Wistar 알비노 쥐에서 대퇴골 절골술 모델을 개발하기 위한 프로토콜

이 대퇴골 절골술 모델은 연구자들이 골절 치유 과정을 연구하고 약물이 골절 치유에 어떤 영향을 미칠 수 있는지 평가하는 데 도움이 될 수 있습니다. 간단하고 따라하기 쉬운 설치류 모델로 연구자가 약물에 뼈 치유 특성이 있는지 확인하고 작용 메커니즘을 이해하는 데 도움이 될 수 있습니다. 주로 골절 치유를 관찰하고 분석하는 데 중점을 두지만 질병 발병 기전에 대한 통찰력을 제공할 수도 있습니다.

이 방법은 건강과 질병의 뼈 치유에 대한 향후 연구를 안내 할 수 있습니다. 잠재적 인 골단백 동화 약물의 효과를 평가하는 데 사용할 수 있습니다. K-와이어로 적절한 파괴선과 골절 고정을 유도하는 것은 어려운 일입니다.

몇 번의 연습 세션이 도움이 될 것입니다. 이 방법의 단순성과 재현성은 시각적 시연에서 분명합니다. 내 실험실의 주니어 레지던트 인 Pawan Pagaku가 절차를 시연하는 데 도움이 될 것입니다. 시작하려면 왁스가 들어있는 왁스 블록을 수술대에 2.5 센티미터 깊이까지 놓고 멸균 커튼으로 덮으십시오.

오른쪽 허벅지 옆쪽에 1cm 수직 피부 절개를 한 후 Metzenbaum 가위를 사용하여 깊은 근막을 분리하여 광대 한 외측 근육을 노출시킵니다. 대퇴골의 축에 도달 할 때까지 근육 섬유와 나란히 광대 한 외측을 나눕니다. 그런 다음 골막 엘리베이터를 사용하여 뼈에 부착 된 근육에서 뼈를 제거하십시오.

골막 안팎에 국소 마취를 주입 한 후 15 번 수술 칼날을 사용하여 대퇴골 축의 중간 1/3에 움푹 들어간 곳을 만듭니다. 움푹 들어간 곳에 끌을 놓고 망치로 끌을 부드럽게 두드려 샤프트의 중간 1/3에있는 뼈를 완전히 골절시킵니다. 배터리로 작동되는 파워 드릴을 사용하여 고정 된 1mm 멸균 K- 와이어를 사용하여 내부적으로 골절을 고정하십시오.

K- 와이어를 골절 부위를 통해 원위 조각의 수질 운하로 통과시킵니다. 그런 다음 대퇴골의 말단부를 통해 K- 와이어를 뚫습니다. 골절을 줄인 후, K- 와이어를 말단부에서 근위 조각의 운하로 전진시켜 trochanteric 영역에서 구입할 때까지 전진시킵니다.

와이어 커터를 사용하여 피부를 통해 튀어 나온 K- 와이어의 말단 부분을 잘라냅니다. 펜치를 사용하여 K-와이어 끝을 약 90도로 구부리고 Betadine에 적신 거즈 붕대를 핀 부위 드레싱에 사용합니다. K- 와이어는 골절을 감소 된 위치로 유지하기위한 골수 내 부목 역할을합니다.

멸균 거즈 또는 동맥 집게를 사용하여 출혈 부위에 압력을 가하여 출혈을 멈추십시오. 4-0 나일론 봉합사를 사용하여 피부를 닫기 전에 완전한 지혈을 확인하십시오. Betadine으로 상처를 닦고 멸균 거즈와 미세 기공 접착 테이프로 덮으십시오.

수술 후 관리를 위해 쥐를 새장으로 돌려 보내고 수술 후 5 일 동안 표준 반합성 식단과 항생제 및 진통제를 복강 내로 계속 제공하십시오. 마지막으로, 일주일에 한 번 골절 부위의 X- 레이로 뼈 치유를 평가하십시오. 골절을 유도하기 전, 및 수술 후 1일 후에 K-wire NC2를 사용한 쥐의 대퇴골의 엑스레이가 여기에 도시되어 있다.

골절 치유는 굳은 살 형성을 평가하기 위해 수술 부위의 순차적 인 주간 X- 레이를 촬영하여 방사선 학적으로 모니터링됩니다. 골절은 골수 내 K 와이어로 감소되고 고정되어 있습니다. 미리 정해진 시점에서 희생 후, 대퇴골을 포르말린으로 조심스럽게 보존하고, 이어서 뼈 석회화를 시켰다.

굳은 살이있는 뼈는 최적의 석회질 제거 후에 얻어졌습니다. 온전한 굳은살과 굳은살의 시상 부분이 여기에 표시됩니다. 캘러스는 다른 기술을 사용하여 평가하기 전에 최적의 석회질 제거를 보장하기 위해 간헐적으로 평가됩니다.

골절 부위의 헤마톡실린 및 에오신 염색 부분의 저배율 및 고배율 이미지가 여기에 표시됩니다. 골절 부위의 염색 된 부분은 연골과 새로운 뼈가 형성되는 단단한 굳은 살을 보여줍니다. 뼈의 골절 된 끝과 두 번째 피질 영역이 여기에서 볼 수 있습니다.

골막은 상처의 통증에 가장 민감한 부분이며, 절골술 전에 국소 마취제로 골절 부위의 골막에 침투하는 것이 필수적이다. 이어서 정량적 조직형태 분석을 위한 굳은살, micro-CT의 면역조직화학적 및 방사선학적 분석이 뒤따르며, 캘러스의 생체역학적 강도를 분석하여 혈청을 분석할 수 있다. 이 기술은 골 형성 잠재력, 작용 메커니즘 및 유망한 골동화 약물의 비교 분석을 결정하는 데 유용합니다.