Het muismodel van onomkeerbare eenzijdige ureterische obstructie (UUO) wordt gepresenteerd samen met het model van omkeerbare UUO waarbij de ureterische obstructie wordt verlicht door anastomose van de afgesneden ureter in de blaas. Deze modellen maken de studie van nierontsteking en littekenvorming mogelijk, evenals weefselremodellering.
Een abonnement op JoVE is vereist om deze inhoud te bekijken. Log in of start vandaag met uw gratis proefperiode.
Methodenartikel
Een muizenmodel van reversibele en irreversibele Eenzijdige Ureteric Obstructie
In dit artikel
Samenvatting
Samenvatting
Obstructie van de nier kan zowel invloed hebben op native als getransplanteerde nieren en leidt tot nierbeschadiging en littekenvorming. Hier wordt een model van obstructieve nefropathie gepresenteerd dat wordt veroorzaakt door unilaterale ureterobstructie (UUO), die ofwel onomkeerbaar (UUO) ofwel omkeerbaar (R-UUO) kan zijn. In het onomkeerbare UUO-model kan de ureter gedurende variabele periodes worden geblokkeerd om steeds ernstiger nierontsteking en interstitiële fibrotische littekenvorming te induceren. In het omkeerbare R-UUO-model wordt de ureter geblokkeerd om hydronefrose, tubulaire dilatatie en ontsteking te induceren. Na een geschikte periode wordt de ureterobstructie chirurgisch omgekeerd door anastomose van de eerder geblokkeerde, doorgesneden ureter met de blaas om volledige decompressie van de nier en herstel van de urinestroom naar de blaas mogelijk te maken. Het onomkeerbare UUO-model is gebruikt om verschillende aspecten van nierondersteking en littekenvorming te onderzoeken, inclusief de pathogenese van de ziekte en het testen van potentiële ontstekingsremmende of antifibrotische therapieën. Het meer uitdagende model van R-UUO is door sommige onderzoekers gebruikt en biedt aanzienlijk onderzoekspotentieel omdat het de studie van ontstekings- en immuunprocessen en weefselremodellering mogelijk maakt in een beschadigde en gelittekende nier na verwijdering van de schadelijke stimulus. Als gevolg hiervan biedt het R-UUO-model onderzoekers de mogelijkheid om de resolutiekwestie van nierondersteking samen met belangrijke aspecten van weefselreparatie te onderzoeken. Deze experimentele modellen zijn relevant voor de menselijke ziekte, aangezien patiënten vaak met obstructie van de nierkanaaltjes worden gepresenteerd die decompressie vereisen en vaak worden achtergelaten met aanzienlijke resterende nierbeschadiging waarvoor geen huidige behandelingsopties bestaan en die mogelijk tot een eindstadium van nierfalen kunnen leiden.
Inleiding
Het algemene doel van het experimentele model dat hier wordt beschreven, is om obstructieve nefropathie te induceren door unilaterale ureterobstructie (UUO), die ofwel onomkeerbaar (UUO) ofwel omkeerbaar (R-UUO) kan zijn. Een eenvoudig onomkeerbaar model van UUO wordt gepresenteerd waarbij de linkerureter permanent wordt geobstrueerd door ligatie met een hechtdraad of door het aanbrengen van een ligatieclip. Dit resulteert in een duidelijke dilatatie van de ureter samen met verminderde renale bloedstroom en glomerulaire filtratie. Nierbiopsie toont tubulaire dilatatie en steeds ernstiger interstitiële renale ontsteking en fibrose. Onomkeerbare UUO is een nuttig model ....
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Protocol
Algemeen Begeleiding: Animal experimenten werden uitgevoerd in overeenstemming met de richtlijnen en voorschriften opgelegd door de Dieren (wetenschappelijke procedures) Act 1986. Dit protocol en de bijbehorende video-protocol zijn voor zowel een standaard UUO en een R-UUO, die kan worden uitgevoerd op vele muisstammen. In de bijbehorende video worden beide procedures uitgevoerd op mannelijke C57BL / 6-muizen van 8 weken. De in de sectie representatieve resultaten gegevens werden verkregen uit mannelijke FVB / n muizen.
Opmerking: Dit protocol en bijbehorende video beschreven hoe een standaard UUO voeren en R-UUO gebruikmaking van de link....
