 그러나 병변 크기는 8 주 관찰 기간 동안 점진적으로 증가하지 않았습니다. 병변과 영향을받지 않은 연골의 계면에 해당하는 경계가 감염된 부위에서 관찰 될 수 있습니다.
<p class="jove_content" fo:keep-together.wi...

여기에서는 20N 이상의 60 순환 압박에 의해 생성 된 쥐 무릎의 순환 로딩 유도 관절 내 연골 병변 모델을 제시하여 쥐의 대퇴 과두 연골에 손상을 입 힙니다.

The pathophysiology of primary osteoarthritis (OA) remains unclear. However, a specific subclassification of OA in relatively younger age groups is likely ...

이 프로토콜은 동물의 무릎의 외과 적 개입이나 구조화 된 파괴없이 동물, 더 큰 동물에서 연골 손상을 일으킬 수 있음을 보여줍니다. 가장 큰 장점은 경험이 없어도 시술자가 반복적이라는 것이 입증되어 어떤 수술 방법으로도 달성하기 어렵다는 것입니다. 마취 된 쥐를 고정 장치에 장착하여 시작하십시오.마취 된 쥐를베이스 플레이트의 배꼽에 놓고 오른쪽 무릎을 오목한 홈이있는 작은 수지 조각에 붙입니다. 오른쪽 뒷다리를 고관절 확장, 무릎 굴곡 및 발목 확장 위치에 놓고 무릎을 약 140도 구부립니다. 움직일 수있는 고정 장치의 쐐기 모양의 홈에 쥐의 발 뒤꿈치를 수용하십시오.고정 장치를 응력 및 인장 시험 기기로 옮기고 로드셀과 접촉하지 않았는지 확인하십시오. 응력 및 인장 시험기 제어 소프트웨어를 열고 보정 버튼을 클릭합니다. 교정 후 프레임 상단을로드 셀에 조심스럽게 부착하십시오.예압이 5뉴턴에 도달할 때까지 이동식 메인 작동 패널의 회전 손잡이를 천천히 켜서 무릎 관절이 프레임에 밀접하게 부착된 상태를 유지합니다. 주 메뉴에서 새 메서드 및 시스템 레이블 만들기를 클릭합니다. 테스트 모드를 주기로 설정하고 테스트 종류를 압축으로 설정합니다.센서 레이블을 클릭하고 테스트 탭을 선택하여 한계가 60뉴턴 이내인지 확인합니다. 그런 다음 스트로크 탭을 선택하고 한계가 500mm 이내인지 확인합니다. 테스트 제어 레이블 아래에서 성장 기원을 선택하여 0.3% 또는 전체 규모로 기본 프로그램을 시작합니다.첫 번째와 세 번째 섹션에서 제어되는 스트로크 속도를 초당 1mm로 설정한 다음 두 번째 섹션의 최대 테스트 힘을 20뉴턴으로 설정하고 네 번째 섹션의 최소 테스트 힘을 5뉴턴으로 설정합니다. 전체 지속 시간을 최대 부하의 경우 0.5초, 최소 부하의 경우 10초로 설정합니다. 페이지 하단의 예압 탭에서 on이 선택되어 있고 처짐 제거 속도가 분당 100mm로 설정되어 있고 최대 힘이 5뉴턴인지 확인합니다.시편 레이블에 재료를 금속으로 설정합니다. 주 메뉴의 메서드 및 테스트 선택 섹션에서 방금 빌드한 메서드를 선택하고 시작을 클릭하여 테스트를 시작합니다. 주기 수를 60으로 설정합니다.로딩 후 쥐를 케이지로 되돌리고 분석 시간이 될 때까지 충분한 공간과 음식 adlibitum이있는 케이지에서 12-12 시간의 밝은 어두운 일정을 유지하십시오. 20 뉴턴의 순환 로딩을받은 샘플에서 연골 세포 생존력의 단기 변화가 연구되었다. 죽은 연골 세포의 수는 외상 후 12 시간에 증가했습니다.반대로, 살아있는 연골 세포의 수는 계속 감소했다. 20 뉴턴의 동적 로딩을받은 쥐 무릎의 관절 연골이 손상되었고 모든 샘플에서 외측 대퇴 과두에서 하나의 국소 병변 영역이 확인되었습니다. 병변 크기는 8주간의 관찰 기간 동안 점진적으로 증가하지 않았다.병변과 영향을받지 않은 연골의 계면에 해당하는 경계가 감염된 부위에서 관찰 될 수 있습니다. 가장 중요한 것은 테스트 힘과 사이클 수의 적절한 설정입니다. 이 기술을 사용하면 혈액의 관절 범위에 대한 기계적 부하를 제어 할 수 있으므로 기계적 부하가 골관절염의 발병 또는 예방에 어떤 영향을 미치는지 탐구 할 수 있습니다.

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동물 모델은 조직 공학 이식편을 평가하기 위한 중요한 도구입니다. 이 논문은 전방 십자 인대 조직 공학에 사용하기 위한 전기 방사성 생분해성 고분자 이식편을 준비하기 위한 프로토콜과 쥐 모델에 이식하기 위한 수술 프로토콜을 제시합니다.

