Dextransulfaat natrium (DSS) toegediend in het drinkwater is een gevestigde murine inflammatoire letsel model van acute colitis. Dit protocol beschrijft de methode voor DSS behandeling en de preparatie van de weefsels.
Een abonnement op JoVE is vereist om deze inhoud te bekijken. Log in of start vandaag met uw gratis proefperiode.
Methodenartikel
Murine Colitis Modeling met dextraansulfaat Natrium (DSS)
In dit artikel
Samenvatting
Samenvatting
Colitis kunnen het gevolg zijn van virale of bacteriële infecties, ischemische beledigen of auto-immuunziekten, met name colitis ulcerosa en de dikke variant van de ziekte van Crohn - Crohn Colitis. Acute colitis kunnen presenteren met buikpijn en buik, malabsorptie, diarree, hematochezia en slijm in de ontlasting. We beginnen de complexe interacties tussen milieu, genetica, en de epitheliale barrière dysfunctie bij inflammatory bowel disease en dierlijke modellen van colitis zijn essentieel in het bevorderen van onze kennis van deze ziekte te begrijpen. Een populair model betreft tot aanvulling van het drinkwater van muizen met een laag moleculair gewicht Dextran natriumsulfaat (DSS), wat resulteert in beschadiging van het epitheel en een robuuste ontstekingsreactie in de dikke darm meerdaagse
Protocol
Deel 1: Letsel-Repair Colitis Model
- Baseline gewicht moet worden verkregen voor elke muis voorafgaand aan het begin DSS de behandeling.
- Maak een 3% (w / v) dextraansulfaat Natrium zout-oplossing in water en filter met een 0,45 pm cellulose-acetaat filter.
- Vervang het drinkwater in de muis kooi met de 3%-DSS-oplossing voor vier dagen. De muizen zouden geen toegang tot een andere bron van water (met uitsluiting tips geplaatst op geautomatiseerde irrigatiesystemen).
- Op dag vier, vervang dan de DSS-oplossing met water voor een extra drie dagen, waardoor een aantal dikke epitheliale herstel. De muizen moeten worden afgewogen op dag....
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Discussie
Dit protocol kan worden aangepast om acuut letsel, letsel-reparatie, of chronische colon letsel te modelleren.
Acuut letsel Wijziging:
DSS behandeling ad lib voor 4-6 dagen gevolgd door onmiddellijke offer
Injury-Repair Modification:
Letsel met 4-6 dagen van DSS-behandeling gevolgd door herstel periode van 3-4 dagen en opoffering (zoals beschreven in bovenstaande protocol).
Chronische C.......
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Openbaarmakingen
Experimenten op dieren werden uitgevoerd in overeenstemming met de richtlijnen en voorschriften uiteengezet door Vanderbilt IACUC in te stellen.
Dankbetuigingen
Financiering door NIH (1 K08 DK080221-01) en de Vanderbilt institutionele ontwikkeling fondsen.
....Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Materialen
| Naam | Bedrijf | Catalogusnummer | Opmerkingen |
|---|---|---|---|
| Dextransulfaat natriumzout | USB Corp., Affymetrix | 9011-18-1 | mol gewicht 40.000-50.000 |
| 10% gebufferde fosfaatformaline | Fisher Scientific | SF100-4 | |
| Isofluraan, USP | Phoenix Pharmaceuticals, Inc. | NDC 57319-474-06 | |
| TISSUE PATH Macrosette cassettes | Fisher Scientific | 15182706 | |
| BD 10 ml spuit | BD Biosciences | 309604 | |
| Ethylalcohol | Pharmco-AAPER | E190 | Verdunnen tot 70% met gedestilleerd water |
| 20G rechte voedingsnaald | VWR international | 20068-612 | |
| 27G1/2 PrecisionGlide naald | BD Biosciences | 305109 | |
| Dissectieschaar scherp/stomp uiteinde | VWR international | 82027-588 | |
| Waugh pincet | VWR international | 82027-428 | |
| Niet-absorbeerbare hechtdraad | LOOK Surgical | SP116 | |
| Whatman blotterpapier | VWR international | 28298-020 | Naar behoefte knippen |
| Nalgene surfactant-vrij celluloseacetaat (SFCA) filter | Cole-Parmer | EW-06731-2 | |
| Digitale schuifmaat van koolstofvezelcomposiet | Fisher Scientific | 15-007-958 |
Referenties
- Okayasu, I. A novel method in the induction of reliable experimental acute and chronic ulcerative colitis in mice. Gastroenterology. 98 (3), 694-702 (1990).
- Martinez, J. A. Deletion of Mtgr1 sensitizes the colonic e....
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Herprints en machtigingen
