Methodenartikel

OP-IVM: In vitro rijping combineren na oöcyten ophalen met gynaecologische chirurgie

4.1K weergaven

⸱

DOI:

10.3791/61647

⸱

9 mei 2021

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Center for Reproductive Medicine, Department of Obstetrics and Gynecology, Peking University Third Hospital, 2National Clinical Research Center for Obstetrics and Gynecology, 3Key Laboratory of Assisted Reproduction, Ministry of Education, 4Beijing Key Laboratory of Reproductive Endocrinology and Assisted Reproduction, 5Research Units of Comprehensive Diagnosis and Treatment of Oocyte Maturation Arrest, Chinese Academy of Medical Sciences

* These authors contributed equally

In dit artikel

Erratum-melding

Important: There has been an erratum issued for this article. View Erratum Notice

Samenvatting

In vitro rijping (IVM) vóór gynaecologische operatie (OP-IVM) combineert IVM na het ophalen van eicellen met routinematige gynaecologische chirurgie en dient als een uitbreiding van conventionele IVM-toepassingen voor vruchtbaarheidsbehoud.

Samenvatting

Het gebruik van in vitro rijping (IVM) vóór gynaecologische chirurgie (OP-IVM) is een uitbreiding van conventionele IVM die IVM na het ophalen van eicellen combineert met routinematige gynaecologische chirurgie. OP-IVM is geschikt voor patiënten die een goedaardige gynaecologische operatie ondergaan en die behoefte hebben aan vruchtbaarheidsbehoud (FP) of onvruchtbaarheidsbehandelingen zoals in-vitrofertilisatie en embryotransfer (IVF-ET). In de operatiekamer worden patiënten die een goedaardige gynaecologische operatie ondergaan eerst verdoofd en krijgen ze een echogeleide onvolgroeide follikelaspiratie (IMFA) behandeling. Terwijl de daaropvolgende gynaecologische chirurgie wordt uitgevoerd, worden de cumulus-oöcytencomplexen (COC's) onderzocht en worden de onrijpe COC's overgebracht naar het IVM-medium en gedurende 28-32 uur in het IVF-laboratorium gekweekt. Na beoordeling zullen volwassen eicellen in het MII-stadium worden geselecteerd en gecryopreserveerd in vloeibare stikstof voor FP of bevrucht door intracytoplasmatische sperma-injectie (ICSI) voor IVF-ET. Door IVM te combineren met gynaecologische chirurgie, kunnen onrijpe eicellen die zouden zijn weggegooid, worden opgeslagen en gebruikt voor geassisteerde voortplantingstechnologie (ART). De procedure, betekenis en kritische aspecten van OP-IVM worden in dit artikel beschreven.

Inleiding

IVM is een ART waarbij menselijke onrijpe eicellen in vitro worden gekweekt tot rijping voor IVF-ET of FP. Bij IVM worden ovulatie-inductiemedicijnen niet gebruikt, waardoor pijn, financiële lasten en complicaties zoals ovarieel hyperstimulatiesyndroom (OHSS)1,2wordenverminderd. Daarnaast is IVM bijzonder geschikt voor de FP van kankerpatiënten en de onvruchtbaarheidsbehandeling van hormoongevoelige patiënten die mogelijk niet in staat zijn of geen tijd hebben om ovulatie-inductietherapie te ontvangen3. Daarom, hoewel het aantal opgehaalde eicellen, het klinische zwangerschapspercentage (CPR) en het levend geboortecijfer (LBR) lager zijn dan die van IVF4,5,heeft IVM zijn eigen unieke voordelen.

Onvruchtbare patiënten met endometriumlaesies, hydrosalpinx of ovariumcysten hebben meestal gynaecologische chirurgie vóór art-behandeling en hun eicellen zijn meestal onvolgroeid. OP-IVM maakt gebruik van geleide transvaginale echografie om de onrijpe eicellen op te halen en ze in vitro te laten groeien tot rijping voor IVF-ET of FP. OP-IVM combineert IVM na het ophalen van eicellen en gynaecologische chirurgie, waardoor complicaties die vaak voorkomen bij gecontroleerde ovariële hyperstimulatiecycli worden verminderd en tijd en geld wordt bespaard. Voor vruchtbare patiënten kan OP-IVM dienen als een "vruchtbaarheidsverzekering" tijdens het ondergaan van routinematige gynaecologische chirurgie.

