Name: 오보에 위치 환자 유래 급성 림프구성 백혈병(ALL) 세포의 이종이식 (PDX-ALL) (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-08-01T14:10:00.000+00:00
Duration: 6 min 48 s
Description: 학습하세요 환자 유래 급성 림프구성 백혈병 세포의 오보 이종이식법을 통해 전임상 약물 선별 및 백혈병 진행 메커니즘 연구를 수행하는 방법을 배우세요.

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<ol><li>Folkman, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((What+is+the+evidence+that+tumors+are+angiogenesis+dependent%5BTitle%5D)+AND+%22J+Natl+Cancer+Inst%22%5BJournal%5D)">What is the evidence that tumors are angiogenesis dependent.</a> J Natl Cancer Inst. 82 (1), 4-6 (1990).</li>
<li>Hagedorn, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Accessing+key+steps+of+human+tumor+progression+in+vivo+by+using+an+avian+embryo+model%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Accessing key steps of human tumor progression in vivo by using an avian embryo model.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 102 (5), 1643-1648 (2005).</li>
<li>Dumartin, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Netrin-1+mediates+early+events+in+pancreatic+adenocarcinoma+progression%2C+acting+on+tumor+and+endothelial+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Gastroenterology%22%5BJournal%5D)">Netrin-1 mediates early events in pancreatic adenocarcinoma progression, acting on tumor and endothelial cells.</a> Gastroenterology. 138 (5), 1595-1606 (2010).</li>
<li>Aguirre-Ghiso, J. A., Estrada, Y., Liu, D., Ossowski, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((ERK+activity+as+a+determinant+of+tumor+growth+and+dormancy%3A+Regulation+by+p38%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">ERK activity as a determinant of tumor growth and dormancy: Regulation by p38.</a> Cancer Res. 63 (7), 1684-1695 (2003).</li>
<li>Baroni, T. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ribonomic+and+short+hairpin+RNA+gene+silencing+methods+to+explore+functional+gene+programs+associated+with+tumor+growth+arrest%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">Ribonomic and short hairpin RNA gene silencing methods to explore functional gene programs associated with tumor growth arrest.</a> Methods Mol Biol. 383, 227-244 (2007).</li>
<li>Lopez-Rivera, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inducible+nitric+oxide+synthase+drives+mTOR+pathway+activation+and+proliferation+of+human+melanoma+by+reversible+nitrosylation+of+TSC2%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">Inducible nitric oxide synthase drives mTOR pathway activation and proliferation of human melanoma by reversible nitrosylation of TSC2.</a> Cancer Res. 74 (4), 1067-1078 (2014).</li>
<li>Balke, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+short-term+in+vivo+model+for+giant+cell+tumor+of+bone%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Cancer%22%5BJournal%5D)">A short-term in vivo model for giant cell tumor of bone.</a> BMC Cancer. 11, 241(2011).</li>
<li>Balke, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Morphologic+characterization+of+osteosarcoma+growth+on+the+chick+chorioallantoic+membrane%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Res+Notes%22%5BJournal%5D)">Morphologic characterization of osteosarcoma growth on the chick chorioallantoic membrane.</a> BMC Res Notes. 3, 58(2010).</li>
<li>Sys, G. M. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+CAM-assay+as+a+xenograft+model+for+sarcoma%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">The CAM-assay as a xenograft model for sarcoma.</a> J Vis Exp. (77), e50522(2013).</li>
