Name: 시험관 내 조절 T 세포의 기능 분석: 증식과 분화에 초점을 맞춘다 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-06-09T14:05:00.000+00:00
Duration: 10 min 21 s
Description: 배우세요 시험관 내 조절 T 세포 기능 분석 프로토콜을 통해 효과 T 세포의 증식과 분화를 동시에 평가하는 방법을 익히세요. 이 기법은 면역학 및 자가면역 질환 연구에 필수적인 도구를 제공합니다.

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<table><tbody><tr><td>1.5 mL 원심 분리기 튜브</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>3457IW</td><td>또는 동등</td></tr><tr><td>12.5 &mu;L 필터 피펫 팁</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>94420043</td><td>또는 동등</td></tr><tr><td>1250 &mu;L 필터 피펫 팁</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>94420813</td><td>또는 동등</td></tr><tr><td>15 mL 원추형 원심 분리기 튜브</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>339650</td><td>또는 동등</td></tr><tr><td>200 &mu;L 필터 피펫 팁</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>94420318</td><td>또는 동등</td></tr><tr><td>48웰 플레이트</td><td>Corning Incorporated</td><td>3548</td><td>또는 동등</td></tr><tr><td>5 mL 주사기 피스톤</td><td>Shifeng Medical</td><td>SB2-061(A)</td><td>또는 동등</td></tr><tr><td>50 mL 원추형 원심 분리기 튜브</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>339652</td><td>또는 동등</td></tr><tr><td>50 &mu;L 필터 피펫 팁</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>94420258</td><td>또는 동등</td></tr><tr><td>70 &mu;m 세포 스트레이너</td><td>Biosharp Life Sciences</td><td>BS-70-CS</td><td>또는 동등</td></tr><tr><td>Anti-mouse CD28 항체</td><td>BioXcell</td><td>BE0015-1</td><td>또는 동등</td></tr><tr><td>Anti-mouse CD3 항체</td><td>BioXcell</td><td>BE0001-1</td><td>또는 동등</td></tr><tr><td>Anti-mouse CD4 PerCP-Cy5.5 (RM4-5)</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>45-0042-82</td><td>또는 동등</td></tr><tr><td>Anti-mouse Foxp3 PB (FJK-16s)</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>48-5773-82</td><td>또는 동등</td></tr><tr><td>Anti-mouse IFN-gamma PE (XMG1.2)</td><td>BioLegend</td><td>505808</td><td>또는 동등</td></tr><tr><td>Anti-mouse IL-17A PE-Cy7 (eBio17B7)</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>25-7177-82</td><td>또는 동등</td></tr><tr><td>Beckman CytoFLEX S 유세포 분석기</td><td>Beckman Coulter</td><td>N/A</td><td>면역 세포 샘플의 유세포 분석 데이터 획득용</td></tr><tr><td>Bovine Serum Albumin (BSA)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>B2064</td><td>또는 동등</td></tr><tr><td>C57BL/6 마우스</td><td>Shanghai Model Organisms Center, Inc</td><td>SM-001</td><td>1차 림프구 및 T 세포 하위 집단의 분리용</td></tr><tr><td>CD25 단일 클론 항체 (PC61.5), PE</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>12-0251-83</td><td>또는 동등</td></tr><tr><td>CD4+CD25+ 조절 T 세포 분리 키트, 마우스</td><td>Miltenyi Biotec</td><td>130-091-041</td><td>세포 분류용</td></tr><tr><td>CD4+CD62L+ T 세포 분리 키트, 마우스</td><td>Miltenyi Biotec</td><td>130-106-643</td><td>세포 분류용</td></tr><tr><td>CD45.1 마우스</td><td>Shanghai Model Organisms Center, Inc</td><td>NM-KI-210226</td><td>1차 림프구 및 T 세포 하위 집단의 분리용</td></tr><tr><td>CD45.1 단일 클론 항체 (A20), FITC</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>11-0453-85</td><td>또는 동등</td></tr><tr><td>CD45.2 단일 클론 항체 (104), APC-eFluor 780</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>47-0454-82</td><td>또는 동등</td></tr><tr><td>CD62L (L-Selectin) 단일 클론 항체 (MEL-14), FITC</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>11-0621-85</td><td>또는 동등</td></tr><tr><td>Cytofix/Cytoperm 고정/투과 용액 키트</td><td>BD Biosciences</td><td>554714</td><td>또는 동등</td></tr><tr><td>eBioscience 세포 증식 염료 eFluor 450</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>65-0842-90</td><td>또는 동등</td></tr><tr><td>ethylenediamine tetraacetic acid (EDTA)</td><td>Solarbio Life Sciences</td><td>E1170</td><td>또는 동등</td></tr><tr><td>Fetal Bovine Serum</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>A5669701</td><td>또는 동등</td></tr><tr><td>FlowJo 10.6.2</td><td>BD Biosciences</td><td>N/A</td><td>유세포 분석 데이터 분석용 소프트웨어</td></tr><tr><td>Golgi-Plug 단백질 수송 억제제</td><td>BD Biosciences</td><td>555029</td><td>또는 동등</td></tr><tr><td>HEPES (1 M)</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>15630080</td><td>또는 동등</td></tr><tr><td>Human TGF-beta1</td><td>PEPROTECH</td><td>100-21C</td><td>또는 동등</td></tr><tr><td>Ionomycin 칼슘 염</td><td>Millipore Sigma</td><td>I3909</td><td>또는 동등</td></tr><tr><td>LD 칼럼</td><td>Miltenyi Biotec</td><td>130-042-901</td><td>세포 분류용</td></tr><tr><td>L-Glutamine (200 mM)</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>25030081</td><td>또는 동등</td></tr><tr><td>LS 칼럼</td><td>Miltenyi Biotec</td><td>130-042-401</td><td>세포 분류용</td></tr><tr><td>MACS MultiStand</td><td>Miltenyi Biotec</td><td>130-042-303</td><td>세포 분류용</td></tr><tr><td>MS 칼럼</td><td>Miltenyi Biotec</td><td>130-042-201</td><td>세포 분류용</td></tr><tr><td>OctoMACS 분리기</td><td>Miltenyi Biotec</td><td>130-042-109</td><td>세포 분류용</td></tr><tr><td>PBS, pH 7.4</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>10010049</td><td>또는 동등</td></tr><tr><td>PE Rat IgG1, &kappa; Isotype Ctrl 항체</td><td>BioLegend</td><td>400408</td><td>또는

