Een abonnement op JoVE is vereist om deze inhoud te bekijken. Log in of start vandaag met uw gratis proefperiode.

Methodenartikel

Één-wapendrager maagomleiding (OAGB) bij ratten

10.8K weergaven

⸱

DOI:

10.3791/58776

⸱

10 november 2018

In dit artikel

Samenvatting

Dit protocol is voor de uitvoering van een-wapendrager maagomleiding (OAGB) op de rat. De exploitant voert een lange en tubulaire-geniet maag zakje gevolgd door wapendrager hand genaaid. Voor dit model reproduceert de exploitant de verhouding tussen biliopancreatic en gemeenschappelijke ledemaat bij de mens; Daarom meet de ledemaat biliopancreatic 35 cm.

Samenvatting

Het doel van dit protocol is te voorzien in een preklinische model van bariatric chirurgie en, meer in het bijzonder, OAGB bij zwaarlijvige ratten. Op basis van deze preklinische model, kunnen longitudinaal onderzoek worden uitgevoerd om een beter begrip van de mechanismen die ten grondslag liggen aan de resultaten na bariatrische chirurgie bij de mens gezien. Voor dit doel, zijn ratten door middel van een laparotomie onder narcose met Isofluraan geopereerd. Ten eerste, de chirurg maakt een lange en tubulaire maag zakje: na meer curve en hiatal dissectie, de nonglandular maag wordt geniet en verwijderd. Vervolgens is ook de resterende maag geniet om te creëren een maag buis en uitsluiten van het antrum van de maag. Daarna voert de chirurg een enkele end-to-side gastrojejunostomy 35 cm uit de hoek van de duodenojejunal. Deze ledematen lengte heeft uitgekozen om te reproduceren dezelfde verhouding tussen de biliopancreatic ledemaat (BPL) en gemeenschappelijke ledemaat (CL) lengte zoals in menselijke bariatrische chirurgie. De operatie eindigt door aponeurotic en cutane sluiting. Het vroege postoperatieve beheer bestaat uit subcutane hydratatie, een intramusculaire injectie voor profylactische antibiotica, een pariëtale injectie van xylocaine, het beheer van pijnstillers en een progressieve herinvoering van dieet.

Inleiding

Morbide obesitas is een groot gezondheidsprobleem in de westerse wereld, met toenemende prevalentie1. Bariatrische chirurgie blijft het alleen op lange termijn effectieve therapie voor morbide obesitas2, met duidelijke voordelen op zwaarlijvigheidbetrekking hebbende comorbidities3. Roux-en-Y gastric bypass (RYGB) blijft de goudstandaard want het is een van de oudste procedures en een van de meest uitgevoerde wereldwijd met de langste follow-up4. OAGB is een meer recente procedure voor het eerst beschreven in 2001 door Rutledge5. Het is beschreven als een effectief alternatief voor RYGB6 en heeft een aantal voordelen. Vroege gegevens blijkt een soortgelijke werkzaamheid aan RYGB met betrekking tot verlies van het gewicht en de resolutie van obesitas-gerelateerde comorbidities6,7. Bovendien, de risico's van stenose of lekkage van de anastomose jejunojejunal in RYGB worden voorkomen en het risico van een interne hernia mogelijk lager dan met RYGB8.

De fysiologische mechanismen die ten grondslag liggen aan gewichtsverlies na bariatrische chirurgie blijven omstreden en kunnen moeilijk zijn om te studeren in mens9. Dierlijke modellen zijn nuttig om te begrijpen hoe bariatrische chirurgie mogelijk van invloed op glucose metabolisme, neuro-endocriene wijzigingen of verzadiging mechanismen. Vergelijkende gegevens tussen procedures ontbreken en effecten op lange termijn van deze chirurgie moeten beter begrepen10. Het is niet mogelijk om te pre- en postoperatieve klinische zorg volledig te standaardiseren, en bevredigende follow-up kan worden moeilijk te bereiken: enkele studies verslag verlies-aan-follow-up tarieven oplopen tot 30% voor het eerste jaar11.

