Vettransplantatie is een essentiële techniek voor het reconstrueren van tekorten in zacht weefsel. Het blijft echter een onvoorspelbare procedure, gekenmerkt door variabele overleving van het transplantaat. Ons doel was om een muismodel te ontwikkelen dat een nieuwe beeldvormingsmethode gebruikt om volumeretentie te vergelijken tussen verschillende technieken van vettransplantaatvoorbereiding en -toediening.
Een abonnement op JoVE is vereist om deze inhoud te bekijken. Log in of start vandaag met uw gratis proefperiode.
Methodenartikel
Beoordeling van de levensvatbaarheid van menselijk vet Injectie in Naakt Muizen met Micro-Computed Tomography
* These authors contributed equally
In dit artikel
Samenvatting
Samenvatting
Lipotransfer een essentieel instrument in armamentarium de chirurg voor de behandeling van stoornissen zachte weefsel van het hele lichaam. Vet is het ideale zacht weefsel vulstof is gemakkelijk beschikbaar, gemakkelijk te verkrijgen, goedkoop en inherent biocompatibel. 1 Ondanks de groeiende populariteit, wordt vet enten gehinderd door onvoorspelbare resultaten en variabele transplantaatoverleving, met gepubliceerde retentie ergens van 10 -80%. 1-3
Onderzoeken op vet enten vergemakkelijken, hebben we daarom ontwikkelde een diermodel dat maakt real-time analyse van geïnjecteerde vet retentie volume. In het kort wordt een kleine snede gemaakt in de hoofdhuid van een CD-1 naakt muis en 200-400 pl verwerkte lipoaspirate wordt op de schedel geplaatst. De hoofdhuid wordt gekozen als de ontvanger plaats vanwege de afwezigheid van natief onderhuids vet, en vanwege de uitstekende achtergrond contrast door het calvarium, die helpthet analyseproces. Micro-computertomografie (micro-CT) wordt gebruikt om het transplantaat bij basislijn en elke twee weken daarna gescand. De CT-beelden worden gereconstrueerd, en een beeldverwerkingsprogramma wordt gebruikt om transplantaat volumes kwantificeren.
Traditioneel technieken om vet transplantaat volume beoordelen noodzakelijk hebben euthanizing de studie dier om slechts een enkele beoordeling van de graft gewicht en volume te bieden door fysieke meting ex vivo. Biochemische en histologische vergelijkingen die hebben ook vereist de studie dier te worden gedood. Deze beschreven beeldvormingstechniek biedt het voordeel visualiseren en kwantificeren objectief volume op verschillende tijdstippen na de eerste enting zonder de studie dier offeren. De techniek wordt beperkt door de grootte van het implantaat kan worden geïnjecteerd als grotere enten risico huid en vet necrose. Deze methode heeft een hulpprogramma voor alle studies die vet levensvatbaarheid graft en retentie volume. Het is bijzonder goed geschikt om'S DIEng een visuele weergave van vet transplantaten en volgende volumeveranderingen tijd.
Inleiding
Weefseldefecten in zachte weefsels ontstaan door verschillende oorzaken, waaronder trauma, tumorresectie, veroudering en aangeboren afwijkingen. Ze kunnen invaliderend zijn voor patiënten en vertegenwoordigen een van de meest voorkomende, maar uitdagende problemen voor reconstructieve chirurgen. Er bestaan veel methoden om weefseltegoeden in zachte weefsels aan te pakken, zoals lokale en vrije flappen, collageeninjecties en synthetische fillers.4-8 Sinds het eerst gedocumenteerde gebruik door Neuber in 18931 is echter autoloog vettransplantatie de gulden standaard gebleven voor het herstellen van deficiënties in zachte weefsels, omdat het direct ....
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Protocol
OPMERKING: Experimentele protocollen en toestemming van de patiënt vormen voor het verkrijgen van vet werden beoordeeld en door de Stanford University Institutional Review Board (Protocol # 2188) goedgekeurd. Alle dierlijke procedures werden goedgekeurd door de Stanford administratieve Panel on Laboratory Animal Care (APLAC) onder Protocol # 9999. Alle experimenten werden uitgevoerd met een strikte naleving van de veiligheid dierlijke en humane richtlijnen zorg.
