Bone Geconditioneerd Medium: Voorbereiding en Bioassay

Jordi Caballé-Serrano; Kosaku Sawada; Guenther Schuldt Filho; Dieter D. Bosshardt; Daniel Buser; Reinhard Gruber

doi:10.3791/52707

Een abonnement op JoVE is vereist om deze inhoud te bekijken. Log in of start vandaag met uw gratis proefperiode.

Methodenartikel

Bone Geconditioneerd Medium: Voorbereiding en Bioassay

11.1K weergaven

⸱

DOI:

10.3791/52707

⸱

8 juli 2015

Jordi Caballé-Serrano¹^,²^,³ , Kosaku Sawada²^,⁵ , Guenther Schuldt Filho¹^,²^,⁶ , Dieter D. Bosshardt¹^,⁴ , Daniel Buser¹ , Reinhard Gruber¹^,²

¹Department of Oral Surgery and Stomatology, School of Dental Medicine, University of Bern, ²Laboratory of Oral Cell Biology, School of Dental Medicine, University of Bern, ³Department of Oral and Maxillofacial Surgery, School of Dental Medicine, Universitat Internacional de Catalunya, ⁴Robert K. Schenk Laboratory of Oral Histology, School of Dental Medicine, University of Bern, ⁵Department of Cranio Maxillofacial Surgery, Inselspital, University of Bern, ⁶Department of Implant Dentistry, School of Dentistry, Universidade Federal de Santa Catarina

In dit artikel

Samenvatting

We beschrijven hier hoe-bone geconditioneerd medium (BCM) voor te bereiden en te testen zijn activiteit in vitro.

Samenvatting

Autologe bottransplantaten worden op grote schaal gebruikt in de kaakchirurgie, orthopedie en traumatologie. Autologe bottransplantaten vervangen niet alleen ontbreekt het bot, maar ook ondersteuning van het complexe proces van botregeneratie. Deze gunstige gedrag autografts wordt toegeschreven aan drie kenmerken: osteoconductiviteit, osteogenicity en osteo-inductiviteit. Er is echter een ander aspect: Bone ent laat een groot aantal moleculen, zoals groeifactoren, die mesenchymale cellen die betrokken zijn bij botherstel kunnen richten. De paracriene eigenschappen van bottransplantaten worden bestudeerd in vitro door het gebruik van bot-geconditioneerde medium (BCM). Hier presenteren we een protocol over hoe bot geconditioneerd medium te bereiden van inheemse varken corticale bot en bot dat de thermische verwerking of demineralisatie onderging. Cellen kunnen direct worden blootgesteld aan BCM en gezaaid op biomaterialen, zoals collageen membranen, vooraf gedrenkt BCM. We geven voorbeelden van in vitro bioassays met mesenchymale cellen op de expressie van TGF-β gereguleerde genen. De gepresenteerde protocollen moeten aanmoedigen om de paracriene effecten van bottransplantaten verdere onthullen tijdens de regeneratie van bot en een pad voor translationeel onderzoek te openen op het brede terrein van de reconstructieve chirurgie.

Inleiding

Autoloog bot wordt veel gebruikt om defecten die ontstaan als gevolg van misvorming, chirurgische resectie, reconstructieve chirurgie trauma, en voorafgaand aan implantatie ^1,2 overbruggen. Het begrijpen van de biologische principes hoe bottransplantaten ondersteunen van het proces van transplantaat consolidatie niet alleen belangrijk om te begrijpen waarom autografts worden beschouwd als de gouden standaard in reconstructieve chirurgie, is het ook bionische de verbeterde constructie van botsubstituten ^3. Toch graft consolidatie is sneller met autoloog bot ten opzichte van het bot vervangt ^4,5. Derhalve is het noodzakelijk om de mol....