Het concept van maag-bypass is een combinatie van een restrictieve procedure, als gevolg van de oprichting van een maag etui, en een gematigde graad van malabsorptie, als gevolg van de uitsluiting van de twaalfvingerige darm en de proximale jejunum van de gastro-intestinale doorvoer. Ledematen lengte in bariatrische chirurgie is op dit moment nog steeds een kwestie van debat12,13. Beschikbare gegevens blijkt dat nog is een hoge variabiliteit van procedures en geen consensus bereikt over de optimale ledematen lengte voor OAGB14,15. Vele auteurs hebben echter een lengte van 200 cm BPL gemeld als de standaard voor OAGB16,17,18. De gemiddelde lengte van de kleine darm is ongeveer 700 cm19.

Verschillende knaagdieren modellen van RYGB hebben wereldwijd20, met grote variaties in termen van zakje grootte, lengte van ledematen, en het behoud van de vagale zenuwen ontwikkeld. Maar zeer weinig auteurs gemeld een model van experimentele OAGB; om deze reden ontwikkelde theresearch team een model van OAGB i.s.m. bariatrische chirurgen. De grondgedachte achter de ontwikkeling van het model was om na te bootsen maagomleiding beoefend bij de mens. Het model omvat de bouw van een maag etui met de uitsluiting van het antrum en het lichaam van de maag. De chirurg maakt daarvoor, een ablatie van de nonglandular maag een stapelposities apparaat gebruikt. In vergelijking met een eerdere protocol20, het team besloten om toe te voegen een per-operatieve behandeling met profylactische antibiotica om te verminderen de morbiditeit gekoppeld aan gastro-intestinale anastomose, zoals routine in menselijke chirurgie21is.

De rat ledematen lengte gebruikt in dit model werd gekozen om te reproduceren van de verhouding tussen de BPL en de CL bij de mens. Voorlopige metingen hebben aangetoond de totale kleine darm lengte bij ratten tussen de 90 en 120 cm22. Bijgevolg was de lengte van de BPL gekozen voor OAGB 35 cm. Dit model is bovendien haalbaar is zonder een vasculaire afbinding, vermijden van maag zakje ischemie.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Protocol

Alle dierlijke gebruik gelijkvormig aan de richtlijnen van de Europese Gemeenschap en is goedgekeurd door de lokale ethische Commissie (Comité d'éthique nl expérimentation animale N ° 121) en het ministerie van hoger onderwijs en onderzoek (Ref #02285.03).

1. dieren en diëten

  1. Ratten
    1. Gebruik mannelijke Wistar ratten gewicht 260-320 g, begon op een vetrijke dieet (HFD) op de leeftijd van 7 weken.
  2. Dieet
    1. Induceren een dieet-geïnduceerde obesitas, met ten minste 12 preoperatieve weken van de HFD. Geef de rats gratis toegang tot water en de HFD.
      Opmerking: De HFD bestaat uit een gezuiverde laboratorium hypercaloric knaagdier dieet met 45% vet (Zie Tabel van materialen).
    2. Ervoor zorgen dat de ratten zwaarlijvige ten tijde van de operatie, met een gewicht tussen de 600-800 g.

2. materiaal

  1. Chirurgische apparatuur
    1. Autoclaaf alle chirurgische instrumenten voor de operatie.
    2. Lay-out alle chirurgische instrumenten die nodig zijn voor de procedure (Zie Tabel van materialen).
    3. De wapendrager onder vergrootglazen, met behulp van conventionele en microchirurgische instrumenten uit te voeren.
    4. Zorg ervoor dat de ratten zijn gepositioneerd op de opwarming van de aarde plaat bij een temperatuur van 37 ° C en onder een warmte lamp. Positie van de isothermische elektrische bestuur desgewenst.
  2. Narcose en dier voorbereiding
    1. Anesthetize de rat met een inhalatie van 3% vol Isofluraan in de lucht voor de inductie van de anesthesie in het knaagdier vak.
    2. De rat overbrengen in de opwarming van de aarde plaat en onderhouden van de narcose met de gelaatsmasker hetzelfde tempo stroom van 3%. Zorg ervoor dat de afstomping voltooid is door het knijpen van de staart van het dier.
    3. Scheren van de voorste vacht, overeenkomt met de laparotomie de insnijding zone, een ~ 3 cm-breed zone van de xiphoid in de dierlijke bekken, met behulp van een elektrisch scheerapparaat.
    4. Scheren een 3 cm-brede zone op de achterkant van het dier, gecentreerd op de hals van het dier. Deze stap vergemakkelijkt monopolaire macht geleiding.
    5. Spray een alcohol-gebaseerde desinfecterende oplossing over de operatie-site.