시험관 내 조절 t 세포의 기능 분석: 증식과 분화에 초점을 맞춘다

In Vitro Functional Analysis of Regulatory T cells: Focus On Proliferation And Differentiation

대표적인 실험에서는 나이브 T 세포를 Tresp 세포로 사용하여 Treg 풍부 세포가 Th1 및 Th17 세포의 증식과 분화에 미치는 영향을 조사했습니다. 이 실험에서 Tresp 세포는 항마우스 CD3 및 APC 풍부 비CD4+ 세포에 의해 활성화된 후, IL-12 p70 유도 하에 Th1 세포 또는 TGF-β1 및 IL-6 유도 하에 Th17 세포로 분화하였습니다. 이 두 유도 조건 하에서, Treg 풍부 세포를 1:1 비율로 첨가한 후 Tresp 세포의 증식 및 분화 변화가 연구되었습니다.
CD45.2+CD4+ Tresp 세포를 CD45.1+CD4+ Treg 풍부 세포와 공동 배양했을 때, Th1 및 Th17 유도 조건 모두에서 증식되지 않은 Tresp 세포의 빈도가 유의하게 증가하여(그림 4A, B</stron...

시험관 내 조절 T 세포의 기능 분석: 증식과 분화에 초점을 맞춘다

Regulatory T (Treg) cells play key roles in maintaining immune homeostasis. Abnormalities in Treg cell function are associated with various diseases, ...

in-vitro-functional-analysis-regulatory-t-cells-focus-on

Research

연구

JoVE Journal

Immunology and Infection

면역학 및 감염학

우리는 한 인간의 혈액 기증자로부터 규제, 메모리 및 나이브 T 세포를 생성하는 방법을 설명합니다. 편광 Tregs 그때도 여기에 설명된 억제 분석을 포함한 유전자 균질성와 유전 및 기능 다양한 어플 리케이션의 다른 하위 집합을 비교할 수 있습니다.

기본 인적 나이브 및 메모리 T의 세포로부터 유도된 규제 T 세포의 생성

유도된 pluripotent 줄기 (IPS) 세포로부터 T lymphocytes의 생성은 T 세포 기반 immunotherapy에 대한 배아 줄기 세포를 사용하는 대체 방식을 제공합니다. 방법 중 하나를 이용하여...

