Name: 생체 내 영상 검사는 관절 내 백혈구의 이동 행동을 밝혀냅니다 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-12-09T14:30:00.000+00:00
Duration: 10 min 10 s
Description: 배우세요 관절염 연구를 위한 생체 내 영상 기술로 백혈구 이동 행동과 염증 과정의 분자 역학을 실시간으로 관찰하는 방법입니다. 이 프로토콜은 면역 세포 역학 이해와 새로운 치료 전략 개발에 활용됩니다.

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<ol><li>Nourshargh, S., Alon, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Leukocyte+migration+into+inflamed+tissues%5BTitle%5D)+AND+%22Immunity%22%5BJournal%5D)">Leukocyte migration into inflamed tissues.</a> Immunity. 41 (5), 694-707 (2014).</li>
<li>Miyabe, Y., Lian, J., Miyabe, C., Luster, A. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chemokines+in+rheumatic+diseases%3A+pathogenic+role+and+therapeutic+implications%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Rheumatol%22%5BJournal%5D)">Chemokines in rheumatic diseases: pathogenic role and therapeutic implications.</a> Nat Rev Rheumatol. 15 (12), 731-746 (2019).</li>
<li>Griffith, J. W., Sokol, C. L., Luster, A. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chemokines+and+chemokine+receptors%3A+positioning+cells+for+host+defense+and+immunity%5BTitle%5D)+AND+%22Annu+Rev+Immunol%22%5BJournal%5D)">Chemokines and chemokine receptors: positioning cells for host defense and immunity.</a> Annu Rev Immunol. 32, 659-702 (2014).</li>
<li>Murooka, T. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((HIV-infected+T+cells+are+migratory+vehicles+for+viral+dissemination%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">HIV-infected T cells are migratory vehicles for viral dissemination.</a> Nature. 490 (7419), 283-287 (2012).</li>
<li>Mempel, T. R., Henrickson, S. E., Von Andrian, U. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((T-cell+priming+by+dendritic+cells+in+lymph+nodes+occurs+in+three+distinct+phases%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">T-cell priming by dendritic cells in lymph nodes occurs in three distinct phases.</a> Nature. 427 (6970), 154-159 (2004).</li>
<li>Sumen, C., Mempel, T. R., Mazo, I. B., von Andrian, U. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intravital+microscopy%3A+visualizing+immunity+in+context%5BTitle%5D)+AND+%22Immunity%22%5BJournal%5D)">Intravital microscopy: visualizing immunity in context.</a> Immunity. 21 (3), 315-329 (2004).</li>
<li>Wang, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Visualizing+the+function+and+fate+of+neutrophils+in+sterile+injury+and+repair%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Visualizing the function and fate of neutrophils in sterile injury and repair.</a> Science. 358 (6359), 111-116 (2017).</li>
<li>Lammermann, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neutrophil+swarms+require+LTB4+and+integrins+at+sites+of+cell+death+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Neutrophil swarms require LTB4 and integrins at sites of cell death in vivo.</a> Nature. 498 (7454), 371-375 (2013).</li>
<li>Miyabe, Y., Kim, N. D., Miyabe, C., Luster, A. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Studying+chemokine+control+of+neutrophil+migration+in+vivo+in+a+murine+model+of+inflammatory+arthritis%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Enzymol%22%5BJournal%5D)">Studying chemokine control of neutrophil migration in vivo in a murine model of inflammatory arthritis.</a> Methods Enzymol. 570, 207-231 (2016).</li>
<li>Miyabe, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Complement+C5a+receptor+is+the+key+initiator+of+neutrophil+adhesion+igniting+immune+complex-induced+arthritis%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Immunol%22%5BJournal%5D)">Complement C5a receptor is the key initiator of neutrophil adhesion igniting immune complex-induced arthritis.</a> Sci Immunol. 2 (7), eaaj2195(2017).</li>
<li>Sadik, C. D., Miyabe, Y., Sezin, T., Luster, A. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+critical+role+of+C5a+as+an+initiator+of+neutrophil-mediated+autoimmune+inflammation+of+the+joint+and+skin%5BTitle%5D)+AND+%22Semin+Immunol%22%5BJournal%5D)">The critical role of C5a as an initiator of neutrophil-mediated autoimmune inflammation of the joint and skin.</a> Semin Immunol. 37, 21-29 (2018).</li>