Bovendien kan schade veroorzaakt door gynaecologische operaties, zoals elektrocauterie6,7 en resectie van eierstoktumoren, worden verminderd door het ophalen van eicellen vóór gynaecologische chirurgie. Daarom kan OP-IVM, in vergelijking met routinematige gynaecologische chirurgie, het aantal operaties tijdens de onvruchtbaarheidsbehandeling verminderen en het verlies van functionele eicellen tijdens ovariële chirurgie voorkomen.

Een eerdere studie heeft aangetoond dat de aanvullende procedure van het ophalen van eicellen de chirurgische complicaties en ongunstige zwangerschapsuitkomsten niet zou verhogen, noch het ziekenhuisverblijf zou verlengen8. Sommige patiënten zijn levend bevallen via OP-IVM8, wat de haalbaarheid van deze methode aangeeft. Dit artikel beschrijft de kenmerken van patiënten die baat kunnen hebben bij OP-IVM, evenals procedures en kritieke punten van OP-IVM en bespreekt de evaluatie van de volwassenheid van menselijke eicellen.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Protocol

OPMERKING: Studies met betrekking tot de OP-IVM-methode zijn goedgekeurd door de institutionele beoordelingsraad (IRB) van het Peking University Third Hospital en de Ethische Commissie van de Universiteit van Peking (2014S2004). Een samenvatting van OP-IVM is weergegeven in figuur 1. De stapsgewijze procedure wordt in de volgende sectie geïntroduceerd.

1. Introductie van OP-IVM bij geschikte patiënten

  1. Identificeer potentiële patiënten die baat kunnen hebben bij OP-IVM, zoals beschreven in stap 1.1.1-1.1.3.:
    1. Polycysteus ovariumsyndroom (PCOS) patiënten met clomifeenresistentie die laparoscopische ovariële boorchirurgie nodig hebben.
    2. Onvruchtbare patiënten die goedaardige gynaecologische operaties nodig hebben, zoals hysteroscopische myomectomie, polypectomie, transcervicale resectie van septum en laparoscopische tubale chirurgie en oophorocystectomie, vóór ART-behandeling.
    3. Patiënten met kanker of hematologische aandoeningen die chemoradiotherapie of radiotherapie krijgen.

2. Geïnformeerde toestemming

  1. Geef volledige informatie aan patiënten, inclusief waarom OP-IVM nuttig kan zijn, de procedure, het gebruik van IVM-eicellen (IVF-ET of cryopreservatie), geschatte CPR's en BPR's en mogelijke complicaties. Vraag patiënten om geïnformeerde toestemming te geven door het toestemmingsformulier te ondertekenen.

3. Bereid etiketten en IVM-eicelmedium voor

  1. Druk identificatielabels (ID) af met de naam en data van de patiënt voor kweekschotels en tubes.
  2. Voeg 0,5 ml IVM-medium aangevuld met 0,075 IE / ml follikelstimulerend hormoon (FSH) en 0,075 IE / ml luteïniserend hormoon (LH) toe aan elke put van een 4-well plaat. Bedek het medium met olie.
    OPMERKING: Voer al deze procedures uit in laminaire flow clean banken.
  3. Verwarm de 4-putsplaat ten minste 6 uur voor gebruik met IVM-eicelmedium bij 37 °C in bevochtigde lucht met 5% CO2 en 5% O2.

4. Anesthesie toedienen in een operatiekamer

  1. Controleer de naam van de patiënt voordat u anesthesie toedient.
  2. Verdoving de patiënt intraveneus door een anesthesist.