<li>Li, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Chick+Chorioallantoic+Membrane+%28CAM%29+assay+as+an+efficient+xenograft+model+of+hepatocellular+carcinoma%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">The Chick Chorioallantoic Membrane (CAM) assay as an efficient xenograft model of hepatocellular carcinoma.</a> J Vis Exp. (104), e52411(2015).</li>
<li>Pontel, L. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acute+lymphoblastic+leukemia+necessitates+GSH-dependent+ferroptosis+defenses+to+overcome+FSP1-epigenetic+silencing%5BTitle%5D)+AND+%22Redox+Biol%22%5BJournal%5D)">Acute lymphoblastic leukemia necessitates GSH-dependent ferroptosis defenses to overcome FSP1-epigenetic silencing.</a> Redox Biol. 102408, (2022).</li>
<li>Oriol, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Outcome+after+relapse+of+acute+lymphoblastic+leukemia+in+adult+patients+included+in+four+consecutive+risk-adapted+trials+by+the+PETHEMA+Study+Group%5BTitle%5D)+AND+%22Haematologica%22%5BJournal%5D)">Outcome after relapse of acute lymphoblastic leukemia in adult patients included in four consecutive risk-adapted trials by the PETHEMA Study Group.</a> Haematologica. 95 (4), 589-596 (2010).</li>
<li>Xin, Q., Chen, Z., Wei, W., Wu, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+of+acute+lymphoblastic+leukemia%3A+Recapitulating+the+human+disease+to+evaluate+drug+efficacy+and+discover+therapeutic+targets%5BTitle%5D)+AND+%22Biochem+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Animal models of acute lymphoblastic leukemia: Recapitulating the human disease to evaluate drug efficacy and discover therapeutic targets.</a> Biochem Pharmacol. 198, 114970(2022).</li>
<li>Gilmore, M. J., Prentice, H. G., Blacklock, H. A., Janossy, G., Hoffbrand, A. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+technique+for+rapid+isolation+of+bone+marrow+mononuclear+cells+using+Ficoll-Metrizoate+and+the+IBM+2991+blood+cell+processor%5BTitle%5D)+AND+%22Br+J+Haematol%22%5BJournal%5D)">A technique for rapid isolation of bone marrow mononuclear cells using Ficoll-Metrizoate and the IBM 2991 blood cell processor.</a> Br J Haematol. 50 (4), 619-626 (1982).</li>
<li>Boyer, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Flow+cytometry+to+estimate+leukemia+stem+cells+in+primary+acute+myeloid+leukemia+and+in+patient-derived+xenografts%2C+at+diagnosis+and+follow-up%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Flow cytometry to estimate leukemia stem cells in primary acute myeloid leukemia and in patient-derived xenografts, at diagnosis and follow-up.</a> J Vis Exp. (133), e56976(2018).</li>
<li>Kang, S. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genome-wide+loss-of-function+genetic+screening+identifies+opioid+receptor+mu1+as+a+key+regulator+of+L-asparaginase+resistance+in+pediatric+acute+lymphoblastic+leukemia%5BTitle%5D)+AND+%22Oncogene%22%5BJournal%5D)">Genome-wide loss-of-function genetic screening identifies opioid receptor mu1 as a key regulator of L-asparaginase resistance in pediatric acute lymphoblastic leukemia.</a> Oncogene. 36 (42), 5910-5913 (2017).</li>
<li>Lee, J. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((HAP1+loss+confers+L-asparaginase+resistance+in+ALL+by+downregulating+the+calpain-1-Bid-caspase-3%2F12+pathway%5BTitle%5D)+AND+%22Blood%22%5BJournal%5D)">HAP1 loss confers L-asparaginase resistance in ALL by downregulating the calpain-1-Bid-caspase-3/12 pathway.</a> Blood. 133 (20), 2222-2232 (2019).</li>