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Resultaten
Het uiterlijk van de nierveranderingen aanzienlijk na ureterale obstructie en wordt bleker en gespannen palpatie met de tijd (Figuur 1). Er is steeds dilatatie van de ureter proximaal van de obstructie en het nierbekken. De nier wordt steeds atrofische de duur van obstructieve nefropathie toeneemt met verlengde obstructie resulteert in een sterke verdunning van de renale cortex en medulla. Naar aanleiding van de omkering van de ureteric obstructie, de kleur van de nier wordt donkerder als de doorbloedin.......
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Discussie
Obstructie van de nier kan zowel inheemse als getransplanteerde nieren aantasten en leidt tot nierbeschadiging en littekenvorming. Het R-UUO-model is relevant voor menselijke ziekten, aangezien patiënten vaak een obstructie van het nierkanaal hebben die secundair is aan prostaathypertrofie, posterior urethrale kleppen, enz. dat decompressie vereist en patiënten vaak worden achtergelaten met significante resterende nierfunctiestoornissen waarvoor momenteel geen behandelingsopties bestaan en die uiteindelijk kunnen leiden .......
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Openbaarmakingen
De auteurs hebben geen concurrerende of tegenstrijdige belangen te onthullen.
Dankbetuigingen
Het huidige onderzoek werd ondersteund door subsidies van Kidney Research UK (ST4/2011), de Cunningham Trust (CT11/14), de Mrs AE Hogg Charitable Trust voor nieronderzoek en de Renal Endowment Fund van het Royal Infirmary of Edinburgh.
....Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Materialen
| Naam | Bedrijf | Catalogusnummer | Opmerkingen |
|---|---|---|---|
| Blunt Dissecting Scissors | Fine Science Tools | 14072-10 | |
| Spring Scissors – straight | Fine Science Tools | 15000-10 | |
| Toothed forceps | Fine Science Tools | 11021-12 | |
| Angled forceps x 2 | Fine Science Tools | 00649-11 | |
| Straight forceps | Fine Science Tools | 00632-11 | |
| Colibri 3 cm wire retractor | Fine Science Tools | 17000-03 | |
| Castroviejo needle holder with lock | Fine Science Tools | 12565-14 | |
| Wound clip applicator | Fine Science Tools | 12031-07 | |
| 7 mm wound clips | Fine Science Tools | 12032-07 | |
| Castroviejo micro needle holder with lock | Fine Science Tools | 12060-01 | |
| OPMI pico microscope | Carl Zeiss | S100 | |
| Heat electronic pad | Cozee Comfort | n/a | |
| 6/O silk braided suture | Harvard Apparatus | 72-3287 | |
| 9/O Dafilon (polyamide) suture | B-Braun | G1111434 | |
| 5/O braided silk suture | Harvard Apparatus | 51-7680 | |
| Regular bevel needle, 1 inch, 21G | Becton, Dickinson and Company | 305175 | |
| 1 ml syringe slip tip | Becton, Dickinson and Company | 300184 | |
| Wypall paper swabs | Kimberley-Clark | L40 | Gesteriliseerde (Autoclaaf) |
| Cotton wool buds | Johnson and Johnson | n/a | Gesteriliseerde (Autoclaaf) |
| Plain drapes | Guardian | CB03 | Gesteriliseerde (Autoclaaf) |
| Soft wall silicone rubber tubing | Silicone buis - interne diameter 1,0 mm; externe diameter 2,0 mm; wanddikte 0,6 mm | ||
| (Lacri-Lube) Witte zachte paraffine 57,3%, minerale olie 42,5% en lanoline alcohols 0,2% | Allergan Ltd | 21956GB10X | |
| (Videne) Povidon-jodium 10% | Ecolab Ltd | PL 04509/0041 | |
| (Vetalar V) Ketamine hydrochloride | Pfizer Animal Health | Vm 42058/4165 | 100mg/ml oplossing |
| (Domitor) Medetomidine hydrochloride | Orion Pharma | Vm 06043/4003 | 1mg/ml |
| (Vetergesic) Buprenorphine hydrochloride | Alsto Animal Health | Vm 00063/4002 | 0,3mg/ml |
| (Antisedan) Atipamezole hydrochoride | Orion Pharma | Vm 06043/4004 | 5mg/ml |
| (Adept) 4% Icodextrin | Baxter | Adhesie reductie oplossing | |
| NaCl 0,9% | Baxter | FKE1323 |
Referenties
- Chevalier, R. L., Forbes, M. S., Thornhill, B. A. Ureteral obstruction as a model of renal interstitial fibrosis and obstructive nephropathy. Kidney Int. 75, 1145-1152 (2009).
- Kipari, T., et al.
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Herprints en machtigingen
