Een abonnement op JoVE is vereist om deze inhoud te bekijken. Log in of start vandaag met uw gratis proefperiode.

Methodenartikel

Een Murine-model van ischemisch netvliesletsel veroorzaakt door voorbijgaande bilaterale gemeenschappelijke halsslagader Occlusie

7.4K weergaven

⸱

DOI:

10.3791/61865

⸱

12 november 2020

 ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Laboratory of Photobiology, Keio University School of Medicine, 2Department of Ophthalmology, Keio University School of Medicine, 3Animal eye care, Tokyo Animal Eye Clinic, 4Tsubota Laboratory, Inc.

* These authors contributed equally

In dit artikel

Samenvatting

Hier beschrijven we een muismodel van retinale ischemie door voorbijgaande bilaterale gemeenschappelijke halsslagader occlusie met behulp van eenvoudige hechtingen en een klem. Dit model kan nuttig zijn voor het begrijpen van de pathologische mechanismen van retinale ischemie veroorzaakt door cardiovasculaire afwijkingen.

Samenvatting

Diverse vasculaire ziekten zoals diabetische retinopathie, occlusie van retinale aderen of slagaders en oculaire ischemische syndroom kunnen leiden tot retinale ischemie. Om pathologische mechanismen van retinale ischemie te onderzoeken, moeten relevante experimentele modellen worden ontwikkeld. Anatomisch gezien is een hoofdbloedtoevoervat van het netvlies de oogslagader (OpA) en opA komt voort uit de interne halsslagader van de gemeenschappelijke halsslagader (CCA). Verstoring van CCA kan dus effectief retinale ischemie veroorzaken. Hier hebben we een muismodel van retinale ischemie vastgesteld door voorbijgaande bilaterale gemeenschappelijke halsslagader occlusie (tBCCAO) om de juiste CCA te binden met 6-0 zijden hechtingen en om de linker CCA gedurende 2 seconden tijdelijk te sluiten via een klem, en toonden aan dat tBCCAO acute retinale ischemie kon veroorzaken die leidt tot netvliesdisfunctie. De huidige methode vermindert de afhankelijkheid van chirurgische instrumenten door alleen chirurgische naalden en een klem te gebruiken, verkort de occlusietijd om onverwachte diersterfte te minimaliseren, wat vaak wordt gezien in muismodellen van occlusie van de middelste hersenslagader, en behoudt de reproduceerbaarheid van veelvoorkomende retinale ischemische bevindingen. Het model kan worden gebruikt om de pathofysiologie van ischemische retinopathieën bij muizen te onderzoeken en verder kan worden gebruikt voor in vivo geneesmiddelenscreening.

Inleiding

Het netvlies is een neurosensorisch weefsel voor visuele functie. Aangezien een aanzienlijke hoeveelheid zuurstof nodig is voor de visuele functie, staat het netvlies bekend als een van de hoogste zuurstofeisende weefsels in het lichaam1. Het netvlies is vatbaar voor vaatziekten omdat zuurstof via bloedvaten wordt geleverd. Verschillende soorten vasculaire ziekten, zoals diabetische retinopathie en retinale bloedvaten (aderen of slagaders) occlusie, kunnen retinale ischemie veroorzaken. Om pathologische mechanismen van retinale ischemie te onderzoeken, worden reproduceerbare en klinisch relevante experimentele modellen van retinale ischemie noodzakelijk geacht. Midden-cerebrale slagader occlusie (MCAO) door het inbrengen van een intraluminaal filament is de meest gebruikte methode voor de ontwikkeling van in vivo knaagdiermodellen van experimentele cerebrale ischemie2,3. Vanwege de nabijheid van de oogheelkundige slagader (OpA) tot MCA, worden MCAO-modellen ook tegelijkertijd gebruikt om de pathofysiologie van retinale ischemie4,5,6te begrijpen. Om cerebrale ischemie samen met retinale ischemie op te wekken, worden lange filamenten meestal ingebracht door incisie van de gemeenschappelijke halsslagader (CCA) of de externe halsslagader (ERK). Deze methoden zijn moeilijk uit te voeren, vereisen een lange tijd om de operatie te voltooien (meer dan 60 minuten voor één muis) en leiden tot hoge variabiliteiten in de resultaten na de operatie7. Het blijft belangrijk om een beter model te ontwikkelen om deze zorgen te verbeteren.