3. operatie

  1. Laparotomie
    1. Alcoholbasis lokaal antisepticum van toepassing op de geschoren huid.
    2. Open de buik met een cutane insnijding van de middellijn van de xiphoid process van ongeveer 3 cm in lengte met een scalpel. Open de fascia en het buikvlies langs de linea alba met een monopolaire scalpel.
    3. Zorg ervoor dat de peritoneale holte op de gehele lengte van de cutane incisie wordt geopend.
      Bloot de peritoneale holte met een zelfstandige oprolmechanisme.
  2. Grotere curve en hiatal dissectie
    1. Het ontleden van de grotere maag curve vanaf de samenvloeiing tussen de klieren en nonglandular maag naar de linkerkant van de buik slokdarm met een chirurgische schaar.
    2. Geleidelijk de gastrosplenic schepen met de monopolaire scalpel, stollen om volledig bevrijden de grote maag curve aan de zijn hoek. Dan bloot het hiatal gebied door segmenteren dunne ligamenten.
    3. Het ontleden van de rechterkant van de buik slokdarm, behoud van de linker maag slagader en vagale zenuwen, met behulp van een handmatige dissector.
  3. Maag zakje confectie
    1. Nonglandular maag ablatie
      1. Een 35 mm-nietje van toepassing (Zie Tabel van materialen) pistool op het kruispunt tussen de klieren en nonglandular maag naar de linkerkant van de gastro-oesofageale junction. Zorg ervoor dat de nonglandular maag aan de rechterkant van de nietmachine.
      2. Brand het pistool en verwijder vervolgens de resected nonglandular maag.
    2. Maag etui
      1. Een tweede nietmachine met behulp van een thoraco-buik (TA)-apparaat (3-3,5 mm) van toepassing (Zie Tabel of Materials), parallel aan de eerste nieten, aan de rechterkant van de gastro-oesofageale kruising het antrum en een deel van het lichaam van de maag uit te sluiten.
      2. Zorg ervoor dat het resultaat van de twee nietje regels een maag zakje ongeveer 0.5 cm breed.
  4. OAGB
    1. Kleine darm meting
      1. Zoek de duodenojejunal hoek. De proximale jejunum is het gedeelte van de kleine darm bevindt zich onder het mediale gedeelte van de dikke darm; het is het alleen nonmobile deel van de kleine darm in de rat.
      2. Met een 5 cm lange tape, handmatig 35 cm vanaf de hoek van de duodenojejunal te meten. Voer een punctiform enterotomy aan de antimesenteric kant van het jejunum.
    2. Gastrojejunal wapendrager
      1. Uitvoeren van een punctiform gastrotomy met de monopolaire scalpel aan de grotere kant van de kromme van de maag pouch, precies tussen de twee vorige nieten lijnen. Als de maag zakje is niet helemaal leeg, zachte manuele druk op de maag pouch legen uitvoeren.
      2. Het uitvoeren van een end-to-side gastrojejunal anastomosis met nontraumatic Tang en een kleine naald-houder.
      3. Start van de hechtdraad met twee extremiteit steken van 7-0 isotactic polypropyleen (Zie Tabel van materialen), betreft de twee uiteinden van de gastrotomy met de uiteinden van de enterotomy.
      4. Voer vervolgens met de dezelfde draden gebruikt voor de twee extremiteit steken, uit twee lopende hechtingen aan weerskanten van de anastomose. Indien nodig, terug de anastomose ter vergemakkelijking van de manoeuvre. Controleer de kwaliteit van de anastomose door het plaatsen van nauwe steken, minstens zeven of acht aan weerskanten van de anastomose.
      5. Neem 1 mm brede sereus vlies in elke steek. Vermijd nemen elke mucosa in de steek om te voorzichtig het begraven van de darmen en maag mucosa binnen de hechtdraad.
        Opmerking: Het resultaat hiervan is een terminolateral gastrojejunal anastomosis met een ledemaat van de biliopancreatic aan de linkerkant en een voedselbehoefte (AL) /CL aan de rechterkant. Zorg ervoor dat de anastomose permeabele met zachte druk op de maag pouch.
  5. Sluiting en directe zorg
    1. Spoel de peritoneale holte met 0,9% NaCl-oplossing en handmatig vervangen de buikorganen in hun fysiologisch posities.
    2. Sluit de buikwand met een lopende hechtdraad van gevlochten polyester Sutuur (geologie) 2-0 (Zie Tabel van materialen) met een klassieke naald-houder.
    3. Sluit de huid met een lopende hechtdraad voor polyglactin 910 4-0 (Zie Tabel van materialen).
    4. Twee pariëtale injecties van lidocaïne 1% aan weerskanten van de laparotomie uitvoeren Een totale dosis van 1 mL/kg van lidocaïne 1% in de aponeurosis van de buikspier rectus beheren.