엔지니어링 전방 십자 인대 이식의 평가 흉선 쥐 모델

우리는 응용 프로그램 제어 기계 부하 또는 영향의 후 그대로 murine 관절의 관절 표면에 세포 상해/죽음의 공간 범위를 평가 하는 방법을 제시. 관절염, 유전 요인 및 다른 로드 regimens 영향 chondrocytes 제자리에서 의 취약점을 조사 하기 위해이 메서드를 사용할 수 있습니다.

실시간 시각화 및 Chondrocyte 부상 때문에 완전히 그대로 Murine 연골 Explants 기계적 부하의 분석

본 프로토콜은 내측 소인대를 절단하여 마우스 무릎을 불안정하게 한 후 관절 연골의 표면에 조절된 마이크로블레이드 스크래치를 기술한다. 이 동물 모델은 골괴사 형성, 골경화증 및 초기 단계 통증을 연구하기에 적합한 가속 형태의 골관절염(OA)을 제시합니다.

내측 반월판 및 연골 스크래치 쥐의 불안정화 가속화된 골관절염의 모델

토끼의 개방성 내측 대퇴골 과두 충격 모델은 외상 후 골관절염(PTOA)과 PTOA 진행을 완화하기 위한 새로운 치료 전략을 연구하는 데 신뢰할 수 있습니다. 이 프로토콜은 임팩터 헤드가 있는 캐리지 기반 드롭 타워를 사용하여 토끼의 후방 내측 대퇴골 과두의 고립된 연골 결손을 생성합니다.

토끼에서 외상 후 골관절염을 생성하기 위한 재현 가능한 연골 충격 모델

이 프로토콜은 쥐의 대퇴골 활차 홈에 구멍을 뚫고 후속 통증 행동 및 조직병리학적 변화를 측정하여 전층 연골 결손(FTCD) 모델을 설정합니다.

전층 연골 결손의 쥐 모델 개발 및 평가

비침습적 전방십자인대 손상은 마우스에서 외상 후 골관절염(PTOA)을 시작하기 위한 신뢰할 수 있고 임상적으로 관련된 방법입니다. 이 손상 방법은 또한 프로테아제 활성화 가능한 근적외선 프로브 및 형광 반사 이미징을 사용하여 손상 후 초기 시점에서 관절의 프로테아제 활성을 생체 내에서 정량화할 수 있습니다.

비침습적 압박 유도 전방 십자인대(ACL) 손상 및 생쥐의 프로테아제 활성에 대한 생체 내 이미징

여기에서는 설치류에서 무릎 골관절염을 유발하는 신뢰할 수 있는 모델로서 전방십자인대(ACL)를 횡단하는 수술 방법과 무릎 활액 채취, 무릎 부종 측정 및 골관절염 중증도 평가를 위한 방법론을 설명합니다.

관절 염증 및 외상 후 골관절염을 연구하기 위한 설치류 모델의 전방십자인대 절개 및 활액 세척

여기서는 양 무릎에서 통제된 골연골 병변을 생성하는 통합 프로토콜을 제시하여 뼈 및 연골 조직 재생 연구에 적합한 실험 모델을 구축합니다. 프로토콜은 동물 복지에 미치는 영향과 결과 변동을 최소화하는 기법을 사용하여 대퇴골 과과에 전층 골연골 결손을 유도하는 방법을 제시합니다.

전층 골연골 결함의 양 모델 구축 및 평가

생체 외 관류 폐 (EVLP)은 인간의 폐 이식 더욱 쉽게 이용할 공여체 풀 장기를 평가하고 확장 할 수 있도록함으로써 될 수있다. 여기서는 쥐 EVLP 프로그램 및 미래의 확장을위한 재현성있는 모델을 허용 세목의 개발을 기술한다.

고립의 방법<em&gt; 전의 VIVO</em쥐 모델에서&gt; 폐 관류 : 쥐 EVLP 프로그램 개발에서 교훈을

우리는 단단한 내시경을 사용하여 마우스의 결장 병리학 치료를 위한 치료제의 효능을 종단적으로 모니터링하는 방법을 설명합니다. 이 프로토콜은 살아있는 마우스에서 개별 종양의 치료 반응을 특성화하고 잠재적인 질병 재발을 모니터링하는 데 쉽게 사용할 수 있습니다.

라이브 마우스의 직렬 내시경 이미징을 사용하여 소장 병변에 대한 새로운 치료제의 효능의 비 침습적 평가

학습하세요 비침습적 순환 압축 로딩을 이용하여 래트 무릎 관절내 연골 병변을 유도하는 방법을. 이 기법은 수술 없이 연골 손상을 재현하며, 경험이 없는 연구자도 쉽게 반복할 수 있어 골관절염 연구에 활용됩니다.

래트 무릎의 순환 로딩 유도 관절내 연골 병변 모델을 생성하기 위한 비침습적 방법

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