In deze studie gebruikten we eenvoudigweg korte voorbijgaande bilaterale CCA occlusie (tBCCAO) met naalden en een klem om retinale ischemie bij muizen op te wekken en analyseerden we typische resultaten van ischemische verwondingen in het netvlies. In deze video geven we een demonstratie van de tBCCAO-procedure.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Protocol

Alle hier beschreven methoden zijn goedgekeurd door de Institutional Animal Care and Use Committee (IACUC) van Keio University School of Medicine.

1. Voorbereiding van chirurgische instrumenten en dieren

  1. Autoclaaf chirurgische instrumenten en bewaar ze in 70% ethylalcohol. Maak vóór elke nieuwe chirurgische ingreep zorgvuldig chirurgische instrumenten schoon met 70% ethylalcohol.
  2. Bereid mannelijke BALB/cAJc1 muizen (6 weken oud, 26-28 kg) voor in een specifiek ziekteverwekkervrije (SPF) kamer om steriele omstandigheden te behouden voor, tijdens en na de operatie.

2. Voorbijgaande bilaterale gemeenschappelijke halsslagader occlusie (tBCCAO)

  1. Plaats een muis onder narcose via intraperitoneale injectie met een combinatie van midazolam (40 μg/100 μL), medetomidine (7,5 μg/100 μL) en butorphanoltartraat (50 μg/100 μL), "MMB" genoemd, zoals eerder beschreven8,9. Houd de rughuiden van de muis vast om te voorkomen dat de muis zijn ogen stoot totdat de muis volledig is verdoofd.
    1. Beoordeel de diepte van de anesthesie door de muisteen te knijpen totdat deze geen reactie heeft, waarvan de methode vaak wordt gebruikt voor het controleren van volledige anesthesie10.
      OPMERKING: Over het algemeen is minder dan 5 minuten nodig om muizen in slaap te laten vallen. Goede recepten voor algemene anesthesie kunnen per instelling verschillen.
  2. Breng één druppel van 0,1% gezuiverde natriumhyaluronate oogdruppeloplossing aan op de ogen om droogheid op de ogen onder narcose te voorkomen.
  3. Plaats de muis op zijn rug en bevestig de poten van de muis met plakband.
  4. Desinfecteer het nekgebied van de muis met 70% ethylalcohol vóór de operatie.
    OPMERKING: Extra knippen van de vacht werd niet uitgevoerd omdat dit daaropvolgende huidontsteking kan veroorzaken11,12.
  5. Voer sagittale incisie van de nek uit met een mes (figuur 1).
    OPMERKING: Er moet een incisie worden gemaakt op de middellijn tussen de nek, het borstbeen en de luchtpijp.
  6. Scheid beide speekselklieren zorgvuldig met behulp van twee tangen en mobiliseer ze om de onderliggende CCA's te visualiseren.
  7. Isoleer de juiste CCA zorgvuldig van de respectieve vagale zenuwen en bijbehorende aderen zonder hun structuren te beschadigen, en plaats twee 6-0 zijden hechtingen onder de CCA. Bind de twee banden stevig vast om de bloedstroom te blokkeren (figuur 1).
    OPMERKING: Tijdens de procedure kunnen kleine aderen beschadigd raken. Als er bloedingen worden waargenomen, is afvegen nodig om de CCA's duidelijk te visualiseren.
  8. Zoek de linker CCA voorzichtig van de respectievelijke vagale zenuwen en bijbehorende aderen zonder hun structuren te beschadigen, en sluit de linker CCA gedurende 2 seconden af met een klem (figuur 1).
    OPMERKING: Een 6-0 zijden hechtnaald moet onder de linker CCA worden geplaatst om een plaats voor klemmen te markeren.
  9. Na heropening van de linker CCA hechten hechtwonden van de nek door een 6-0 zijden hechting en brengen een slok antibioticum (50 μL) aan op de nek om bacteriële infectie te remmen.
    OPMERKING: Verwijder voorzichtig een klem om beschadiging van de slagaderlijke wand te voorkomen bij het heropenen van de linker CCA.
  10. Injecteer 0,75 mg/kg atipamezolehydrochloride intraperitoneaal aan de muis om de muis te helpen snel hersteld te worden van diepe anesthesie. Breng de muis terug naar een muizenkooi met voorverwarmde pads.
    OPMERKING: Laat de muis niet onbeheerd achter totdat de muis weer voldoende bij bewustzijn is om de strenge ligfiets te behouden.
  11. Injecteer 0,4 mg/kg butorphanoltartraat aan de muis voor de behandeling van pijn wanneer de muis wakker wordt.
    OPMERKING: Het protocol kan hier worden gepauzeerd. Als eerste hint voor succesvolle tBCCAO kan het hangen van het ooglid van de muis worden waargenomen (figuur 2).
  12. Injecteer voor euthanasie 3x MMB-mengsel aan de muizen en offer ze op voor experimenten.