<li>Kalina, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((EuroFlow+standardization+of+flow+cytometer+instrument+settings+and+immunophenotyping+protocols%5BTitle%5D)+AND+%22Leukemia%22%5BJournal%5D)">EuroFlow standardization of flow cytometer instrument settings and immunophenotyping protocols.</a> Leukemia. 26 (9), 1986-2010 (2012).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>34 G 바늘</td><td>BD 페리세이프</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Attune NxT 유세포 분석기</td><td>써모 피셔</td><td></td><td></td></tr><tr><td>BD Perisafe 주사기 (32 g)</td><td>BD 페리세이프</td><td></td><td></td></tr><tr><td>소 혈청 알부민(BSA)</td><td>밀리포어 시그마</td><td>A9647</td><td></td></tr><tr><td>세포 동결 배지</td><td>Gibco, 써모피셔 사이언티픽</td><td>12648010</td><td></td></tr><tr><td>원심분리기(Allegra X-22R 원심분리기)</td><td>베크만 쿨터&nbsp;</td><td></td><td></td></tr><tr><td>일회용 장갑</td><td>Royal Touch300 니트릴 시험용 장갑</td><td></td><td></td></tr><tr><td>해부 현미경</td><td>라이카 MZ16FA</td><td></td><td></td></tr><tr><td>DMEM</td><td>Gibco, 써모피셔 사이언티픽</td><td>11965092</td><td></td></tr><tr><td>DMSO</td><td>Invitrogen, 써모피셔 사이언티픽</td><td>디12345</td><td></td></tr><tr><td>계란 인큐베이터, Vevitts 120 롤링 인큐베이터</td><td>빅세스트 트레이딩 주식회사</td><td></td><td></td></tr><tr><td>에틸 알코올 (95 %)</td><td>VWR 인터내셔널</td><td>BDH1158-4LP</td><td></td></tr><tr><td>태아 소 혈청(FBS)</td><td>Gibco, 써모피셔 사이언티픽</td><td>26140079</td><td></td></tr><tr><td>Ficoll 솔루션(Ficoll?? 파케 플러스)</td><td>밀리포어시그마</td><td>GE17-1440-02</td><td></td></tr><tr><td>FITC-CD10 항체</td><td>산타크루즈 바이오텍</td><td>sc-46656 피트</td><td></td></tr><tr><td>FITC-CD4 항체</td><td>산타크루즈 바이오텍</td><td>SC-19641 피트</td><td></td></tr><tr><td>형광 현미경&nbsp;</td><td>라이카 마이크로시스템즈</td><td></td><td></td></tr><tr><td>핸드 드릴(Dremel3000)</td><td>보쉬</td><td></td><td></td></tr><tr><td>HEK293T&nbsp;</td><td>ATCC, 버지니아, 미국</td><td>CRL-3216</td><td></td></tr><tr><td>혈구계</td><td>VWR 인터내셔널, Hausser Scientific</td><td>15170-263</td><td></td></tr><tr><td>돼지 장 점막에서 추출한 헤파린 나트륨염</td><td>밀리포어 시그마</td><td>H3149</td><td></td></tr><tr><td>헤파린 화 시험관</td><td>BD 진공 테이너&nbsp;</td><td>BD 366480</td><td></td></tr><tr><td>리포펙타민 3000</td><td>Invitrogen, 써모피셔 사이언티픽</td><td>L3000008</td><td></td></tr><tr><td>Multiplex Lentivirus Titer Kit (qPCR 렌티바이러스 역가 키트)</td><td>ABM</td><td>LV900</td><td></td></tr><tr><td>NH4Cl(암모늄 chloride_</td><td>밀리포어 시그마</td><td>A9434</td><td></td></tr><tr><td>Olympus IX71 도립 현미경</td><td>올림푸스</td><td></td><td></td></tr><tr><td>PE-CD19 항체</td><td>산타크루즈 바이오텍</td><td>sc-19650 PE</td><td></td></tr><tr><td>PE-CD8 항체</td><td>산타크루즈 바이오텍</td><td>sc-1177 PE</td><td></td></tr><tr><td>페니실린-스트렙토마이신(10,000 U/mL)&nbsp;</td><td>Gibco, 써모피셔 사이언티픽</td><td>15140122</td><td></td></tr><tr><td>인산염 완충 식염수(PBS)</td><td>시그마</td><td>P3813</td><td></td></tr><tr><td>피펫(용량 조절 가능)</td><td>에펜도르프</td><td></td><td></td></tr><tr><td>퓨로마이신</td><td>Gibco, 써모피셔 사이언티픽</td><td>A1113803</td><td></td></tr><tr><td>RPMI 1640</td><td>Gibco, 써모피셔 사이언티픽</td><td>11875093</td><td></td></tr><tr><td>스카치 셀로테이프</td><td>3분</td><td></td><td></td></tr><tr><td>멸균 6웰 플레이트</td><td>VWR 인터내셔널, 코닝</td><td>22250-140</td><td></td></tr><tr><td>멸균 원심분리기 튜브</td><td>Axygen Inc, 코닝</td><td>AXYMCT-150-CS</td><td></td></tr><tr><td>멸균 배양 플라스크(75T)</td><td>VWR 인터내셔널</td><td>10062-872</td><td></td></tr><tr><td>멸균 Falcon 튜브(15mL)</td><td>사르슈테트</td><td>62.554.502</td><td></td></tr><tr><td>멸균 Falcon 튜브(50mL)</td><td>사르슈테트</td><td>62.547.254</td><td></td></tr><tr><td>멸균 필터(0.45 & micro; m 필터)</td><td>VWR 인터내셔널</td><td>76778-974</td><td></td></tr><tr><td>멸균 겸자</td><td>VWR 인터내셔널</td><td>82027-404</td><td></td></tr><tr><td>멸균 유리 슬라이드</td><td>VWR 인터내셔널</td><td>48300-031</td><td></td></tr><tr><td>멸균 피펫 팁</td><td>VWR 인터내셔널</td><td>76322-136, 76322-134, 76322-154</td><td></td></tr><tr><td>멸균 주사기</td><td>BD 주사기</td><td>309628?</td><td></td></tr><tr><td>트리판 블루</td><td>Invitrogen, 써모피셔 사이언티픽</td><td>티10282</td><td></td></tr></tbody></table>