4. de postoperatieve zorg

  1. Uitvoeren van een intramusculaire injectie van 20.000 eenheden/kg penicilline G.
  2. Het uitvoeren van een subcutane injectie van 10 mL isotone polyionic oplossing kalium (KCl/L 2 g, 4 g NaCl/l en 50 g glucose/L). In deze financiële injectie is het mogelijk om te mengen met geschikte analgetica zoals buprenorfine (0,1 mg/kg) en meloxicam (2 mg/kg).
  3. Plaats de ratten in afzonderlijke kooien opgewarmd door een lamp, totdat zij volledig wakker zijn.
  4. Vaak inspecteert de dieren teneinde te beheren van postoperatieve behandeling met geschikt analgesie en hydratatie (isotone polyionic-oplossing).
  5. Geschikte pijnstiller injecteren, buprenorfine (0,1 mg/kg) en meloxicam (2 mg/kg), subcutaan uit de directe postoperatieve periode tot dag 4, elke 12 h.
  6. Houd de ratten met gratis toegang tot water tijdens dag 1. Op dag 2/3, geven ze gratis toegang tot een vloeibaar dieet. Op dag 4, geven ze ad libitum toegang tot een normaal dieet.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Resultaten

Dit protocol is reproduceerbaar en bootst OAGB zoals beoefend bij de mens. De veiligheid van dit protocol wordt ondersteund met gepubliceerde gegevens23,24 met een laag sterftecijfer tussen 12% en 25%. Verschillende chirurgen in het onderzoeksteam met een soortgelijke sterftecijfer hebben dit protocol beoefend.

Toch leren knaagdier chirurgie is complex, en het gebruik va...

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Discussie

Dit protocol heeft het voordeel van het nabootsen van OAGB routinematig beoefend bij de mens. De veiligheid en de reproduceerbaarheid in ratten zijn aangetoond in klinisch en metabole resultaten.

De anastomosis in dit protocol vormt een technische probleem en is de belangrijkste kritische stap. Hiervoor is het noodzakelijk specifieke microchirurgische hulpmiddelen, zoals een microchirurgie naald-houder of vergrootglazen te gebruiken. Om te realiseren een hermetische wapendrager zonder enige st...

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Openbaarmakingen

De auteurs hebben niets te onthullen.

Dankbetuigingen

De auteurs wil Jean Pierre Marmuse bedanken voor zijn voortdurende hulp en ondersteuning; Eglantine Voitellier, Jean-Baptiste ThomasKaelin en Houneyda El Jindi voor het opzetten van de modellen en de illustraties; Anne-Charlotte Jarry en Andreia Goncalves voor hun hulp bij de video's; Sara J. Zaat voor het bewerken van de tekst in het Engels. Matthieu A. Siebert en Lara Ribeiro-Parenti waren ontvangers van sponsoring van de Fondation pour la recherche médicale (FRM) en de Association française de chirurgie (AFC).