3. Algemene waarnemingen (overlevingspercentages en hangend ooglid)

  1. Controleer na de operatie de overlevingskansen op alle doodsoorzaken op dag 0 (na de operatie), 1, 3 en 7.
  2. Beoordeel het hangen van het ooglid met een 4-punts beoordelingsschaal: 1 = geen hangende, 2 = milde hangende (~50%), 3 = ernstig hangen (meer dan 50%), en 4 = ernstig hangen met ooguitvloeiing.

4. Retinale bloedperfusie

  1. Injecteer 200 μL FITC-dextran (25 mg/ml) in de linkerventrikel van de muis, die vaak wordt gebruikt voor de observatie van bloedperfusie in de retinale vaten van de muis13,14.
  2. 2 minuten na circulatie, enucleate de ogen en fixeer in 4% paraformaldehyde gedurende 1 uur. Het netvlies werd zorgvuldig verkregen en vlak gemonteerd, zoals eerder beschreven15, en onderzocht via een fluorescentiemicroscoop.
  3. Maak foto's van de retinale hele mounts bij 4x vergroting en voeg samen in een single met behulp van een merge analyzer, eerder beschreven16.
  4. Meet de doordrenkte gebieden via een scheepsanalysetool in NIH Fiji/ImageJ-software.

5. Westelijke vlek

  1. 3 en 6 uur na tBCCAO, verkrijg de ogen van muizen en breng onmiddellijk over naar een Petrischaal met koude PBS om het netvlies te isoleren.
  2. Voer na isolatie van het netvlies western blotting uit, zoals eerder beschreven9.
  3. Incubeer met antilichamen voor hypoxie-induceerbare factor-1α (HIF-1α; een algemene hypoxiemarker) en voor β-Actin (een interne belastingsregeling) 's nachts gevolgd door incubatie van HRP-geconjugeerde secundaire antilichamen. Visualiseer de signalen via chemiluminescentie.

6. Kwantitatieve PCR (qPCR)

  1. 6, 12 en 24 uur na tBCCAO, het verkregen netvlies verwerken voor qPCR, zoals eerder beschreven17.
  2. Voer qPCR uit via een real-time PCR-systeem. De gebruikte primers staan vermeld in tabel 1. Bereken vouwveranderingen tussen niveaus van verschillende transcripties volgens de ΔΔCT-methode.