오보에 위치 환자 유래 급성 림프구성 백혈병(all) 세포의 이종이식 (pdx-all)

In Ovo Xenografting of Patient-Derived Acute Lymphoblastic Leukemia (ALL) Cells (PDX-ALL)

발달 중인 닭 배아에서 인간 ALL 세포의 생착이 성공적인지 여부를 결정하기 위해 mCherry를 운반하는 2세대 복제 무능력 렌티바이러스를 증폭하고 이를 사용하여 각각 B- 및 T-ALL 세포주, SEM 및 MOLT316,17을 표지했습니다. 그림 1A에서 볼 수 있듯이, B-(왼쪽 상단 2개 패널) 및 T-(오른쪽 상단 2개 패널) ALL 세포의 ~50%를 mCherry로 표지했습니다. 그 후, 환자 유래 B-(#1 및 #2) 및 T-(#3 및 #4) ALL 세포도 mCherry로 표지되었습니다(그림 1A, 왼쪽 및 오른쪽 하단 각각 4개의 패널). mCherry 표지 ALL 세포를 농축하기 위해 퓨로마이신으로 처리된 세포를 사용하여 인간 ALL 세포의 난자 이종 이식을 수행했으며...

오보에 위치 환자 유래 급성 림프구성 백혈병(ALL) 세포의 이종이식 (PDX-ALL)

This study introduces a rapid, cost-effective, and efficient method for in ovo xenografting of patient-derived acute lymphoblastic leukemia (ALL) cells, ...

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연구

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암 연구

이 비디오는 제브라피시 환자 유래 이종 이식 모델을 만드는 기술을 설명합니다. 샘플 프로토콜에서는 췌장 종양 이종이식 모델에서 Gemcitabine 및 Navitoclax 약물의 효율성을 평가합니다.

제브라피시 환자 유래 이종이식편(zPDX): 암 모델

여기에 서술 된 것은 환자 - 유도 된 이종 이식 (PDX) 마우스에서 사이토 카인 - 형질 감염된 간질 세포주의 매주 복강 내 주사를 통해 외인성 사이토킨을 생산하는 방법이다. 이 방법은 PDX의 유용성을 넓히고 다양한 PDX 모델에서 일시적 또는 지속적인 외인성 사이토 카인 전달 옵션을 제공합니다.

Cytokine-induced stromal cell line 주입에 의한 환자 유래 이종 이식편에서의 외인성 사이토 카인의 발현

우리는 cytometry에 의해 동시 표현의 기본 급성 골수성 백혈병 세포에 백혈병 줄기 세포 마커를 감지 하는 프로토콜 개요. 우리 3 조상 인구와 성숙의 정도 증가 함께 상 상속 LSC 인구를 측정 하는 방법을 보여 줍니다. 우리는 이러한 인구에 해당 환자-파생-xenografts의 존재를 확인 했다.

Flow Cytometry 최대 백혈병 줄기 세포 주 급성 골수성 백혈병 및 환자-파생-xenografts, 진단에 따라 추정 하

여기, 선물이 orthotopic 인간의 기본 뇌 종양을 들고 immunodeficient 마우스에 준비 및 수용자 인간 림프 톨의 stereotaxic 관리에 대 한 프로토콜. 이 연구는 타당성과 세포 immunotherapies intrabrain 전달의 antitumor 효능에 대 한-의 증거-개념을 제공합니다.