5. Voer het ophalen van eicellen uit

  1. Tag de labels met naam, datum en ID op de kweekschotels en tubes.
  2. Plaats de patiënt in de blaaslithotomiepositie; desinfecteer, drapeer en scrub de vagina voortdurend met warme zoutoplossing.
  3. Plaats de ultrasone sonde in de vagina; scan en registreer het aantal follikels in beide eierstokken. Zoek de locatie die het dichtst bij de eierstok ligt als de punctieplaats en vermijd de darm, blaas en grote bloedvaten.
  4. Aspiraat folliculaire vloeistof.
    1. Was de naald met een pH-stabiel hanteringsmedium voordat u doorprikt (zie Tabel met materialen).
    2. Injecteer de 19 G, single-lumen aspiratienaald in de eierstokken onder begeleiding van echografie.
    3. Prik grotere follikels met duidelijke grenzen het dichtst bij de sonde. Injecteer in een lage positie snel de spoeloplossing aangevuld met 25 U/ml heparine. Aspirateer folliculaire vloeistof met de naald onder een druk van 80-90 mmHg, draai de naald iets om zoveel mogelijk folliculaire vloeistof op te zuigen. Prik andere follikels van de nabije tot verre kant op dit vlak.
      OPMERKING: Tijdens het aspiraties zal folliculaire vloeistof die eicellen bevat onder negatieve druk in een steriele reageerbuis van 10 ml stromen. Heparine kan de viscositeit van de folliculaire vloeistof verminderen om het aspiratieproces te vergemakkelijken.
    4. Verwijder de naald uit de eierstok (houd de naald in de vaginale wand). Pas de richting van de ultrasone sonde aan en prik de resterende follikels op andere vlakken. Probeer alle follikels op te zuigen met een diameter van ~ 5-9 mm.
      OPMERKING: Pas de positie van de sonde aan om deze te allen tijde het dichtst bij de eierstokken te houden. Druk op de vaginale fornix met de juiste kracht om letsel en bloedingen te verminderen.
    5. Trek de naald eruit na het afwerken in één eierstok, was de naald met het behandelingsmedium en prik de andere kant met dezelfde methode.
      OPMERKING: Volledige follikelaspiratie binnen 25-30 min.
  5. Breng de folliculaire vloeistof binnen enkele minuten na bevestiging van de naam en ID van de patiënt over van de operatiekamer naar het IVF-laboratorium.
    OPMERKING: Breng aangezogen folliculaire vloeistof zo snel mogelijk over naar de IVF-laboratoriumbank om coagulatie te voorkomen.
  6. Detecteer actieve bloeding in de bekkenholte met B-modus echografie na het doorboren van alle follikels. Plaats een speculum en wijs de punt op de achterste fornix om actieve bloedingen op de punctieplaats te detecteren.
    OPMERKING: Er mag geen actieve bloeding worden waargenomen op de vaginale punctieplaats als de eierstokpositie normaal is en het ophalen van de eicellen zorgvuldig wordt uitgevoerd. Voor lichte bloedingen die zelfs na compressie aanhouden, houdt u een steriel gaaskompres in de vagina gedurende 2-4 uur. Controleer overmatig bloeden uit kleine slagaders met behulp van klemmen met vasculaire tang gedurende 2-4 uur. Bloedingen in de bekkenholte of eierstok, die zelden voorkomen, moeten worden gecontroleerd door elektrocoagulatie door laparoscopische chirurgie.

6. Gynaecologische chirurgie

  1. Op basis van de behoefte en conditie van de patiënt, voer een geschikte gynaecologische operatie uit na het ophalen van eicellen.
    1. Voer laparoscopische ovariële boorchirurgie uit voor patiënten met polycysteus ovariumsyndroom (PCOS) met clomifeenresistentie.
    2. Voer goedaardige gynaecologische chirurgie uit voor onvruchtbare patiënten vóór art-behandeling, zoals hysteroscopische myomectomie, polypectomie, transcervicale resectie van septum en laparoscopische tubale chirurgie en oophorocystectomie.
    3. Voer ovariëctomie uit voor vruchtbaarheid cryopreservatie van patiënten met kanker of hematologische aandoeningen die chemoradiotherapie moeten krijgen.
      OPMERKING: Deze gynaecologische operaties zijn basale en gestandaardiseerde klinische operaties. Operationele richtlijnen in verschillende landen en ziekenhuizen moeten relatief vergelijkbaar zijn.

7. Voer IVM uit

OPMERKING: Voer het hele proces van IVM uit op een homotherme flat van 37 °C.