7. Immunohistochemie (IHC)

  1. 3 dagen na tBCCAO, verkrijg de ogen van muizen en sluit in paraffine.
  2. Snijd de paraffine-ingebedde ogen door een microtome om de oogsecties te verkrijgen.
  3. De-paraffiniseren en beitsen van de oogsecties van 5 μm dikte zoals eerder beschreven13.
  4. Incubeer met een antilichaam voor gliafibrillair zuur eiwit (GFAP; een betrouwbare marker voor astrocyten en Müller-cellen in het netvlies) 's nachts gevolgd door incubatie van Alexa Fluor 555-geconjugeerd secundair antilichaam.
  5. Gebruik DAPI (4′,6-diamidino-2-fenylindole) voor het beitsen van de kern in het netvlies. Visualiseer signalen via een fluorescentiemicroscoop.
  6. Beoordeel de morfologiescore met een 4-punts ratingschaal, zoals eerder beschreven13,18: 0 = geen signaal, 1 = weinig positieve glia-eindvoeten in de ganglioncellaag (GCL), 2 = weinig gelabelde processen die van GCL tot de buitenste kernlaag (ONL) reiken, en 3 = de meest geëtiketteerde processen die van GCL tot ONL reiken.

8. Elektroretinografie (ERG)

  1. 3 en 7 dagen na tBCCAO, voer ERG uit met behulp van een Ganzfeld-koepel, acquisitiesysteem en LED-stimulatoren, zoals eerder beschreven9.
  2. Na donkere aanpassing 's nachts, verdoof muizen met een combinatie van MMB onder schemerig rood licht.
  3. Gebruik een gemengde oplossing van 0,5% tropicamide en 0,5% fenylephrine om de pupillen te verwijden.
  4. Plaats de actieve elektroden op de contactlens en plaats de referentieelektrode in de mond.
  5. Verkrijg ERG-reacties van beide ogen van elk dier.
  6. Leg scotopische reacties vast onder donkere aanpassing met verschillende stimuli.
  7. Meet de amplitudes van een golf van de basislijn tot het laagste punt van een golf.
  8. Meet de amplitudes van b-wave van het laagste punt van een golf tot de piek van b-wave.
  9. Houd alle muizen warm tijdens de procedure met behulp van warmtekussens.

9. Optische coherentietomografie (OCT)

  1. 2 weken na tBCCAO, voer OCT uit met behulp van SD-OCT-systeem, zoals eerder gemeld8,9.
  2. Voor de meting, onderwerpen muizen aan mydriasis door een gemengde oplossing van 0,5% tropicamide en 0,5% fenylephrine, en aan algemene anesthesie door een mengsel van MMB.
  3. Verkrijg B-scanafbeeldingen van equatoriale segmenten van en-face scans.
  4. Onderzoek het netvlies op 0,2, 0,4 en 0,6 mm van het oogzenuwhoofd.
  5. Meet de netvliesdikte van de retinale zenuwvezellaag (NFL) tot het externe beperkende membraan (ELM) en beschouw het gemiddelde van de gemeten waarden als netvliesdikte van een individuele muis.
  6. Plot de resultaten als spindiagrammen.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Resultaten

Na systemische circulatie van FITC-dextran gedurende 2 minuten werden retinale vasculaturen van het linker- en rechtervlies in de schijnmuizen en tBCCAO-bediende muizen onderzocht (aanvullend figuur 1). FITC-dextran was volledig zichtbaar in beide netvliezen in de schijnmuizen en het linker netvlies in de tBCCAO-bediende muizen, terwijl het gedeeltelijk detecteerbaar was in het rechter netvlies in de tBCCAO-bediende muizen.

Na tBCCAO werd het hangen van het ooglid onderzocht (...

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Discussie

In de studie hebben we aangetoond dat tBCCAO, met behulp van eenvoudige hechtingen en een klem, retinale ischemie en bijbehorende netvliesdisfunctie kan induceren. Bovendien hebben we aangetoond dat ons huidige protocol voor de ontwikkeling van een muismodel van retinale ischemie gemakkelijker en sneller is in vergelijking met andere eerdere protocollen voor de ontwikkeling van retinale ischemische letselmodellen2,3,7.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Openbaarmakingen

De auteurs hebben niets te onthullen.

