Name: CD63-GFP 리포터 마우스 모델을 이용한 지방세포 유래 세포외 소포 분비물의 특성 규격 연구(in vivo 및 in vitro) (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-12-05T13:20:00.000+00:00
Duration: 10 min 40 s
Description: 학습하세요 CD63-GFP 리포터 마우스를 이용한 지방세포 유래 세포외 소포 분비물의 특성 규격 방법. 이 기술은 지방 조직 내 세포 간 소통 메커니즘을 연구하는 데 활용됩니다.

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<li>Tilg, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adipokines%3A+Masterminds+of+metabolic+inflammation%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Immunol%22%5BJournal%5D)">Adipokines: Masterminds of metabolic inflammation.</a> Nat Rev Immunol. 25, 250-265 (2025).</li>
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<li>Nordin, J. Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ultrafiltration+with+size-exclusion+liquid+chromatography+for+high+yield+isolation+of+extracellular+vesicles+preserving+intact+biophysical+and+functional+properties%5BTitle%5D)+AND+%22Nanomedicine%22%5BJournal%5D)">Ultrafiltration with size-exclusion liquid chromatography for high yield isolation of extracellular vesicles preserving intact biophysical and functional properties.</a> Nanomedicine. 11 (4), 879-883 (2015).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>0.5 M EDTA, pH 8.0</td><td>피셔</td><td>AM9260G</td><td>500배 희석</td></tr><tr><td>10배 PBS</td><td>피셔 사이언티브</td><td>70-013-032</td><td>물을 넣어 1000배 희석</td></tr><tr><td>1 M 헤페스</td><td>깁코</td><td>15630080</td><td>1000배 희석</td></tr><tr><td>지방 조직 전구체 분리 키트, 마우스</td><td>밀텐이 바이오텍</td><td>30-106-639</td><td>사용 준비 완료</td></tr><tr><td>아미콘 울트라 원심 필터, 100 kDa MWCO</td><td>시그마</td><td>UFC9100</td><td>15 mL 샘플 부피</td></tr><tr><td>아미콘 울트라 원심 필터, 100 kDa MWCO</td><td>시그마</td><td>UFC9100</td><td>4 mL 샘플 부피</td></tr><tr><td>BSA</td><td>시그마</td><td>A6003</td><td>사용 준비 완료</td></tr><tr><td>칼넥신 항체</td><td>칼넥신</td><td>AB22595</td><td>1000배 희석</td></tr><tr><td>CD63 항체</td><td>ABCAM</td><td>AB217345</td><td>500배 희석</td></tr><tr><td>CD81</td><td>세포 신호 전달 기술</td><td>10037</td><td>500배 희석</td></tr><tr><td>코닝&nbsp; BioCoat &nbsp; 콜라겐 I 배양 슬라이드</td><td>시그마</td><td>CLS354630</td><td>사용 준비 완료</td></tr><tr><td>코닝&nbsp; 셀 스트레이너</td><td>시그마</td><td>CLS431750</td><td>40 & mu; m 공극 크기</td></tr><tr><td>코닝&nbsp; 셀 스트레이너</td><td>시그마</td><td>CLS431752</td><td>100 & mu; m 공극 크기</td></tr><tr><td>콕스 IV 항체</td><td>세포 신호 전달 기술</td><td>4844</td><td>1000배 희석</td></tr><tr><td>DMEM</td><td>깁코</td><td>11965092</td><td>사용 준비 완료</td></tr><tr><td>DMEM/F-12, GlutaMAX 보충제</td><td>서모피셔</td><td>10565018</td><td>사용 준비 완료</td></tr><tr><td>DNASE 1</td><td>시그마</td><td>D4513</td><td>기본 5 KU/mL, -20 & 도; C</td></tr><tr><td>글루타맥스 보충제</td><td>깁코</td><td>35050061</td><td>100배 희석</td></tr><tr><td>정지 및 무역; 프로테아제 및 인산효소 억제제 칵테일 (100X)</td><td>서모피셔</td><td>78444</td><td>사용 준비 완료</td></tr><tr><td>HSP70 항체</td><td>ABCAM</td><td>ab181606</td><td>1000배 희석</td></tr><tr><td>Invitrogen eBioscience 10X 적혈구 용해 버퍼 (다종)</td><td>피셔 사이언티브</td><td>50-112-9743</td><td>물에 10배 희석</td></tr><tr><td>아이존 사이언스 USA Ltd QEVORIGINAL 70NMGEN2 5/PK SDP</td><td>피셔 사이언티브</td><td>NC2042225</td><td>사용 준비 완료</td></tr><tr><td>라이카 스텔라리스 8 공초점 현미경</td><td>라이카 현미경</td><td>해당 없음</td><td></td></tr><tr><td>Liberase TM 연구 등급</td><td>시그마</td><td>립트므로</td><td>-20 & 도수에 5 mg/mL 기본 투여; C</td></tr><tr><td>밀렉스 MCE 주사기 필터</td><td>시그마</td><td>SLAA025</td><td>0.8 & mu; m 공극 크기</td></tr><tr><td>나노사이트 프로</td><td>말번 파날리티컬</td><td>해당 없음</td><td></td></tr><tr><td>노벡스 트리스-글리신 미니 단백질 젤, 4&ndash; 12%,</td><td>서모피셔</td><td>XP04120BOX</td><td>사용 준비 완료</td></tr><tr><td>Novex 트리스-글리신 SDS 샘플 버퍼 (2개)</td><td>서모피셔</td><td>LC2676</td><td>사용 준비 완료</td></tr><tr><td>Pacific Blue 항생쥐 Ly-6A/E (Sca-1) 항체</td><td>바이오레전드</td><td>108119</td><td>25배 희석</td></tr><tr><td>파라포름알데히드 용액 (16%)</td><td>피셔 사이언티브</td><td>50-980-487</td><td>PBS로 4%까지 희석하세요</td></tr><tr><td>pluriStrainer S / 30 및 마이크로; m (세포 체결기)</td><td>피셔 사이언티브</td><td>NC0922459</td><td>30 & mu; m 공극 크기</td></tr><tr><td>폰소 S 해법</td><td>시그마</td><td>P7170-1L</td><td>사용 준비 완료</td></tr><tr><td>프리모신</td><td>인비보젠</td><td>NC9141851</td><td>500배 희석</td></tr><tr><td>DAPI가 포함된 ProLong 금 안티페이드 시약</td><td>세포 신호 전달 기술</td><td>8961S</td><td>사용 준비 완료</td></tr><tr><td>정제 항마우스 CD16/32 항체</td><td>바이오레전드</td><td>101301</td><td>100배 희석</td></tr><tr><td>RIPA 버퍼&nbsp;</td><td>피셔 사이언티브</td><td>PI89900</td><td>물에 10배 희석</td></tr><tr><td>스펙트럼 플로우 사이토미터 (오로라 3)</td><td>사이텍 바이오사이언스</td><td>해당 없음</td><td></td></tr><tr><td>Syntaxin 4 항체</td><td>시냅스 시스템</td><td>110042</td><td>5000배 희석</td></tr><tr><td>테크나이 20 (투과 전자현미경)</td><td>FEI</td><td>해당 없음</td><td></td></tr><tr><td>터지오-EM</td><td>PIE 사이언티픽 LLC</td><td>해당 없음</td><td></td></tr><tr><td>빈쿨린 항체</td><td>ABCAM</td><td>AB18508</td><td>5000배 희석</td></tr></tbody></table>