정위 적 입양 전송 Orthotopic 인간 세포종 님 Xenografts Murine 모델에서 세포 독성 면역 세포의

이 프로토콜은 애벌레 얼룩말어를 숙주로서 사용하여 바이러스 기반 이중 형광 표지 종양 이종이식 모델에서 최적화 절차를 설명합니다. 이 이기종 이종이식 모델은 생체 내 췌장암 미세환경의 조직 조성을 모방하고 맞춤형 zPDX(제브라피쉬 환자 유래 이종이식) 모델에서 약물 반응을 평가하기 위한 보다 정밀한 도구역할을 한다.

비교 약물 평가를 위한 호스트로 Zebrafish 애벌레를 사용하여 췌장암의 환자 유래 이종 이종이식 모형

우리는 인간 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC)를 기술합니다 - 번역형 면역 종양학 연구를 위한 기지를 둔 인간화한 이종이식 마우스 모형. 이 프로토콜은 I-O 치료 평가를 위한 유사한 모형을 설치하고 특성화하기 위한 일반적인 지침으로 봉사할 수 있었습니다.

인간 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC) 번역 면역 종양학에 대한 인간화 제종이식 모델 (I-O) 연구

여기서 우리는 종양의 게놈 메이크업에 기초하여 선택된 표적 치료의 효능을 시험하기 위한 프로토콜을 제시한다. 프로토콜은 구조적인 DNA 재배열의 확인 그리고 검증, 마우스로 환자의 종양의 이식 및 해당 약에 대한 반응을 시험하는 것을 기술합니다.

구조적 DNA 변경 분석 및 환자 유래 제노이식을 사용하여 암에 있는 표적으로 한 치료 시험

여기에서 우리는 급성 림프구성 백혈병 환자 유래 이종이식 모델이 CD19 표적 키메라 항원 수용체 T 세포 관련 독성을 평가하고 모니터링하기 위한 전략으로 사용되는 프로토콜을 설명합니다.

급성 림프구성 백혈병 환자 유래 이종이식식 마우스 모델을 이용한 키메라 항원 수용체 T 세포 관련 독성 평가

이 프로토콜은 유세포 분석을 사용한 약물 반응 평가 지침과 함께 일시적 면역 억제 제브라피시 배아의 세포주 및 신선한 환자 물질에서 인간 급성 림프구 백혈병(ALL) 이종이식편을 생성하고 문제를 해결하기 위한 단계별 지침을 제공합니다. 실험 파이프라인은 고형 종양에도 적용할 수 있습니다.

제브라피시 배아에서 백혈병 세포 이식을 사용한 신속한 생체 내 약물 반응 예측

이 프로토콜은 마우스에서 유방암 환자 유래 이종이식편의 정소성 이식을 위한 효율적인 비수술적 방법을 설명합니다. 이 기술은 효소 종양 해리 후 유방 지방 패드에 직접 주입하여 고처리량 이식을 가능하게 합니다. 포괄적인 검증은 모델 충실도를 보장하여 다양한 유방암 하위 유형에 대한 엄격한 연구를 촉진합니다.

High-Throughput Dissociation and orthotopic Implantation of Breast Cancer Patient-derived Xenografts(유방암 환자 유래 이종이식편의 High-Throughput Dissociation and orthotopic Implantation of breast Cancer Patient-derived Xenografts)

여기에서는 인류 세포 분석 기반 방법을 사용하여 마우스에 이종 이식하고 골수 흡인에서 얻은 급성 인간 골수성 백혈병 세포에서 mTORC1, JAK/STAT5 및 MAPK 경로의 다운스트림 신호를 분석합니다. p-STAT5, p-4EBP1, p-RPS6 및 p-ERK1/2 수준은 고감도의 차세대 스펙트럼 유세포 분석기를 사용하여 동시에 측정됩니다.

급성 골수성 백혈병 환자 유래 이종이이식의 세포내 인류 세포분석

학습하세요 환자 유래 급성 림프구성 백혈병 세포의 오보 이종이식법을 통해 전임상 약물 선별 및 백혈병 진행 메커니즘 연구를 수행하는 방법을 배우세요.

오보에 위치 환자 유래 급성 림프구성 백혈병(ALL) 세포의 이종이식 (PDX-ALL)

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