Dankbetuigingen

Dit werk werd ondersteund door Grants-in-Aid for Scientific Research (KAKENHI) (18K09424 aan Toshihide Kurihara en 20K18393 aan Yukihiro Miwa) van het Ministerie van Onderwijs, Cultuur, Sport, Wetenschap en Technologie (MEXT).

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Materialen

```html
Lijst van materialen gebruikt in dit artikel
NaamBedrijfCatalogusnummerOpmerkingen
Atipamezole hydrochlorideZenoaqAntisedanVoor anti-anesthesie
Applied Biosystems 7500 FastApplied Biosystems-Voor qPCR
Butorphanol tartrateMeiji Seika PharmaVetorphaleVoor anesthesie
BZ-II AnalyzerKEYENCE-Voor een beeldfusie
BALB/cAJc1CLEA-Muisstam
β-Actin (8H10D10) Mouse mAbCST3700Voor western blot
Clamp ForcepWorld Precision InstrumentsWPI 500451Voor chirurgie
Dumont forceps #5Fine Science Tools11251-10Voor chirurgie
DAPI solutionDojindo340-07971Voor IHC
Envisu SD-OCT systemLeicaR4310Voor OCT
FITC-dextranMerkFD2000SVoor retinale bloedperfusie
Fluorescence microscopeKEYENCEBZ-9000Voor fluorescentie detectie
Gatifloxacin hydrateSenju PharmaceuticalGachifuroVoor antibacteriële infectie
GFAP Monoclonal Antibody (2.2B10)Thermo13-0300Voor IHC
Heating padMarukanRH-200Voor chirurgie
HIF-1α (D1S7W) XP Rabbit mAbCST36169Voor western blot
ImageQuant LAS 4000 miniGE Healthcare-Voor chemiluminescentie
MidazolamSandoz K.KSANDOZVoor anesthesie
Microtome Tissue-Tek TEC 6Sakura-Voor sectioen
MedetomidineOrion CorporationDomitorVoor anesthesie
Needle holderHandayaHS-2307Voor chirurgie
PuRECMAYO Corporation-Voor ERG
ScissorFine Science Tools91460-11Voor chirurgie
Sodium hyaluronateSanten PharmaceuticalHyaleinVoor oogbevochtiging
Tropicamide/Penylephrine hydrochlorideSanten PharmaceuticalMydrin-PVoor mydriase
6-0 silk sutureNatsumeE12-60N2Voor chirurgie
```