<li>Miyabe, Y., Miyabe, C., Mani, V., Mempel, T. R., Luster, A. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Atypical+complement+receptor+C5aR2+transports+C5a+to+initiate+neutrophil+adhesion+and+inflammation%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Immunol%22%5BJournal%5D)">Atypical complement receptor C5aR2 transports C5a to initiate neutrophil adhesion and inflammation.</a> Sci Immunol. 4 (35), eaav5951(2019).</li>
<li>Kohl, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Igniting+the+flame+in+arthritis%3A+C5aR2+controls+endothelial+transcytosis+of+C5a%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Immunol%22%5BJournal%5D)">Igniting the flame in arthritis: C5aR2 controls endothelial transcytosis of C5a.</a> Sci Immunol. 4 (35), eaax0352(2019).</li>
<li>Miyabe, Y., Miyabe, C., Luster, A. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((LTB4+and+BLT1+in+inflammatory+arthritis%5BTitle%5D)+AND+%22Semin+Immunol%22%5BJournal%5D)">LTB4 and BLT1 in inflammatory arthritis.</a> Semin Immunol. 33, 52-57 (2017).</li>
<li>Miyabe, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Necessity+of+lysophosphatidic+acid+receptor+1+for+development+of+arthritis%5BTitle%5D)+AND+%22Arthritis+Rheum%22%5BJournal%5D)">Necessity of lysophosphatidic acid receptor 1 for development of arthritis.</a> Arthritis Rheum. 65 (8), 2037-2047 (2013).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>29 G x 1/2"</td><td>테루모</td><td>SS-10M2913</td><td></td></tr><tr><td>0.1 M 아세트산</td><td>후지필름</td><td>016-18835</td><td></td></tr><tr><td>1mL 플라스틱 주사기</td><td>맨 위로</td><td>19531</td><td></td></tr><tr><td>그리스용 1mm 주사기</td><td>테루모</td><td>SS-01T</td><td></td></tr><tr><td>18 G x 1 1/2"</td><td>테루모</td><td>NN-1838R</td><td></td></tr><tr><td>26 G x 1/2"</td><td>테루모</td><td>NN-2613</td><td></td></tr><tr><td>680-250 kDa 덱스트란</td><td>바이오티움</td><td>80135</td><td></td></tr><tr><td>아가로스</td><td>인비트로젠</td><td>16520-100</td><td></td></tr><tr><td>소 유형 II 콜라겐</td><td>콜라겐 연구 센터</td><td>K42</td><td></td></tr><tr><td>점토</td><td>데비카</td><td>93186</td><td></td></tr><tr><td>완전 프렌트 보조제(CFA)</td><td>콘드렉스</td><td>7001</td><td></td></tr><tr><td>공초점 현미경</td><td>니콘</td><td>A1</td><td></td></tr><tr><td>커버 유리</td><td>마쓰나미 글라스 IND.,Ltd</td><td>C024401</td><td></td></tr><tr><td>디지털 슬라이드 캘리퍼</td><td>미츠토요</td><td>500-180-30</td><td></td></tr><tr><td>팔콘 튜브 (15 mL)</td><td>코닝</td><td>NA</td><td></td></tr><tr><td>팔콘 튜브 (50 mL)</td><td>코닝</td><td>NA</td><td></td></tr><tr><td>FITC 접합 항생쥐 Ly6G 항체</td><td>바이오레전드</td><td>127606</td><td></td></tr><tr><td>겸자</td><td>로보즈</td><td>RS-5070</td><td></td></tr><tr><td>겸자</td><td>나폭스</td><td>MA-48-2</td><td></td></tr><tr><td>유리 주사기와 커넥터</td><td>츠바사 산업주식회사, nbsp;</td><td>시즌 7P</td><td></td></tr><tr><td>그리스</td><td>토레이 다우 코닝 실리콘</td><td>NA</td><td></td></tr><tr><td>머리깎이</td><td>발</td><td>WA5109</td><td></td></tr><tr><td>머리깎이</td><td>발</td><td>9966</td><td></td></tr><tr><td>제모 크레이브; 나</td><td>크라시</td><td>해당 없음</td><td></td></tr><tr><td>메데토미딘</td><td>메이지</td><td>해당 없음</td><td></td></tr><tr><td>마이크로 가위</td><td>로보즈</td><td>RS-5610</td><td></td></tr><tr><td>마이크로 가위</td><td>로보즈</td><td>RS-5630</td><td></td></tr><tr><td>미다졸람</td><td>산도즈</td><td>해당 없음</td><td></td></tr><tr><td>습한 거즈</td><td>닛폰 페이퍼 크레시아 주식회사</td><td>S-200</td><td></td></tr><tr><td>NIS-Elements 이미지 분석 6.20.00</td><td>니콘</td><td>NA</td><td></td></tr><tr><td>팔콘 튜브 내 PBS (50 mL)</td><td>시마즈 진단 주식회사</td><td>5913</td><td></td></tr><tr><td>PE 접합 항생쥐 CD4 항체</td><td>바이오레전드</td><td>100408</td><td></td></tr><tr><td>플라스틱 플레이트</td><td>코닝</td><td>351029</td><td></td></tr><tr><td>프리즘 10.3.1</td><td>그래프패드</td><td>NA</td><td></td></tr><tr><td>슬라이드 글라스</td><td>무토 퓨어 케미컬 주식회사</td><td>5115</td><td></td></tr><tr><td>수술 범위</td><td>올림포스</td><td>VMZ</td><td></td></tr><tr><td>조직 결합</td><td>3M</td><td>1469SB</td><td></td></tr><tr><td>베토르팔레&nbsp;</td><td>메이지</td><td>해당 없음</td><td></td></tr></tbody></table>

