Een abonnement op JoVE is vereist om deze inhoud te bekijken. Log in of start vandaag met uw gratis proefperiode.

Methodenartikel

Hele glasvocht Dissection voor Vitreodynamic Analyse

11.6K weergaven

⸱

DOI:

10.3791/52759

⸱

24 mei 2015

 ,  , 

In dit artikel

Samenvatting

Het doel van dit protocol is om een effectieve techniek te laten zien om een volledige, intacte vitreuze kern en cortex van post mortem geënucleeerde varkensogen te isoleren.

Samenvatting

De auteurs stellen een effectieve techniek voor om het hele, intacte glasvochtkern en de cortex te isoleren uit post mortem geënuleerde varkensogen. Terwijl eerdere onderzoeken de resultaten van dergelijke dissecties hebben laten zien, zijn de gedetailleerde stappen niet beschreven, waardoor onderzoekers buiten het veld niet in staat zijn om hun methoden te repliceren. Andere onderzoeken verzamelen glasvocht hetzij door middel van aspiratie, wat de anatomie van de glasvochtstructuur niet behoudt, of door gedeeltelijke dissectie, wat alleen de glasvochtkern isoleert. De voorgestelde methode isoleert het hele glasvochtlichaam, met de glasvochtkern en cortex intact, terwijl de anatomie en structurele integriteit van het glasvocht worden behouden. In deze methode wordt eerst een scleraal flap van volledige dikte in een geënuleerd varkensoog gemaakt en hierdoor kan het choroïdeweefsel worden gescheiden van de sclera. De scleraal flap wordt vervolgens uitgebreid en de choroïde wordt volledig gescheiden van de sclera. Ten slotte wordt het choroïde-retinaweefsel van het glasvocht afgepeld om een geïsoleerd intact glasvochtlichaam achter te laten. De voorgestelde glasvochtdissectietechniek kan worden gebruikt om fysische eigenschappen van het glasvocht te bestuderen. In het bijzonder heeft deze methode betekenis voor experimentele studies met betrekking tot geneesmiddelafgifte, vitreoretinale zuurstoftransport en intraoculaire convectie.

Inleiding

Het doel van deze methode is het detail een techniek om geheel intact glaslichaam te isoleren, met het glaslichaam kern en cortex intact, van een kadaver oog, met het oog op vitreodynamic analyse. Aangezien het gebied glasachtig fysiologie gegroeid, multidisciplinaire onderzoekers, zoals vloeistofmechanica onderzoekers onderzoeken de fysische en biomechanische eigenschappen van het glasachtige lichaam 1. Hiertoe is het noodzakelijk om detail een techniek om het gehele, intacte glaslichaam isoleren multidisciplinaire onderzoekers bevorderen.

Sebag et al. 2 ea 3 uitgevoerd elegant geheel glasachtige....

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Protocol

Alle enucleated ogen werden verkregen van een slachthuis en alle experimenten werden uitgevoerd in overeenstemming met de institutionele bioveiligheid wetten.

  1. Secure verwijderde oog neer op een oppervlak. Doe dit door het plaatsen van het weefsel pennen door het overtollige weefsel rond de ogen en het veiligstellen van het neer in een piepschuim bord.
  2. Ontleden en los perilimbal bindvlies van het oog.
    1. Gebruik fijn pincet (0,3 tang) en microscissors (Westcott schaar) om het bindvlies incise aan de limbus en botweg ontleden het van de sclera. Knip de conjunctiva aan de limbus de stompe dissectie door naar verdere dissectie staan.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Resultaten

Na het protocol tot een goed glasachtige dissectie met de kern en cortex (figuur 3) intact. Dit blijkt uit de resterende delen van het netvlies gehecht aan het glasvocht cortex. Intact hele glasachtig lichaam kan worden gebruikt op verschillende manieren bepaald vitreodynamic experimenten. In ons geval, de diffusiesnelheid van zuurstof in intacte glasvocht en het bijbehorende tijdsconstante onderzocht (Figuur 2). Glasachtig die werd ontleed (kern en cortex) in onze methode werd in een g.......

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Discussie

Er zijn twee belangrijke stappen die zorgvuldig moeten worden uitgevoerd tijdens glasachtige dissectie. Stap 3, waardoor een volledige dikte sclerale flap, is cruciaal voor het gehele dissectie. Zorg moet worden genomen om niet tot plaatjes choroid bij het maken van de volledige dikte sclerale flap. De andere belangrijke stap is het ontleden weg de sclera van het vaatvlies. Deze stap moet zorgvuldig worden gedaan om te voorkomen dat het creëren van meerdere gaten in het vaatvlies van waaruit het glasvocht kunnen morsen........

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Openbaarmakingen

De auteurs hebben niets te onthullen.

Dankbetuigingen

De auteurs erkennen de volgende financieringsbronnen, Whittier Foundation, Harrington Foundation, National Institutes of Health en Research to Prevent Blindness.

....

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Materialen

Lijst van materialen gebruikt in dit artikel
NaamBedrijfCatalogusnummerOpmerkingen
0.3 forcepsStorz OpthalmicsE1793
Westcott Tenotomy Scissors Curved RightStorz OpthalmicsE3320 R
Scalpel Handle No. 3VWR25607-947
Scalpel Blade, #11, for #3 HandleVWR470174-844

Referenties

  1. Siggers, J. H., Ethier, C. R. Fluid Mechanics of the Eye. Annual Review of Fluid Mechanics. 44 (1), 347-372 (2012).
  2. Sebag, J. Age-related changes in human vitreous structure. Graefes Arch Clin Exp Ophthalmol. 225 (2), 89-93 (1987).
  3. Grignolo, A.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Herprints en machtigingen

Meer artikelen verkennen

Isolatie van het gehele glasachtig lichaamcreatie van een scleraflapscheiding van choroidea en retinadissectie van het varkenoogvitreuze kern en cortexbehoud van de anatomie van het glasachtig lichaamvitreodynamische analysetechniekintact glasachtig lichaameigenschappen van het glasvocht