  1. Filtreer de aangezogen follikelvloeistof met een nylon celzeef van 70 μm. Spoel de kweekbuis en zeef herhaaldelijk met voorverwarmd pH-stabiel hanteringsmedium. Zorg ervoor dat alle onrijpe COC's volledig worden overgebracht naar het kweekgerecht. Verzamel de gefilterde vloeistof, spoel en kweek in een petrischaaltje van 100 x 15 mm.
  2. Onderzoek de COC's (Figuur 2) onder de stereoscoop met 40x vergroting. Breng de onvolwassenen snel over in een voorverwarmd IVM-eicelmedium.
    OPMERKING: Kies een geschikte vergroting, afhankelijk van de gewoonte van de operator.
  3. Noteer het aantal gekweekte onvolgroeide COC's.
  4. Informeer de patiënt over het aantal gekweekte COC's. Bespreek de verzameling sperma met de patiënten en hun partners. Voer sperma-extractie uit volgens de normale procedure.
  5. Kweek de onrijpe COC's bij 37 °C in bevochtigde lucht met 5% CO2 en 5% O2 gedurende 28-32 uur.
  6. Beoordeel de rijpheid van de eicel.
    1. Denudeer de cumuluscellen door herhaaldelijk te pipetteren met behulp van een glazen Pasteur pipet onder de stereoscoop met 40x vergroting. Onderzoek de extrusie van het polaire lichaam (PB) om het ontwikkelingsstadium van de eicellen te identificeren. Zie figuur 2 voor representatieve beelden van eicellen in COC's, metafa II (MII), metafafase I (MI) en germinale blaasjes (GVs) met duidelijke morfologische kenmerken.
      OPMERKING: Gebruik een verticale vlam (bijvoorbeeld van een Bunsen-brander) om de diameter van de glazen Pasteur-pipet aan te passen aan de grootte van een eicel.
    2. Tel MII-eicellen en noteer het aantal.
    3. Kies rijpe eicellen voor IVF of vitrificatie.
      OPMERKING: Verzamel sperma op de dag dat de eicellen rijpen voor IVF, maar niet voor vitrificatie van eicellen.
    4. Kweek de onrijpe eicellen in het GV- en MI-stadium in het oorspronkelijke IVM-kweekmedium met cumuluscellen gedurende nog eens 10-14 uur. Herhaal stap 7.6.2-7.6.3.

8. Voer ICSI- of eicelverglazing uit

  1. Volg de standaardprocedure van het voortplantingscentrum8.

9. Kweek embryo's en voer cryopreservatie van embryo's uit

  1. Volg de standaardprocedure van het voortplantingscentrum8.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Resultaten

Tot december 2019 werd OP-IVM gebruikt voor vruchtbaarheidsbehoud van 274 patiënten. Embryologische en reproductieve uitkomsten van 158 patiënten tussen 2014 en 2016 werden gepubliceerd in een eerder artikel8. Het volgende voorbeeld bespreekt de procedure die is gevolgd voor een PCOS-patiënt die IN 2016 OP-IVM kreeg. De patiënt is een 28-jarige gediagnosticeerd met primaire onvruchtbaarheid, linker adnexale cyste en PCOS. Zij kreeg laparoscopische cystectomie en OP...

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Discussie

De OP-IVM-methode die in dit artikel wordt beschreven, strekt zich uit tot conventionele IVM-toepassingen en combineert IVM na het ophalen van eicellen met routinematige gynaecologische chirurgie. Eicellen die verloren zouden zijn gegaan in de gynaecologische chirurgie kunnen nu worden gebruikt voor IVF-ET of FP zonder extra chirurgische risico's. OP-IVM werd voor het eerst gebruikt om eicellen op te halen vóór ovariële boringen bij PCOS-patiënten. De toepassing ervan breidde zich al snel uit naar onvruchtbare patiënten ...

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Openbaarmakingen

De auteurs hebben niets te onthullen.

Dankbetuigingen

Dit werk werd ondersteund door subsidies van het China National Key R & D Program (nr. 2017YFC1002000, 2018YFC1004001, 2019YFA0801400), de National Science Foundation of China (nr. 81571386, 81730038), het CAMS Innovation Fund for Medical Sciences (2019-I2M-5-001) en het Special Research Project of Chinese Capital Health Development (2018-2-4095).

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Materialen

Lijst van materialen gebruikt in dit artikel
NaamBedrijfCatalogusnummerOpmerkingen
19 G single-lumen aspiratieneldenCook, AustraliëK-OPS-7035-REH-ET
4-well plateCorning
70 μm nylon celfilterFalcon, USA352350
CO2 IncubatorThermo
KweekolieVitrolife, Zweden10029, OVOIL Stap 3.2.
FSH & LHFerring Reproductive Health, DuitslandMENOPUR®
Glas Pasteur-pipetHilgenberg GmbH, Duitsland3154102-26
G-MOPS mediumpH-stabiele handelingsmedium voor het wassen van de naald voor het doorprikken
IVM mediumOrigio, DenemarkenART-1600-B
Laminair Flow Clean BenchesESCO
PetrischaalThermo Fisher Scientific, Denemarken263991
pH stabiele handelingsmedia ontworpen om de handeling en manipulatie van oocyten en embryo's buiten de incubator te ondersteunenVitrolife, Zweden10130, G-MOPS PLUSStap 7.1.
SpoeloplossingCook, AustraliëK-SIFB-100
StereoscoopNikon

