Een abonnement op JoVE is vereist om deze inhoud te bekijken. Log in of start vandaag met uw gratis proefperiode.

Methodenartikel

Expansie van twee-dimensie Electrospun Nanofiber matten in de steigers van de drie-dimensie

6.4K weergaven

⸱

DOI:

10.3791/58918

⸱

7 januari 2019

 ,  ,  , 

In dit artikel

Samenvatting

Dit artikel demonstreert de techniek van het uitbreiden van een traditionele, twee-dimensie (2D) electrospun nanofiber mat in een drie-dimensie (3D) steiger door de drukverlaging subkritische CO2 vloeistof. Deze augmented steigers zijn 3D, nauw mimic cellulaire nanotopographic signalen, en het behoud van de functies van biologische moleculen ingekapseld binnen de nanofibers.

Samenvatting

Electrospinning is de gewenste technologie in het produceren van een synthetische, functionele Steiger als gevolg van de biomimicry extracellulaire matrix en de bestrijding van het gemak van samenstelling, structuur en diameter van vezels. Echter, ondanks deze voordelen, traditionele electrospun nanofiber steigers komen met beperkingen waaronder ongeorganiseerd nanofiber oriëntatie, lage porositeit, kleine poriegrootte en vooral tweedimensionale matten. Als zodanig, is er een grote behoefte aan de ontwikkeling van een nieuw proces voor het fabriceren van electrospun nanofiber steigers die de bovenstaande beperkingen kunnen overwinnen. Hierin is een nieuwe en eenvoudige methode geschetst. Een traditionele 2D nanofiber mat wordt omgezet in een 3D steiger met gewenste dikte, kloof afstand, porositeit en nanotopographic signalen voor cel zaaien en proliferatie door de drukverlaging subkritische CO2 vloeistof. Naast het bieden van een steiger voor weefselregeneratie optreden, biedt deze methode ook de mogelijkheid om in te kapselen bioactieve moleculen zoals antimicrobiële peptiden voor lokale drug delivery. De CO2 uitgebreid nanofiber steigers houden groot potentieel in weefselregeneratie, wondgenezing, 3D weefsel modellering en actuele drug delivery.

Inleiding

Het concept van de ontwikkeling van een synthetische steiger die kan worden geïmplanteerd in patiënten om hulp bij het weefselherstel en regeneratie is dat het gebied van regeneratieve geneeskunde voor decennia heeft doordrongen. De ideale synthetische steiger serveert voor het opwekken van cel migratie vanuit het omliggende gezonde weefsel, biedt een architectuur voor cel zaaien, hechting, signalering, proliferatie en differentiatie, ondersteunt vascularisatie, voorziet in voldoende oxygenatie en voeding levering, en host immuun activiteit om succes te verzekeren na implantatie1bevordert. Bovendien, kan het worden gebruikt als drager voor het ....

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Protocol

Alle in vivo procedures zoals hieronder beschreven werden goedgekeurd door het Comité van de IACUC aan de Universiteit van Nebraska Medical Center.

1. Prepareer de oplossingen voor standaard Electrospinning

  1. Los in een glazen buis van 20 mL, 2 g poly(ε-caprolactone) (PCL, Mw = 80 kDa) in een oplosmiddel mengsel van dichloormethaan (DCM) en N, N-dimethylformamide (DMF) met een rantsoen van 4:1 (v/v) met een concentratie van 10% (m/v).
    Let op: Ingang DCM en DMF in een goed geventileerde kap om te voorkomen dat blootstelling aan rook. DCM niet blootstellen aan kunststoffen.
  2. Plaats de glazen buis in een lab rotato....

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Resultaten

De werkzaamheid van traditionele 2D electrospun nanofiber matten uitbreiden naar 3D steigers via drukverlaging subkritische CO2 vloeistof werd aangetoond in verschillende capaciteiten: de dikte van de steigers verhoogd van 1 mm wanneer onbehandeld tot 2.5 mm en 19,2 mm met één en twee CO2 behandelingen, respectievelijk (figuur 3A-C). Het kenmerk porositeit-a van de architectuur van essentieel belang is voor de cel zaaien.......

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Discussie

Het omzetten van traditionele 2D electrospun nanofiber matten in uitgebreide 3D steigers via CO2 drukverlaging werd onderzocht. Traditionele 2D nanofiber matten zijn met succes uitgebreide via subkritische CO2 vloeistof. De kritische stappen zijn de matten knippen zonder vervormen de randen te fabriceren 2D nanofiber matten onder een geoptimaliseerde voorwaarde (bv. met behulp scherpe chirurgische schaar). Deze CO2-uitgebreide nanofiber steigers hebben vele voor.......

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Openbaarmakingen

Auteurs verklaren dat er geen conflict van belang is.

Dankbetuigingen

Dit werk werd gesteund door subsidies van het nationale Institute of General Medical Science (NIGMS) op de NIH (2P 20 GM103480-06 en 1R01GM123081 naar J.X.), de Otis Glebe Medical Research Foundation, NE LB606 en opstarten van fondsen van de Universiteit van Nebraska Medical, Inc. Centrum.

....

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Materialen

Lijst van materialen gebruikt in dit artikel
NaamBedrijfCatalogusnummerOpmerkingen
PolycaprolactoneSigma-Aldrich440744
N,N-DimethlyformamideFisher ChemicalD-199-1
DichloromethaneFisher ChemicalAC61093-1000
Coumarin 6Sigma-Aldrich546283
Rotating Steel DrumcustomizedDit dient als verzamelaar tijdens het elektrospinnen.
Syringe PumpFisher Scientific14-831-200Coaxiale spinning vereist twee enkele spuitpompen.
RevolverLab Net InternationalH5600Instelbare labrotator voor het mengen van oplossingen
Hypodermic Needle (27G x 1 1/2")EXCELINT International Co26426Dit is onderdeel van de voorbeeld aangepaste coaxiale nozzel getoond.
Hypodermic Needle (21G x 1 1/2")EXCELINT International Co26416Dit is onderdeel van de voorbeeld aangepaste coaxiale nozzel getoond.
High Voltage DC Power SupplyGamma High Voltage ResearchES30
Scanning Electron MicroscopeFEINova 2300
Fluorescence MicroscopeZeissAxio Imager 2
LL 37 ELISA KitHycult BiotechHK321-02

Referenties

  1. Chen, S., et al. Recent advances in electrospun nanofibers for wound healing. Nanomedicine. 12 (11), 1335-1352 (2017).
  2. Khandalavala, K., Jiang, J., Shuler, F. D., Xie, J. Electrospun Nanofiber Scaffolds with Gradations in Fiber Organization. Journal o....

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Herprints en machtigingen

Meer artikelen verkennen

Fabricage van 3D-scaffoldssubkritische CO2-expansiebereiding van polymeeroplossinginstallatie van elektrospinning-apparaatverwerking met vloeibare stikstofbehandeling met droogijsanalyse van scaffold-porositeitcelzaai-proliferatieinkapseling van bioactieve moleculen