Referenties

  1. Anderson, B. Ocular effects of changes in oxygen and carbon dioxide tension. Transactions of the American Ophthalmological Society. 66, 423-474 (1968).
  2. Ingberg, E., Dock, H., Theodorsson, E., Theodorsson, A., Ström, J. O. Method parameters' impact on mortality and variability in mouse stroke experiments: a meta-analysis. Scientific Reports. 6 (1), 21086(2016).
  3. Atochin, D. N., Clark, J., Demchenko, I. T., Moskowitz, M. A., Huang, P. L. Rapid Cerebral Ischemic Preconditioning in Mice Deficient in Endothelial and Neuronal Nitric Oxide Synthases. Stroke. 34 (5), 1299-1303 (2003).
  4. Allen, R. S., et al. Severity of middle cerebral artery occlusion determines retinal deficits in rats. Experimental Neurology. 254, 206-215 (2014).
  5. Steele, E. C., Guo, Q., Namura, S. Filamentous Middle Cerebral Artery Occlusion Causes Ischemic Damage to the Retina in Mice. Stroke. 39 (7), 2099-2104 (2008).
  6. Minhas, G., Morishita, R., Anand, A. Preclinical models to investigate retinal ischemia: advances and drawbacks. Frontiers in Neurology. 3, 75(2012).
  7. McColl, B. W., Carswell, H. V., McCulloch, J., Horsburgh, K. Extension of cerebral hypoperfusion and ischaemic pathology beyond MCA territory after intraluminal filament occlusion in C57Bl/6J mice. Brain Res. 997 (1), 15-23 (2004).
  8. Jiang, A. X., et al. Inducement and Evaluation of a Murine Model of Experimental Myopia. Journal of Visualized Experiments. (143), e58822(2019).
  9. Miwa, Y., et al. Pharmacological HIF inhibition prevents retinal neovascularization with improved visual function in a murine oxygen-induced retinopathy model. Neurochemistry International. 128, 21-31 (2019).
  10. Adams, S., Pacharinsak, C. Mouse Anesthesia and Analgesia. Current Protocols in Mouse Biology. 5 (1), 51-63 (2015).
  11. Speetzen, L. J., Endres, M., Kunz, A. Bilateral Common Carotid Artery Occlusion as an Adequate Preconditioning Stimulus to Induce Early Ischemic Tolerance to Focal Cerebral Ischemia. Journal of Visualized Experiments. (75), e4387(2013).
  12. Engel, O., Kolodziej, S., Dirnagl, U., Prinz, V. Modeling stroke in mice - middle cerebral artery occlusion with the filament model. Journal of Visualized Experiments. (47), e2423(2011).
  13. Lee, D., Kang, H., Yoon, K. Y., Chang, Y. Y., Song, H. B. A mouse model of retinal hypoperfusion injury induced by unilateral common carotid artery occlusion. Experimental Eye Research. 201, 108275(2020).
  14. Li, S., et al. Retro-orbital injection of FITC-dextran is an effective and economical method for observing mouse retinal vessels. Molecular Vision. 17, 3566-3573 (2011).
  15. Tual-Chalot, S., Allinson, K. R., Fruttiger, M., Arthur, H. M. Whole Mount Immunofluorescent Staining of the Neonatal Mouse Retina to Investigate Angiogenesis In vivo. Journal of Visualized Experiments. (77), e50546(2013).
  16. Lee, D., et al. A Fairy Chemical Suppresses Retinal Angiogenesis as a HIF Inhibitor. Biomolecules. 10 (10), (2020).
  17. Tomita, Y., et al. Pemafibrate Prevents Retinal Pathological Neovascularization by Increasing FGF21 Level in a Murine Oxygen-Induced Retinopathy Model. International Journal of Molecular Sciences. 20 (23), 5878(2019).
  18. Yamamoto, H., Schmidt-Kastner, R., Hamasaki, D. I., Yamamoto, H., Parel, J. M. Complex neurodegeneration in retina following moderate ischemia induced by bilateral common carotid artery occlusion in Wistar rats. Experimental Eye Research. 82 (5), 767-779 (2006).
  19. Cheng, L., Yu, H., Yan, N., Lai, K., Xiang, M. Hypoxia-Inducible Factor-1α Target Genes Contribute to Retinal Neuroprotection. Frontiers in Cellular Neuroscience. 11, 20(2017).
