쥐의 정소성 좌측 폐 이식

내 연구는 이식 후 합병증, 특히 만성 거부반응을 조사하고 장기적인 이식 실패를 유발하는 메커니즘을 더 잘 이해하기 위해 표준화되고 재현 가능한 좌폐 이식 모델을 개발하는 데 중점을 두었습니다. 당사의 프로토콜은 기존 기술에 비해 더 짧은 학습 곡선, 단일 작동 기능 및 더 높은 재현성을 제공합니다. 우리의 표준화된 직접 폐 이식 모델은 폐 이식 후 합병증을 연구하기 위한 신뢰할 수 있는 플랫폼을 제공하고 이식편 생존율을 향상시키기 위한 중개 연구를 가속화할 수 있습니다.

앞으로 우리 연구실은 폐 이식 수혜자의 장기 생존율을 향상시키기 위해 폐 이식 후 만성 거부반응 연구에 중점을 둘 것입니다. 시작하려면 14게이지 및 16게이지 정맥 카테터와 블레이드를 얻으십시오. 칼날이 달린 꼬리가 있는 커프로 카테터를 자릅니다.

그런 다음 각 커프를 몸체와 꼬리로 나누고 각각 길이가 약 2-3mm입니다. 메스를 사용하여 커프 본체에 표면적인 긁힌 자국을 만들어 봉합사 고정을 위한 마찰을 증가시킵니다. 기증자 폐를 채취하려면 겸자를 사용하여 마취된 쥐의 혀를 바깥쪽과 위쪽으로 집어넣습니다.

수술용 램프를 목 앞쪽에 배치하여 성문 개구부를 명확하게 비춥니다. 이제 성문을 통해 기도에 14게이지 정맥 캐뉼라를 삽입합니다. 인공호흡기를 압력 제어 모드로 설정합니다.

그런 다음 무게 매개변수를 입력하고 압력을 15cm의 물로 조정한 다음 인공호흡기를 연결합니다. 인공호흡기 주파수와 동기화되도록 가슴의 상승과 하강을 관찰하십시오. 다음으로 테이프나 구속 장치를 사용하여 팔다리와 머리를 고정합니다.

복벽을 따라 정중선 절개를 합니다. 노출된 복막 정맥을 통해 헤파린을 주입한 다음 완전한 헤파린화를 보장하기 위해 3분 동안 전신 순환을 허용합니다. 횡격막을 자르고 흉골 정중선에서 흉강을 엽니다.

그런 다음 지혈제로 양쪽 흉벽을 고정합니다. 흉선 제거하여 흉강 기관을 노출시킵니다. 순차적으로 상대정맥, 하대정맥, 좌우 귓바귀를 절단합니다.

이제 기증자 폐가 완전히 하얗게 변할 때까지 저압 관류를 위해 20밀리리터 주사기를 사용하여 폐동맥 뿌리에 차가운 식염수를 1분에 걸쳐 주입합니다. 기증자 폐를 연결하는 조직을 절단하고 기증자 심장과 폐를 블록으로 추출합니다. 기증자 심폐 블록을 미리 냉각된 식염수에 담그십시오.

현미경으로 심폐 블록을 얼음 위에 놓습니다. 지혈제로 기관을 잡고 플라스틱에 고정합니다. 젖은 멸균 렌즈 종이로 폐를 덮습니다.

이제 겸자를 사용하여 현미경으로 폐동맥, 기관지 및 폐정맥을 분리합니다. 6-0 수술용 봉합사를 사용하여 폐에 가까운 기관지를 결찰합니다. 스프링 가위를 사용하여 폐동맥, 기관지 및 폐정맥을 자릅니다.

16게이지, 14게이지 및 16게이지 압입 카테터로 만든 각 커프에서 폐동맥, 기관지 및 폐정맥을 추출합니다. 8-0으로 튜브 벽을 커프에 고정합니다. 수술용 봉합사. 기증자 폐를 식염수에 보관하고 이식할 때까지 얼음 위에 다시 놓습니다.

수혜 동물의 왼쪽 흉부 제모술을 합니다. 자동 온도 조절 수술대에 동물을 오른쪽 측면 욕창 자세로 배치합니다. 이제 흉강에 접근하기 위해 네 번째 늑간 공간의 정점 충동 지점에서 피부와 흉벽을 절개합니다.

눈꺼풀 견인기를 사용하여 흉강을 엽니다. 그런 다음 젖은 면봉을 사용하여 왼쪽 폐를 부드럽게 옆으로 밀어 하폐인대를 노출시키고 날카롭게 절개합니다. 그런 다음 겸자로 왼쪽 폐를 잡고 흉강 밖으로 집어넣습니다.

지혈제로 문을 고정한 다음 모델링 점토로 안정시킵니다. 이제 폐문을 해부하여 폐동맥, 폐정맥, 기관지를 분리합니다. 혈관 클램프를 사용하여 폐동맥, 폐정맥 및 기관지의 근위부 끝을 고정합니다.

수혜자의 폐동맥, 기관지 및 폐정맥을 8-0으로 미리 묶습니다. 신속한 문합을 위한 수술용 봉합사. 기증자 폐의 배치를 용이하게 하기 위해 수혜자의 고정된 왼쪽 폐의 플랫폼을 다듬습니다. 폐동맥, 폐정맥, 기관지의 원위 끝부에 작은 절개를 합니다.

혈전 형성을 방지하기 위해 헤파린화 식염수로 폐동맥과 폐정맥을 헹굽니다. 그런 다음 얼음에서 기증자 폐를 꺼내 수혜자의 왼쪽 폐의 준비된 플랫폼에 놓습니다. 겸자를 사용하여 절단 구멍의 한쪽을 들어 올린 다음 폐동맥, 폐정맥 및 기관지의 커프를 수혜자에게 순차적으로 이식하고 결찰합니다.

마이크로 지혈 클립을 열고 기증자 폐가 흰색에서 빨간색으로 변하는 것을 관찰합니다. 문합 부위에 출혈의 징후가 있는지 검사하십시오. 이제 수혜자의 왼쪽 폐를 제거하고 기증자 폐를 흉강으로 되돌립니다.

멸균 면으로 흉강을 닦아냅니다. 그런 다음 흉강을 층별로 닫습니다. 인공호흡기를 제거하기 전에 자발 호흡이 회복될 때까지 기다리십시오.

한 시간 후, 수혜자들은 자유롭게 식사를 할 수 있었습니다. 이식 6개월 후 CT 영상 결과 이식된 폐의 환기가 가짜군과 비슷해 폐 기능이 보존된 것으로 나타났다. 폐의 거시적 외관은 가짜 그룹과 이식 그룹 간에 눈에 띄게 다르지 않았으며 악화나 이상의 징후를 보이지 않았습니다.

폐 조직의 헤마톡실린 및 에오신 염색은 가짜 그룹에 비해 이식된 폐에서 유의미한 병리학적 변화가 없는 것으로 나타났으며, 폐포 구조가 보존되고 염증 침윤이 없었습니다.