1. Vet Oogsten
- De Coleman procedure 17-19 verkrijgen humaan vetweefsel van de buik, flank, en / of dij gebieden van gezonde vrouwelijke patiënten die een ele....
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Resultaten
Vet grafts geleidelijk kleiner in volume over de studie, resulterend in 62,2% gemiddelde overlevingstijd in week 8 (figuur 4A) 24 Na afloop van de Week 8 scan werd elk vet transplantaat geëxtraheerd uit één stuk. Een Wilcoxan rank sum test werd gebruikt om het verschil tussen volumemetingen vet transplantaten verkregen met elk micro-CT of berekend uit fysieke massa vergelijken. Er werd geen significant verschil gevonden tussen deze twee methoden (tweezijdige p-waarde = 0,9362).
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Discussie
Tot nu toe zijn de meeste onderzoekers zich op niet-beeldvormende modaliteiten om de lange-termijn overleving van vet enten te kwantificeren, maar deze methoden vereisen het offer van de studie van dieren en de opbrengst slechts een enkele meting. 3,10-12 Onze studie vertegenwoordigt een verbeterde analysemethode die doelstelling, real-time kwantificering van vet transplantaat overleving maakt in een muismodel.
Kritische in dit proces zorgen dat voldoende immuungecompromitteerde m.......
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Openbaarmakingen
Geen van de auteurs heeft enig concurrerend financieel belang te melden.
Dankbetuigingen
Deze studie werd ondersteund door de Oak Foundation, de Hagey Laboratory for Pediatric Regeneratieve Geneeskunde, en het National Institute of Health, Subsidies NIHR21DE019274, NIHR01DE019434, NIHR01DE021683 en NIHU01HL099776 om MTLDCW werd gesteund door de ACS Franklin H. Martin Faculty Research Fellowship, de Hagey laboratorium voor Pediatric Regenerative Medicine, en de Stanford University Child Health Research Institute Faculteit Scholar Award. Micro-CT werd uitgevoerd aan de Stanford Centrum voor Innovatie in in vivo beeldvorming.
....Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Materialen
| Naam | Bedrijf | Catalogusnummer | Opmerkingen |
|---|---|---|---|
| SAL lipoaspirate | |||
| Centrifuge | Beckman Coulter, Inc., Pasadena, CA | ||
| 50 ml conische buisjes | BD Biosciences, San Jose, CA | ||
| CD-1 nude muizen (Crl:CD1-Foxn1nu) | Charles River Laboratories, Inc., Wilmington, MA | ||
| Isofluraan | Henry Schein, Dublin, OH | ||
| 2,5% Betadine | Purdue Pharma, L.P., Stamford, CT | ||
| 70% ethanoloplossing | Gold Shield, Hayward, CA | ||
| 1cc luer-lock spuit | BD Biosciences, San Jose, CA | ||
| 14 gauge canule | Shippert Medical, Centennial, CO | ||
| Pincet | Fine Science Tools, Heidelberg, Duitsland | ||
| Tenotomie schaar | Fine Science Tools, Heidelberg, Duitsland | ||
| 6-0 nylon hechtdraad | Ethicon, Blue Ash, OH | ||
| Fosfaat gebufferde zoutoplossing | Gibco, Carlsbad, CA | ||
| micro-CT scanner | Siemens Healthcare, Pleasanton, CA | ||
| Phantom | TriFoil Imaging, Northridge, CA | ||
| Beeldanalysesoftware | IRW, Siemens Healthcare, Pleasanton, CA | ||
| Weegschaal | Mettler-Toledo International, Inc., Columbus, OH |
Referenties
- Gir, P., et al. Fat grafting: evidence-based review on autologous fat harvesting, processing, reinjection, and storage. Plast Reconstr Surg. 130 (1), 249-258 (2012).
- Kaufman, M. R., et al.
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Herprints en machtigingen