생체 내 영상 검사는 관절 내 백혈구의 이동 행동을 밝혀냅니다

In Vivo Imaging Uncovers the Migratory Behavior of Leukocytes within the Joints

Leukocytes are blood-borne cells derived from the bone marrow that must migrate into tissues to mediate inflammation. Controlling this migration, ...

in-vivo-imaging-uncovers-migratory-behavior-leukocytes-within

Research

연구

JoVE Journal

Immunology and Infection

면역학 및 감염학

여기, 우리는 마우스 노상 강도의 백혈구가 추적 연구 비침습 두 개의 광자 (2P) 현미경의 접근 방식을 설명합니다. 우리는 조직 이미징 준비의 기술적 측면을 논의하고 실행 및 데이터를 수집하도록 설정 초기의 전형적인 실험을 통해 독자를 걸어보세요.

백혈구 호밍 및 마이 그 레이션의 비침습 영상 생체내에</em

우리는 생체내에서 호중구 chemoattractant의 근원에 대한 응답으로 호중구 모집 중에 동적으로 호중구 - 내피 세포 상호 작용을 측정하기위한 brightfield intravital 현미경의 프로토콜을 설명합니다. 호중구 intraluminal 크롤링, 마우스 cremaster 근육 조직에 transendothelial 마이 그 레이션 및 chemotaxis 시간은 타락한 동영상 사진 및 ImageJ와 추적과 시각입니다.

추적 호중구 Intraluminal 크롤링, Intravital 비디오 현미경에 의한 조직의 Transendothelial 마이 그 레이션 및 Chemotaxis

우리는 대식 세포 MR 영상이 허용 정화조 관절염의 초소형 초상 자성 조영제 (USPIO)를 사용하여 수행하는 방법을 보여주는 초기 및...