Referenties

  1. Ho, V. N. A., Braam, S. C., Pham, T. D., Mol, B. W., Vuong, L. N. The effectiveness and safety of in vitro maturation of oocytes versus in vitro fertilization in women with a high antral follicle count. Human Reproduction. 34 (6), 1055-1064 (2019).
  2. Yang, Z. Y., Chian, R. C. Development of in vitro maturation techniques for clinical applications. Fertility and Sterility. 108 (4), 577-584 (2017).
  3. Hatirnaz, S., et al. Oocyte in vitro maturation: A sytematic review. Turkish Journal of Obstetrics and Gynecology. 15 (2), 112-125 (2018).
  4. Gremeau, A. S., et al. In vitro maturation or in vitro fertilization for women with polycystic ovaries? A case-control study of 194 treatment cycles. Fertility and Sterility. 98 (2), 355-360 (2012).
  5. Ho, V. N. A., Braam, S. C., Pham, T. D., Mol, B. W., Vuong, L. N. The effectiveness and safety of in vitro maturation of oocytes versus in vitro fertilization in women with a high antral follicle count. Human Reproduction. 34 (6), 1055-1064 (2019).
  6. Sahin, C., et al. Which should be the preferred technique during laparoscopic ovarian cystectomy. Reproductive Sciences. 24 (3), 393-399 (2017).
  7. Xiao, J., et al. Impact of hemostatic methods on ovarian reserve and fertility in laparoscopic ovarian cystectomy. Experimental and Therapeutic. 17 (4), 2689-2693 (2019).
  8. Song, X. -L., et al. Enhancing the scope of in vitro maturation for fertility preservation: transvaginal retrieval of immature oocytes during endoscopic gynaecological procedures. Human Reproduction. 35 (4), 837-846 (2020).
  9. Magnusson, Å, Källen, K., Thurin-Kjellberg, A., Bergh, C. The number of oocytes retrieved during IVF: a balance between efficacy and safety. Human Reproduction. 33 (1), 58-64 (2018).
  10. Larose, H., et al. Gametogenesis: A journey from inception to conception. Current Topics in Developmental Biology. Wellik, D. M., et al. 132, Academic Press. 257-310 (2019).
  11. Broer, S. L., Broekmans, F. J. M., Laven, J. S. E., Fauser, B. C. J. M. Anti-Müllerian hormone: ovarian reserve testing and its potential clinical implications. Human Reproduction Update. 20 (5), 688-701 (2014).
  12. Arce, J. C., La Marca, A., Mirner Klein, B., Nyboe Andersen, A., Fleming, R. Antimüllerian hormone in gonadotropin releasing-hormone antagonist cycles: prediction of ovarian response and cumulative treatment outcome in good-prognosis patients. Fertility and Sterility. 99 (6), 1644-1653 (2013).
  13. Katayama, K. P., et al. Ultrasound-guided transvaginal needle aspiration of follicles for in vitro fertilization. Obstetrics and Gynecology. 72 (2), 271-274 (1988).
  14. Dellenbach, P., et al. Transvaginal sonographically controlled follicle puncture for oocyte retrieval. Fertility and Sterility. 44 (5), 656-662 (1985).
  15. Hirata, T., et al. Concomitant ovarian drilling and oocyte retrieval by laparoendoscopic single-site surgery led to live birth using in vitro maturation of oocyte and transfer of frozen-thawed blastocyst in woman with polycystic ovary syndrome. Journal of Obstetrics and Gynaecology Research. 40 (5), 1431-1435 (2014).
  16. Deutinger, J., et al. Follicular aspiration for in vitro fertilization: sonographically guided transvaginal versus laparoscopic approach. European Journal of Obstetrics, Gynecology, and Reproductive Biology. 26 (2), 127-133 (1987).
  17. Tanbo, T., Henriksen, T., Magnus, O., Abyholm, T. Oocyte retrieval in an IVF program. A comparison of laparoscopic and transvaginal ultrasound-guided follicular puncture. Acta Obstetricia et Gynecologica Scandinavica. 67 (3), 243-246 (1988).
  18. Nagy, Z. P., et al. Pregnancy and birth after intracytoplasmic sperm injection of in vitro matured germinal-vesicle stage oocytes: case report. Fertility and Sterility. 65 (5), 1047-1050 (1996).
  19. Söderström-Anttila, V., Mäkinen, S., Tuuri, T., Suikkari, A. -M. Favourable pregnancy results with insemination of in vitro matured oocytes from unstimulated patients. Human Reproduction. 20 (6), 1534-1540 (2005).
  20. Hwang, J. L., Lin, Y. H., Tsai, Y. L. In vitro maturation and fertilization of immature oocytes: a comparative study of fertilization techniques. Journal of Assisted Reproduction and Genetics. 17 (1), 39-43 (2000).
  21. Walls, M., Junk, S., Ryan, J. P., Hart, R. IVF versus ICSI for the fertilization of in-vitro matured human oocytes. Reproductive Biomedicine Online. 25 (6), 603-607 (2012).
  22. Park, J. H., Jee, B. C., Kim, S. H. Comparison of normal and abnormal fertilization of in vitro-matured human oocyte according to insemination method. Journal of Obstetrics and Gynaecology Research. 42 (4), 417-421 (2016).
  23. Ho, V. N. A., Pham, T. D., Le, A. H., Ho, T. M., Vuong, L. N. Live birth rate after human chorionic gonadotropin priming in vitro maturation in women with polycystic ovary syndrome. Journal of Ovarian Research. 11 (1), 70(2018).
  24. Zheng, X., et al. Effect of hCG priming on embryonic development of immature oocytes collected from unstimulated women with polycystic ovarian syndrome. Reproductive Biology and Endocrinology. 10, 40(2012).
  25. Tannus, S., et al. Predictive factors for live birth after in vitro maturation of oocytes in women with polycystic ovary syndrome. Archives of Gynecology and Obstetrics. 297 (1), 199-204 (2018).
  26. Cohen, Y., et al. Decreased pregnancy and live birth rates after vitrification of in vitro matured oocytes. Journal of Assisted Reproduction and Genetics. 35 (9), 1683-1689 (2018).
  27. Yazdanpanah, F., Khalili, M. A., Eftekhar, M., Karimi, H. The effect of vitrification on maturation and viability capacities of immature human oocytes. Archives of Gynecology and Obstetrics. 288 (2), 439-444 (2013).