  20. Mole, D. R., et al. Genome-wide association of hypoxia-inducible factor (HIF)-1alpha and HIF-2alpha DNA binding with expression profiling of hypoxia-inducible transcripts. The Journal of Biological Chemistry. 284 (25), 16767-16775 (2009).
  21. Majmundar, A. J., Wong, W. J., Simon, M. C. Hypoxia-Inducible Factors and the Response to Hypoxic Stress. Molecular Cell. 40 (2), 294-309 (2010).
  22. Newman, E. A. Glial cell regulation of neuronal activity and blood flow in the retina by release of gliotransmitters. Philosophical Transactions of the Royal Society B: Biological Sciences. 370 (1672), (2015).
  23. Vecino, E., Rodriguez, F. D., Ruzafa, N., Pereiro, X., Sharma, S. C. Glia-neuron interactions in the mammalian retina. Progress in Retinal and Eye Research. 51, 1-40 (2016).
  24. Symonds, C. The Circle of Willis. British Medical Journal. 1 (4906), 119(1955).
  25. Lo, W. B., Ellis, H. The circle before willis: a historical account of the intracranial anastomosis. Neurosurgery. 66 (1), 7-18 (2010).
  26. Yang, G., et al. C57BL/6 strain is most susceptible to cerebral ischemia following bilateral common carotid occlusion among seven mouse strains: selective neuronal death in the murine transient forebrain ischemia. Brain Research. 752 (1), 209-218 (1997).
  27. Farkas, E., Luiten, P. G. M., Bari, F. Permanent, bilateral common carotid artery occlusion in the rat: A model for chronic cerebral hypoperfusion-related neurodegenerative diseases. Brain Research Reviews. 54 (1), 162-180 (2007).
  28. Morris, G. P., et al. A Comparative Study of Variables Influencing Ischemic Injury in the Longa and Koizumi Methods of Intraluminal Filament Middle Cerebral Artery Occlusion in Mice. PLOS ONE. 11 (2), 0148503(2016).
  29. Tsuchiya, D., Hong, S., Kayama, T., Panter, S. S., Weinstein, P. R. Effect of suture size and carotid clip application upon blood flow and infarct volume after permanent and temporary middle cerebral artery occlusion in mice. Brain Research. 970 (1-2), 131-139 (2003).
  30. Kaelin, W. G., Ratcliffe, P. J. Oxygen Sensing by Metazoans: The Central Role of the HIF Hydroxylase Pathway. Molecular Cell. 30 (4), 393-402 (2008).
  31. Pauly, M., Sruthi, R. Ptosis: evaluation and management. Kerala Journal of Ophthalmolgy. 31 (1), 11-16 (2019).
  32. Averbuch-Heller, L., Leigh, R. J., Mermelstein, V., Zagalsky, L., Streifler, J. Y. Ptosis in patients with hemispheric strokes. Neurology. 58 (4), 620(2002).
  33. Dutton, J. Atlas of clinical and surgical orbital anatomy, second edition. 113, 1364(2011).
  34. Ritzel, R. M., et al. Early retinal inflammatory biomarkers in the middle cerebral artery occlusion model of ischemic stroke. Molecular Vision. 22, 575-588 (2016).
  35. Crespo-Garcia, S., et al. Individual and temporal variability of the retina after chronic bilateral common carotid artery occlusion (BCCAO). PLOS ONE. 13 (3), 0193961(2018).
  36. Qin, Y., et al. Functional and morphologic study of retinal hypoperfusion injury induced by bilateral common carotid artery occlusion in rats. Scientific Reports. 9 (1), 80(2019).
  37. Block, F., Grommes, C., Kosinski, C., Schmidt, W., Schwarz, M. Retinal ischemia induced by the intraluminal suture method in rats. Neuroscience Letters. 232 (1), 45-48 (1997).
  38. Allen, R. S., et al. Progesterone Treatment in Two Rat Models of Ocular Ischemia. Investigative Ophthalmology & Visual Science. 56 (5), 2880-2891 (2015).
  39. Miller, R. F., Dowling, J. E. Intracellular responses of the Müller (glial) cells of mudpuppy retina: their relation to b-wave of the electroretinogram. Journal of Neurophysiology. 33 (3), 323-341 (1970).