정화조 관절염의 경도 평가를위한 MR 표적 조영제를 사용하여 생체 내 대식 세포 이미징

우리는 염증 단계를 구별하기위한 비 침습 이미징 방법을 설명합니다. 루미놀의 전신 배달 호중구의 MPO 활동에 의존 급성 염증의 영역을 보여준다. 대조적으로, lucigenin의 주입은 대 식세포에서 Phox 활동에 의존 만성 염증으로 시각화 할 수 있습니다.

생체 내 이미징 방법에 급성 및 만성 염증을 구별하는

단핵구는 선천성 면역의 핵심 조절자이며 말초 단핵 식세포 시스템의 재생과 염증의 경우에 중요한 역할을 합니다. 이 원고는 단핵구 동원 메커니즘을 연구하기 위해 마우스 칼바리아 골수를 실시간으로 이미징하는 절차를 설명합니다.

마우스 골수 단핵구를 추적<em&gt; 생체</em

마우스의 장간막 정맥에 대한 이 단순화된 생체 내 현미경 검사는 백혈구-내피 및 혈소판-백혈구 상호 작용을 관찰하기 위해 다양한 염증 모델에 사용할 수 있습니다.

마우스의 Mesenterial 혈관에서의 생체 내에 현미경 백혈구 - 내피 세포와 혈소판 - 백혈구 상호 작용

마취된 마우스에서 생체 내 컨포칼 현미경을 사용하여 정상 상태 및 염증 상태에서 장간막 정맥의 호중구 및 단핵구의 거동을 모니터링하는 프로토콜에 대해 자세히 설명합니다.

실시간으로 마취 마우스에 생체 내에 현미경으로 장간막 혈관에서 호중구와 단핵구 이미징

이 프로토콜은 생체 내에서 대퇴골수에서 세포의 움직임을 추적하는 데 사용할 수 있는 새로운 쥐 대퇴골 창 챔버 모델을 설명합니다. 생체 내 다광자 형광 현미경은 시간이 지남에 따라 대퇴골수의 세 가지 구성 요소(혈관 구조, 콜라겐 매트릭스 및 호중구)를 이미지화하는 데 사용됩니다.

대한 대퇴골 창 회의소 모델<em&gt; 생체</em쥐의 골수에서&gt; 셀 추적

이 논문은 염증의 두 가지 실험 모델에서 키 매트릭스 메탈의 생체 내 활성을 시각화 기동 광학 이미징 프로브를 사용하여 형광 이미지의 적용을 설명한다.

비 침습적<em&gt; In Vivo</em&gt; 활성화 가능한 형광 이미징 에이전트를 사용한 염증성 MMP 활성의 형광 광학 이미징

여기에서, 우리는 마우스 cremaster 근육의 포스트 모세관 정맥에 intravital 현미경 검사법을 수행하는 방법을 보여줍니다. 일반적으로 염증과 패혈증의 다른 모델, 특히 케모카인과 사이토 카인에 의해 유도 된 모델에 적용, 우리는 과장 된 근육 백혈구 침투를 포함하는 muscolopathies의 연구에서 그 관련성을 강조.

Intravital 현미경 검사법에 의해 평가된 마우스에 있는 Cremaster 근육의 백혈구 침투

호중구 이동은 화학 유인 물질 및 세포 외 미세 환경과의 상호 작용에 대한 반응으로 원형질막의 빠르고 지속적인 리모델링에 의존합니다. 본원에서는 마취된 마우스의 귀에 주입된 호중구에서 막 리모델링의 역학을 조사하기 위한 Intravital Subcellular Microscopy에 기초한 절차가 설명됩니다.

생리학적 조건에서 세포하막 리모델링을 조사하기 위해 마우스 피부의 호중구 이동을 이미징합니다.

배우세요 관절염 연구를 위한 생체 내 영상 기술로 백혈구 이동 행동과 염증 과정의 분자 역학을 실시간으로 관찰하는 방법입니다. 이 프로토콜은 면역 세포 역학 이해와 새로운 치료 전략 개발에 활용됩니다.

생체 내 영상 검사는 관절 내 백혈구의 이동 행동을 밝혀냅니다

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