cd63-gfp 리포터 마우스 모델을 이용한 지방세포 유래 세포외 소포 분비물의 특성 규격 연구(in vivo 및 in vitro)

Characterization of Adipocyte-Derived Extracellular Vesicle Secretion Using a CD63-GFP Reporter Mouse Model In Vivo and In Vitro

공초점 현미경을 통한 APC 흡수를 통한 AdEV 검출 프로토콜을 사용하여, 우리는 AdipCD63-GFP 및 Stopfl/fl/CD63-GFP 마우스의 서하니 지방 조직에서 APC를 분리하고 핵을 시각화하기 위해 DAPI로 염색했습니다. 공초점 현미경으로 검사한 Stopfl/fl/CD63-GFP 마우스의 APC는 검출 가능한 GFP 지점이 없었습니다(그림 1A). 반면, AdipCD63-GFP 마우스에서 분리된 APC는 세포질 전반에 걸쳐 다수의 독특한 GFP 점점을 보였습니다(그림 1B). GFP 신호는 CD63-GFP 라벨이 성숙한 지방세포에서만 발현되고 APCs에서는 발현되지 않는 아디포넥틴 프로모터에 의해 구동되기 때문에 APCs에 의한 AdEVs의 흡수를 보여줍니다. 이...

CD63-GFP 리포터 마우스 모델을 이용한 지방세포 유래 세포외 소포 분비물의 특성 규격 연구(in vivo 및 in vitro)

Adipocytes are increasingly recognized as active endocrine cells that secrete substantial quantities of EVs enriched in proteins, lipids, and nucleic ...

characterization-adipocyte-derived-extracellular-vesicle-secretion

Research

연구

JoVE Journal

Biology

생물학

내피 내피 / glycocalyx 표면 층은 이상적인 intravital 현미경을 사용하여 공부하고 있습니다. Intravital 현미경은 기술적 같은 폐 등 움직이는 장기에 도전하고 있습니다. 우리는 동시 brightfield 및 형광 현미경은 자유롭게 - 이동에 내피 표면 층의 두께를 추정하는 데 사용할 수 있습니다 방법을...