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Materialen

Lijst van materialen gebruikt in dit artikel
NaamBedrijfCatalogusnummerOpmerkingen
High-Fat Diet, 45 % vet Genestil, Royaucourt, FrankrijkC 1090-45http://www.genestil.com/
Metzenbaum schaarWorld Precision instrument, Sarasota, VS501739https://www.wpi-europe.com
Dumont pincetWorld Precision instrument, Sarasota, VS14098https://www.wpi-europe.com
Iris forcepsWorld Precision instrument, Sarasota, VS15915https://www.wpi-europe.com
Iris schaar 10cmWorld Precision instrument, Sarasota, VS14218https://www.wpi-europe.com
NaaldhouderWorld Precision instrument, Sarasota, VS14110https://www.wpi-europe.com
Alm zelfhoudende retractorWorld Precision instrument, Sarasota, VS14240https://www.wpi-europe.com
Baby Mixter hemostatic forceps,  recht hoekigWorld Precision instrument, Sarasota, VS501240https://www.wpi-europe.com
Niet-geweven steriele wattenLCH Medical Products, Parijs, FrankrijkSN40-0755www.lch-medical.com
Galileïsche binoculair loep 2,5xWorld Precision instrument, Sarasota, VS504056https://www.wpi-europe.com
Dijdraad: isotactisch polypropyleen, monofil Prolene 7-0 Ethicon, Issy les  Moulineaux, FrankrijkEH7813Ewww.ethicon.com
Parietale draad : gecoat gevlochten polyester Ti-Cron 2-0Covidien, Mannsfield, MA, VS3003-52www.covidien.com
Cutaand draad : polyglactine, VICRYL RAPIDE 4-0 Ethicon, Issy les  Moulineaux, FrankrijkVR3100www.ethicon.com
ETS-Flex 35- mm hechtapparaatEthicon, Issy les  Moulineaux, FrankrijkATS45www.ethicon.com
Proximale herbruikbare staplersEthicon, Issy les  Moulineaux, FrankrijkXR30Vwww.ethicon.com
TA-DST 30mm-3,5mmEthicon, Issy les  Moulineaux, FrankrijkTX30Bwww.ethicon.com
Alcoholisch 5% BetadineMEDA Pharma, Mérignac, Frankrijk41085www.medapharma.fr
LIDOCAINE AGUETTANT 20 mg/mlLABORATOIRE AGUETTANT, Lyon, Frankrijk3400940000000.0https://www.aguettant.fr
Penicilline G 5MUIPanpharma, Luitre, Frankrijk3.40E+12https://www.panpharma.eu/fr
Bionolyte G5 ; natriumchloride 0,4%, glucose 5%, kaliumchloride 0,2%)Baxter, Maurepas, Frankrijk
Vloeibare voedingGenestil, Royaucourt, FrankrijkC-0200Thttp://www.genestil.com/
Isofluraan 100%Centravet, Plancoët, FrankrijkISO007http://cooperative.centravet.net