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Herprints en machtigingen

Toestemming aanvragen om de tekst of afbeeldingen van dit JoVE-artikel te hergebruiken

Toestemming aanvragen

Erratum


Formal Correction: Erratum: OP-IVM: Combining In vitro Maturation after Oocyte Retrieval with Gynecological Surgery
Posted by JoVE Editors on 6/26/2023. Citeable Link.

An erratum was issued for: OP-IVM: Combining In vitro Maturation after Oocyte Retrieval with Gynecological Surgery. The Protocol and Representative Results sections were updated.

Step 3.2 of the Protocol was updated from:

Add 0.5 mL of IVM medium supplemented with 0.075 IU/mL of follicle-stimulating hormone (FSH) and 0.075 IU/mL of luteinizing hormone (LH) to each well of a 4-well plate. Cover the medium with oil.

to:

Add 0.5 mL of IVM medium supplemented with 0.75 IU/mL of follicle-stimulating hormone (FSH) and 0.75 IU/mL of luteinizing hormone (LH) to each well of a 4-well plate. Cover the medium with oil.

The legend for Figure 2 was updated from:

Figure 2: Morphological characteristics of representative images of oocytes. (A) COCs, (B) MII, (C) MI, (D) GV stage. Abbreviations: COCs = cumulus-oocyte complexes; GV = germinal vesicle; MI = metaphase I; MII = metaphase II.

to:

Figure 2: Morphological characteristics of representative images of oocytes. (A) COCs, (B) GV, (C) MI, (D) MII stage. Abbreviations: COCs = cumulus-oocyte complexes; GV = germinal vesicle; MI = metaphase I; MII = metaphase II.

Trefwoorden

Aspiratie van onrijpe follikelscumulus oocytencomplexIVM mediumintracytoplasmische sperma injectiebehoud van fertiliteitgeassisteerde voortplantingsbehandelingechogeleide aspiratie

Gerelateerde artikelen