피하 농양에서 외과용 임플란트의 생물막 형성에 대한 정량적 평가를 위한 고유한 마우스 모델

우리의 연구는 임플란트 관련 감염에 대한 혁신적인 치료법을 개발하는 것을 목표로 합니다. 잠재적인 항균 특성을 가진 새로운 생체 재료를 평가하기 위해 우리는 보다 귀중한 생체 내 테스트 접근 방식을 개발합니다. 이전 동물 모델은 일반적으로 동물당 단일 임플란트 관련 감염을 생성하는 것으로 제한되어 있으며, 이는 여러 동물로부터 얻은 평균 결과에 상당한 변동성을 초래할 수 있습니다.

우리의 마우스 모델을 사용하면 단일 동물 내에서 동일한 감염 조건에 노출된 두 각인을 직접 비교할 수 있으므로 항균 활성에 대한 귀중한 평가를 제공합니다. 우리의 생체 내 실험 방법론은 잠재적으로 항균 생체 재료에 대한 연구를 가속화하여 향후 임플란트 관련 감염에 대한 새로운 치료법 개발에 기여할 것입니다. 우리의 실험적 접근 방식은 기존 연구 환경에서 표준 장비와 간단한 절차로 복제할 수 있으므로 항균 활동의 메커니즘에 대한 이해를 향상시킵니다.

시작하려면 마취된 마우스를 수술 침대에 놓습니다. 10밀리리터 주사기에 멸균 공기를 채우고 27게이지 바늘을 배출구에 부착합니다. 이제 마우스의 목 기저부를 부드럽게 꼬집고 들어 올려 피하 조직과 근막 사이에 공간을 만듭니다.

마우스의 견갑골 사이의 정중선에 바늘을 놓고 3밀리리터의 멸균 공기를 피하로 주입하여 에어 파우치를 만듭니다. 그런 다음 열 패드로 데운 케이지에 마우스를 되돌립니다. 이틀에 한 번씩 멸균 공기 3밀리리터를 주입하여 캐비티의 팽창을 유지하고 성숙한 파우치를 만듭니다.

동물을 마취한 후 부피바카인을 피하 주사합니다. 파우치 상단에 정중선 세로 3mm 절개를 하고 연결된 와이어가 들어 있는 18게이지 바늘을 구멍을 통해 파우치에 삽입합니다. 25게이지 척추 바늘의 내부 주사기를 사용하여 와이어를 밀어냅니다.

18게이지 바늘 끝을 파우치 안에 남겨두고 내부 실린더를 부드럽게 제거하고 주사기를 사용하여 Xen36 배양액을 조심스럽게 주입합니다. 모든 바늘을 제거하고 상처 클립을 사용하여 피부를 닫은 다음 국소 피부 접착제로 밀봉합니다. 마지막으로 모니터링을 위해 열 패드로 데운 케이지에 마우스를 되돌립니다.

크리스탈 바이올렛 염색은 관찰 가능한 차이 없이 두 와이어에서 일관된 생물막 형성을 보여주었습니다. 용존 크리스탈 바이올렛 분석의 흡광도 측정은 두 와이어 사이의 박테리아 부하에 통계적으로 유의미한 차이가 없음을 보여주었습니다. 16s 리보솜 RNA 및 LuxA 유전자의 콜로니 형성 단위 계수 및 정량적 PCR 분석은 두 와이어 사이의 박테리아 부하에 통계적으로 유의미한 차이가 없음을 보여주었습니다.