마우스 폐 내피 표면 층의 생체 측정

이 프로토콜은 non-adherent / mesenchymal 유방 상피 세포에서 세포 외 소포 (EVs) / 엑소 좀을 정화, 정량화 및 특성화하고 유선 형성능을 내유성 상피 세포로 전달하는 방법을 설명합니다. 줄기 모양의 유방 상피 세포로부터 유래 된 EVs / 엑소 좀은이 세포 특성을 EVs / 엑소 좀을 섭취하는 세포로 전달할 수있다.

extracellular vesicles / exosomes를 통한 유방 기초 상피 세포와 유방 Luminal 세포 사이 유선 형성 능력의 이전

지방 조직 혈관 창시자에서 흰색과 베이지색 adipocytes의 차별화는 비만에 대사 개선 위한 잠재력을 맺는 다. 우리는 CD34 + CD31 + 인간의 지방에서 내 피 세포 격리 및 후속 시험관에 확장 및 차별화 흰색과 베이지색 adipocytes에 프로토콜을 설명합니다. 여러 다운스트림 응용 프로그램을 설명 합니다.

절연, 확장, 및 Adipogenic CD34 + CD31 + 인간의 Omental 및 피하 지방 조직에서 내 피 세포의 유도

이 프로토콜에서 우리는 형광 기반 나노-추적 분석 하 여 인간의 전체 혈액에서 세포 외 vesicles의 신속한 격리 및 특정 마커의 특성화에 대 한 완벽 한 워크플로우를 설명합니다. 제시 결과 재현성의 높은 레벨을 표시 하 고 셀 문화 supernatants 조정 될 수 있습니다.

나노-추적 분석 인 혈에 있는 단일 Extracellular Vesicles의 빠른 형광 기반 특성

우리는 지방 조직 신진 대사 표현형에 기여에 매트릭스 및 지방 세포의 역할의 해부를 허용하는 시험관 내 3D 인간 세포 외 매트릭스 -adipocyte를 설명합니다.

매트릭스 세포 대사 크로스토크 연구를 위한 인간 3D 세포외 세포외 매트릭스-세포세포 배양 모델

최신 세대의 EV 특성화 도구는 여러 파라미터에 대한 단일 EV 분석이 동시에 가능합니다. 나노유세포분석은 표지 없이 45nm보다 큰 모든 생물학적 입자를 측정하고 다양한 형광 표지 기술로 아집단의 특정 특성을 식별합니다.

나노유세포분석을 통한 단일 세포외 소포 막횡단 단백질 특성 분석

본 프로토콜은 배양된 인간 중간엽 줄기세포에서 대표적인 EV(엑소좀 및 마이크로베시클)를 분리하고 특성화하기 위한 차등 원심분리를 설명합니다. 이러한 EV의 추가 응용 프로그램도 이 기사에서 설명합니다.

배양된 인간 중간엽 줄기세포에서 세포외 소포의 분리, 특성화 및 치료적 적용

이 프로토콜은 인간 지방 유래 중간엽 줄기 세포(ADSC) 배양 및 상층액 수집부터 초원심분리를 사용한 세포외 소포체(EV) 추출에 이르기까지 모든 절차를 설명합니다.

Human Adipose-Derived Mesenchymal Stem Cells의 세포외 소포체의 정제 및 특성 분석

여기에서는 인간 피하 지방 조직(hSATMVECs)에서 미세혈관 내피 세포를 분리, 배양 및 표현형으로 분석하기 위한 프로토콜에 대해 설명합니다. 또한 hSATMVEC-지방 세포 누화의 실험 모델을 설명합니다.

인간 피하 지방 조직에서 지방 내피 세포/지방 세포 누화 연구

체외 이식 모델을 사용하여, 저지방 쥐의 내장 백색 지방 조직의 앞부분 일부를 7일에서 10일간 배양하여, 고지방 식이 섭취 중 지방 조직 염증을 유도하고 연구할 수 있게 합니다.

고지방 식이와 유사한 지방 조직 염증을 위한 체외 마우스 모델

학습하세요 CD63-GFP 리포터 마우스를 이용한 지방세포 유래 세포외 소포 분비물의 특성 규격 방법. 이 기술은 지방 조직 내 세포 간 소통 메커니즘을 연구하는 데 활용됩니다.

CD63-GFP 리포터 마우스 모델을 이용한 지방세포 유래 세포외 소포 분비물의 특성 규격 연구(in vivo 및 in vitro)

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