  40. Block, F., Grommes, C., Kosinski, C., Schmidt, W., Schwarz, M. Retinal ischemia induced by the intraluminal suture method in rats. Neuroscience Letters. 232 (1), 45-48 (1997).
  41. Lee, J. H., Shin, J. M., Shin, Y. J., Chun, M. H., Oh, S. J. Immunochemical changes of calbindin, calretinin and SMI32 in ischemic retinas induced by increase of intraocular pressure and by middle cerebral artery occlusion. Anatomy & Cell Biology. 44 (1), 25-34 (2011).
  42. Li, S. Y., et al. Lycium barbarum polysaccharides reduce neuronal damage, blood-retinal barrier disruption and oxidative stress in retinal ischemia/reperfusion injury. PLOS ONE. 6 (1), 16380(2011).
  43. Furashova, O., Matthé, E. Retinal Changes in Different Grades of Retinal Artery Occlusion: An Optical Coherence Tomography Study. Investigative Ophthalmology & Visual Science. 58 (12), 5209-5216 (2017).
  44. Zadeh, J. K., et al. Short-Time Ocular Ischemia Induces Vascular Endothelial Dysfunction and Ganglion Cell Loss in the Pig Retina. International Journal of Molecular Sciences. 20 (19), (2019).
  45. Liu, S., Zhen, G., Meloni, B. P., Campbell, K., Winn, H. R. Rodent stroke model guidelines for preclinical stroke trials (1st edition). Journal of Experimental Stroke & Translational Medicine. 2 (2), 2-27 (2009).
  46. Tang, Y., et al. Hypothermia-induced ischemic tolerance is associated with Drp1 inhibition in cerebral ischemia-reperfusion injury of mice. Brain Research. 1646, 73-83 (2016).
  47. Barone, F. C., Knudsen, D. J., Nelson, A. H., Feuerstein, G. Z., Willette, R. N. Mouse strain differences in susceptibility to cerebral ischemia are related to cerebral vascular anatomy. Journal of Cerebral Blood Flow & Metabolism. 13 (4), 683-692 (1993).
  48. Pula, J. H., Yuen, C. A. Eyes and stroke: the visual aspects of cerebrovascular disease. Stroke and Vascular Neurology. 2 (4), 210(2017).
  49. Steele, E. C., Guo, Q., Namura, S. Filamentous middle cerebral artery occlusion causes ischemic damage to the retina in mice. Stroke. 39 (7), 2099-2104 (2008).
  50. Sim, D. A., et al. The Effects of Macular Ischemia on Visual Acuity in Diabetic Retinopathy. Investigative Ophthalmology & Visual Science. 54 (3), 2353-2360 (2013).
  51. Wu, K. K., Huan, Y. Streptozotocin-induced diabetic models in mice and rats. Current Protocols in Pharmacology. , Chapter 5, Unit 5.47 (2008).
  52. Mubarak, A., Hodgson, J. M., Considine, M. J., Croft, K. D., Matthews, V. B. Supplementation of a high-fat diet with chlorogenic acid is associated with insulin resistance and hepatic lipid accumulation in mice. Journal of Agricultural and Food Chemistry. 61 (18), 4371-4378 (2013).
  53. Ansari, S., Azari, H., McConnell, D. J., Afzal, A., Mocco, J. Intraluminal middle cerebral artery occlusion (MCAO) model for ischemic stroke with laser doppler flowmetry guidance in mice. Journal of Visualized Experiments. (51), e2879(2011).
  54. Hedna, V. S., et al. Validity of Laser Doppler Flowmetry in Predicting Outcome in Murine Intraluminal Middle Cerebral Artery Occlusion Stroke. Journal of Vascular and Interventional Neurology. 8 (3), 74-82 (2015).

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Herprints en machtigingen

Tags

Retinale ischemie modelBilaterale CCA occlusieTijdelijke CCA occlusieRetinale ischemie bij muizenHIF 1 alfa stabilisatieRetinale reactieve glioseElectroretinografie analyseOptische coherentietomografie
Een Murine-model van ischemisch netvliesletsel veroorzaakt door voorbijgaande bilaterale gemeenschappelijke halsslagader Occlusie
Neem contact met ons op
Aanbevelen aan de bibliotheek

Privacy

Gebruiksvoorwaarden

Beleidsoverzicht

Copyright © 2026 MyJoVE Corporation. Alle rechten voorbehouden.