Experimentele muismodellen van allergische astma bieden nieuwe mogelijkheden voor het bestuderen van de ziekte van pathogenese en het ontwikkelen van nieuwe therapeutica. Deze modellen zijn zeer geschikt voor het meten factoren die de allergische immuunrespons, ontsteking van de luchtwegen en longen pathofysiologie.
Een abonnement op JoVE is vereist om deze inhoud te bekijken. Log in of start vandaag met uw gratis proefperiode.
In dit artikel
Samenvatting
Samenvatting
Astma is een belangrijke oorzaak van morbiditeit en mortaliteit, waardoor ongeveer 300 miljoen mensen over de hele wereld. 1 Meer dan 8% van de Amerikaanse bevolking heeft astma, met de prevalentie toe. 2 Net als bij andere ziekten, diermodellen van allergische luchtwegaandoeningen veel gemakkelijker begrip van de onderliggende pathofysiologie, helpen bij het identificeren potentiële therapeutische doelen, en laat preklinische testen van mogelijke nieuwe therapieën. Modellen van allergische luchtwegaandoeningen zijn ontwikkeld in verschillende diersoorten, maar muis-modellen zijn met name aantrekkelijk vanwege de lage kosten, gemakkelijke beschikbaarheid, en goed gekarakteriseerd immuunsysteem van deze dieren. 3 Beschikbaarheid van een verscheidenheid van transgene stammen verhoogt verder de aantrekkelijkheid van deze modellen. 4 Hier beschrijven we twee muismodellen van allergische luchtwegaandoeningen, zowel in dienst ovalbumine als antigeen. Na de eerste opname door intraperitoneale injectie, een model spreekt zichers het antigen uitdaging aan door verneveling, de andere door intratracheale levering. Deze twee modellen bieden aanvullende voordelen, met elkaar het nabootsen van de belangrijkste kenmerken van de menselijke astma. 5
De belangrijkste kenmerken van een acute astma zijn onder andere een overdreven luchtwegen reactie op prikkels, zoals methacholine (luchtweg hyperreactiviteit, LHR) en eosinofielen-rijke luchtwegontsteking. Dit zijn ook belangrijke effecten van allergeen uitdaging in onze muismodellen, 5,6 en beschrijven we technieken voor het meten van hen en dus de beoordeling van de effecten van de experimentele manipulatie. In het bijzonder, beschrijven we zowel invasieve 7 en 8 niet-invasieve technieken voor het meten van de luchtweg hyperreactiviteit en methoden voor de beoordeling van infiltratie van ontstekingscellen in de luchtwegen en de longen. Airway ontstekingscellen worden verzameld door bronchoalveolaire lavage, terwijl long histopathologie wordt gebruikt om de markers van ontsteking te beoordelen in het orgel. Dezetechnieken zorgen voor krachtige tools voor het bestuderen van astma op een manier die niet mogelijk zou zijn bij de mens.
Protocol
I. allergenen Sensibilisatie en Challenge (zie figuur 1)
A. Voor intratracheale Challenge
- Voor de eerste sensibilisatie, injecteren mannelijke of vrouwelijke C57BL / 6 of BALB / c muizen (6-8 weken oud) intraperitoneaal op dag 0 en weer op dag 7 met 20 ug ovalbumine (OVA, Sigma-Aldrich, St. Louis, MO) geëmulgeerd in 0,2 ml steriele fosfaat-gebufferde zoutoplossing (PBS) die 2 mg aluminiumhydroxide (Sigma-Aldrich) of met 2 mg aluminiumhydroxide in 0,2 ml steriele PBS als controle.
- Challenge met antigeen geval (bijvoorbeeld op dag 14, 16, 18 en 20). Challenge geschiedt.
- Verdoven muis met een intr....
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Discussie
Diermodellen van allergische luchtwegaandoeningen vindt u belangrijke hulpmiddelen voor het onderzoek relevant voor de klinische astma. Een aantal verschillende, gebruik verschillende soorten en antigenen, zijn ontwikkeld. De muis, een aantrekkelijke en veel gebruikte proefdieren, biedt ook een aantal voordelen voor de modellen van allergische luchtwegaandoeningen. 9,10 Hoewel dergelijke modellen hebben astma in alle opzichten, 11 niet na te bootsen met aspecten van chronische ziekten is bijzonder .......
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Openbaarmakingen
Experimenten op dieren werden uitgevoerd in overeenstemming met de richtlijnen en voorschriften opgesteld door de Atlanta VAMC IACUC comite dat is ingesteld op grond van Protocol # V010-10.
Dankbetuigingen
Dit werk werd ondersteund door NIH Grant HL093196 (RCR) en de Atlanta onderzoek en onderwijs Foundation (AREF).
....Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Materialen
| Naam | Bedrijf | Catalogusnummer | Opmerkingen |
|---|---|---|---|
| Materiaalnaam | Vennootschap | Catalogus nummer | Reacties |
| Ovalbumine | Sigma-Aldrich St. Louis, MO | A5503 | |
| Aluminiumhydroxide | Sigma-Aldrich | 239.186 | |
| Acetyl-β-methylcholine chloride | Sigma-Aldrich | A2251 | |
| Natriumpentobarbital zout | Sigma-Aldrich | P3761 | |
| Hele lichaam plethysmografie (WBP) systeem | Buxco Research Systems Wilmington, NC | http://www.buxco.com | |
| FlexiVent | SCIREQ, Inc Montreal, Canada | http://www.scireq.com | |
| Lichtmicroscoop | Leica Microsystems, Inc Buffalo Grove, IL | ||
| Cytospin 4 | Thermo Scientific Asheville, NC | ||
| Diff-Quick vlek | Siemens Newark, DE | B4132-1A | |
| Repetitive pipet | Tridak Torrington, CT | STP4001-0025 |
Referenties
- Braman, S. S. The global burden of asthma. Chest. 130, 4S-12S (2006).
- Akinbami, L. J., Mooman, J. E., Liu, X. Asthma Prevalence, Health Care Use, and Mortality: 2005-2009. National Health Statistics Reports. 32, National Center for Health Statistics. Hyattsville, MD. 2005-2009 (2011).
- Bates, J. H., Rincon, M., Irvin, C. G.
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Herprints en machtigingen