Referenties

  1. Ogden, C. L., et al. Prevalence of overweight and obesity in the United States, 1999-2004. Journal of American Medical Association. 295, 1549-1555 (2006).
  2. Buchwald, H. Consensus Conference Panel. Consensus conference statement bariatric surgery for morbid obesity: health implications for patients, health professionals, and third-party payers. Surgery for Obesity and Related Disease. 1, 371-381 (2005).
  3. Mingrone, G., et al. Bariatric-metabolic surgery versus conventional medical treatment in obese patients with type 2 diabetes: 5 year follow-up of an open-label, single-centre, randomised controlled trial. Lancet. 386, 964-973 (2015).
  4. Nguyen, N. T., Varela, J. E. Bariatric surgery for obesity and metabolic disorders: state of the art. Nature Reviews. Gastroenterology & Hepatology. 14, 160-169 (2017).
  5. Rutledge, R. The mini-gastric bypass: experience with the first 1,274 cases. Obesity Surgery. 11, 276-280 (2001).
  6. Lee, W. J., et al. Laparoscopic Roux-en-Y vs. mini-gastric bypass for the treatment of morbid obesity: a 10-year experience. Obesity Surgery. 22, 1827-1834 (2012).
  7. Victorzon, M. Single-anastomosis gastric bypass: better, faster, and safer? Scandinavia Journal of Surgery. 104, 48-53 (2015).
  8. Magouliotis, D. E., Tasiopoulou, V. S., Tzovaras, G. One anastomosis gastric bypass versus Roux-en-Y gastric bypass for morbid obesity: a meta-analysis. Clinical Obesity. 8, 159-169 (2018).
  9. Seyfried, F., le Roux, C. W., Bueter, M. Lessons learned from gastric bypass operations in rats. Obesity Facts. 4 Suppl 1, 3-12 (2011).
  10. Wang, F. G., Yu, Z. P., Yan, W. M., Yan, M., Song, M. M. Comparison of safety and effectiveness between laparoscopic mini-gastric bypass and laparoscopic sleeve gastrectomy: A meta-analysis and systematic review. Medicine (Baltimore). 96, e8924(2017).
  11. Hong, J., Park, S., Menzo, E. L., Rosenthal, R. Midterm outcomes of laparoscopic sleeve gastrectomy as a stand-alone procedure in super-obese patients. Surgery for Obesity and Related Disease. 14 (3), 297-303 (2017).
  12. Abellan, I., et al. The influence of the percentage of the common limb in weight loss and nutritional alterations after laparoscopic gastric bypass. Surgery for Obesity Related Disease. 10, 829-833 (2014).
  13. Nora, M., Morais, T., Almeida, R., Guimarães, M., Monteiro, M. P. Should Roux-en-Y gastric bypass biliopancreatic limb length be tailored to achieve improved diabetes outcomes? Medicine (Baltimore). 96, e8859(2017).
  14. Madan, A. K., Harper, J. L., Tichansky, D. S. Techniques of laparoscopic gastric bypass: on-line survey of American Society for Bariatric Surgery practicing surgeons. Surgery for Obesity and Related Disease. 4, 166-173 (2008).
  15. Himpens, J. M., Vilallonga, R., Cadière, G. B., Leman, G. Metabolic consequences of the incorporation of a Roux limb in an omega loop (mini) gastric bypass: evaluation by a glucose tolerance test at mid-term follow-up. Surgical Endoscopy. 30, 2935-2945 (2016).
  16. Parmar, C. D., et al. Mini Gastric Bypass: first report of 125 consecutive cases from United Kingdom. Clinical Obesity. 6, 61-67 (2016).
  17. Chevallier, J. M., et al. One thousand single anastomosis (omega loop) gastric bypasses to treat morbid obesity in a 7-year period: outcomes show few complications and good efficacy. Obesity Surgery. 25, 951-958 (2015).
  18. Kular, K. S., Manchanda, N., Rutledge, R. A 6-year experience with 1,054 mini-gastric bypasses-first study from Indian subcontinent. Obesity Surgery. 24, 1430-1435 (2014).
  19. Tacchino, R. M. Bowel length: measurement, predictors, and impact on bariatric and metabolic surgery. Surgery for Obesity Related Disease. 11, 328-334 (2015).
  20. Bruinsma, B. G., Uygun, K., Yarmush, M. L., Saeidi, N. Surgical models of Roux-en-Y gastric bypass surgery and sleeve gastrectomy in rats and mice. Nature Protocols. 10, 495-507 (2015).
  21. Jeppsson, B., Mangell, P., Thorlacius, H. Use of probiotics as prophylaxis for postoperative infections. Nutrients. 3, 604-612 (2011).
  22. Cavin, J. B., et al. Differences in Alimentary Glucose Absorption and Intestinal Disposal of Blood Glucose After Roux-en-Y Gastric Bypass vs Sleeve Gastrectomy. Gastroenterology. 150, 454-464 (2016).
  23. Bruzzi, M., et al. Long-Term Evaluation of Biliary Reflux After Experimental One-Anastomosis Gastric Bypass in Rats. Obesity Surgery. 27, 1119-1122 (2017).
  24. Cavin, J. B., et al. Malabsorption and intestinal adaptation after one anastomosis gastric bypass compared with Roux-en-Y gastric bypass in rats. American Journal of Physiology-Gastrointestinal and Liver Physiology. 311, G492-G500 (2016).
  25. Jacob, P. S., et al. Isocaloric intake of a high-fat diet promotes insulin resistance and inflammation in Wistar rats. Cell Biochemistry and Function. 31, 244-253 (2013).

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Herprints en machtigingen

Tags

OAGB-ratmodelbariatrisch chirurgisch protocolcreatie van maagpouchgastrojejunostomie-techniekbiliopancreatische luslengte van de gemeenschappelijke lusvetrijk dieetWistar-rattentoepassing van chirurgische stapler