T Lymphocytes쪽으로 유도 Pluripotent 줄기 세포의 분화 감독

CD4+ 조절 T 세포는 강력한 면역 조절제이며 면역 항상성에서 중요한 기능을 수행합니다. 말초 혈액에서 이러한 세포가 부족하기 때문에 특히 HIV-1 감염과 관련하여 기능 연구가 어렵습니다. 여기에서는 HIV-1에 감염된 개인의 말초 혈액에서 기능적 CD4+ Tregs를 분리하고 확장하는 방법을 설명합니다.

새로운 도구는 HIV-1에 감염된 개인으로부터 규제 T 세포를 확장하려면

순진 CD4 콕 사키 아데노 바이러스 수용체의 유전자 발현과 T 세포에 아데노 바이러스 유전자 전달은 규제 T 세포 분화의 분자 분석을...

나이브 CD4의 아데노 바이러스 형질은 Treg의 분화를 연구하는 세포를 T

순진한 CD4+ T cell은 활성화 시점의 환경에 따라 다양한 subset으로 분극화합니다.  naive CD4+ T cell을 다양한 effector subset으로 분화하는 것은 T cell receptor stimuli 및 specific cytokine signal의 추가를 통해 in vitro에서 달성할 수 있습니다.

마우스 나이브 CD4<sup&gt; +</sup&gt; T 세포의 분리 및<em&gt; 시험관</em&gt; T 세포 하위 집합으로 차별화

여기에서는 바이러스에 감염된 미성숙한 림프구성 융모수막염 마우스에서 분리된 조절 T(Treg) 세포의 표현형을 분석하기 위한 프로토콜에 대해 설명합니다. 또한, Treg cell의 억제 활성을 평가하는 프로세스를 제공합니다.

표현형 및 만성 림프 구성 맥락 수막염 바이러스에 감염된 마우스에서 고립 활성화 규제 T 세포의 기능 분석

이 프로토콜은 체외 나이브 CD4 + T 세포로부터 재생 가능한 생성 유도 인간 T 조절 세포 (iTregs)의 표현형을 설명한다. Foxp3의 유도를위한 다른 프로토콜은 각각의 프로토콜로 얻은 특정 iTreg의 표현형 연구를 허용합니다.

TGF-β 함유 프로토콜을 사용하여 나이브 CD4 + T 세포에서 인간의 CD4 + Foxp3의 + 유도 규제 T 세포 (iTregs)의 체외 분화

여기, 선물이 프로토콜을 이식, 허용 오차를 유발 하 고 생체 외에서 그리고 vivo에서 평가 받는에서 고유한 셀 하위 집합의 진압 용량 및 기증자 또는 외 인 항 원 받는 사람의 면역 상태.

생체 외에서 그리고 Vivo에서 T, B 및 골수성 세포 진압 활동 및 이식 받는 체액 응답의 평가

본 문서에서는 3차원(3D) 흉선 배양 시스템에 의해 종양 항원 특이적 유도 만능 줄기 세포 유래 흉선 이주자(iTE)를 생성하는 새로운 방법을 설명한다. iTE는 증식, 기억 형성 및 종양 억제 능력을 가진 순진한 T 세포와 밀접하게 관련된 T 세포의 균질한 서브세트이다.

뮤린 유도 만능 줄기 세포 유래 종양 항원 특이적 흉선 유이주자를 생성하는 3차원 흉선 배양 시스템

여기에서 우리는 정량적 PCR (qPCR)를 사용하여 검출된 후생유전학 서명을 통해 면역 세포 정체성 및 순도를 결정하는 강력한 방법을 기술합니다. 특정 궤적에서의 DNA 탈메틸화는 특정 세포 유형에 대한 고유 식별자역할을 하며 CD8+, 조절 또는 Th17 T 세포의 식별을 허용합니다.

후성유전학 기반 정량적 PCR을 이용한 면역 세포 정체성 및 순도 측정

배우세요 시험관 내 조절 T 세포 기능 분석 프로토콜을 통해 효과 T 세포의 증식과 분화를 동시에 평가하는 방법을 익히세요. 이 기법은 면역학 및 자가면역 질환 연구에 필수적인 도구를 제공합니다.

시험관 내 조절 T 세포의 기능 분석: 증식과 분화에 초점을 맞춘다

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