Methodenartikel

In vivo Functie van differentiële subsets van cutane dendritische cellen om Th17-immuniteit te induceren bij intradermale Candida albicans-infectie

DOI:

10.3791/62731

⸱

20 juli 2021

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Department of Dermatology, Severance Hospital, Cutaneous Biology Research Institute, Yonsei University College of Medicine, 2Brain Korea 21 FOUR Project for Medical Science, Yonsei University College of Medicine, 3Institute for Immunology and Immunological Diseases, Yonsei University College of Medicine

In dit artikel

Samenvatting

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Hier demonstreren we de in vivo functie van cutane dendritische celsubsets in Th17-immuniteit van diepe dermale Candida albicans-infectie .

Samenvatting

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

De huid is het buitenste barrièreorgaan in het lichaam, dat verschillende soorten dendritische cellen (DC's) bevat, een groep professionele antigeenpresenterende cellen. Wanneer de huid in aanraking komt met binnendringende ziekteverwekkers, initiëren verschillende cutane DC's een duidelijke T-cel-immuunrespons om het lichaam te beschermen. Onder de binnendringende ziekteverwekkers zorgt schimmelinfectie specifiek voor een beschermende interleukine-17-producerende Th17-immuunrespons. Er werd een protocol ontwikkeld om Th17-cellen efficiënt te differentiëren door intradermale Candida albicans-infectie om een subset van cutane DC's te onderzoeken die verantwoordelijk zijn voor het induceren van Th17-immuniteit. Flowcytometrie en genexpressie-analyses toonden een prominente inductie van Th17-immuunrespons in huiddrainerende lymfeklieren en geïnfecteerde huid. Met behulp van difterietoxine-geïnduceerde DC-subset-depleting muizenstammen, bleken CD301b+ dermale DC's verantwoordelijk te zijn voor het opzetten van optimale Th17-differentiatie in dit model. Dit protocol biedt dus een waardevolle methode om in vivo de functie van differentiële subsets van cutane DC's te bestuderen om de Th17-immuniteit tegen diepe huidschimmelinfectie te bepalen.

Inleiding

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

De huid is het buitenste barrièreorgaan, dat het lichaam beschermt tegen binnendringende externe ziekteverwekkers en prikkels1. De huid bestaat uit twee verschillende lagen, waaronder de epidermis - een gelaagd epitheel van keratinocyten - en de onderliggende dermis - een dicht netwerk van collageen en andere structurele componenten. Als primair epitheelbarrièreweefsel zorgt de huid voornamelijk voor fysieke barrières en draagt het bij aan extra immunologische barrières omdat het talrijke residente immuuncellen bevat 2,3. Onder de cutane immuuncellen zijn dendritische cellen (DC's) een type professionele antigeenpresenterende cellen, die actief zelf- en niet-zelf-antigenen opnemen en naar de regionale lymfeklieren (LN's) migreren om antigeenspecifieke T-celresponsen en tolerantie te initiëren volgens de aard van antigenen4.

De huid herbergt epidermale antigeenpresenterende cellen, namelijk de Langerhanscellen (LC's) en ten minste twee soorten DC's, waaronder dermale type 1 conventionele DC's (cDC1) en dermale type 2 conventionele DC's (cDC2)5. Epidermale LC's zijn van embryonale monocytaire oorsprong en behouden hun celaantal door zichzelf in stand te houden onder homeostatische omstandigheden6. Daarentegen zijn dermale cDC1 en cDC2 van hematopoëtische stamceloorsprong en worden ze continu aangevuld door DC-toegewijde voorlopercellen5. Cutane DC's worden gekenmerkt door hun oppervlaktemarkers, grofweg onderverdeeld in Langerin+ (inclusief LC's en cDC1) en CD11b+Langerin-populaties (voornamelijk cDC2). Bovendien heeft deze groep onthuld dat de CD11b+Langerin-DC-populatie verder wordt geclassificeerd in twee subgroepen volgens CD301b-expressie7.

De belangrijke functionele kenmerken van cutane DC's zijn gecentreerd op een taakverdeling, die voornamelijk wordt bepaald door de intrinsieke aard van elke subset van DC's, in situ locaties van de DC's, de weefselmicro-omgeving en lokale ontstekingssignalen8. Deze functionele kenmerken van cutane DC's vereisen het onderzoek naar de rol van specifieke subsets van DC's tijdens bepaalde soorten immuunrespons van de huid. Bij antigene stimulatie door cutane DC's in de drainerende LN's, differentiëren naïeve CD4+ T-cellen in specifieke subsets van helper-T-cellen, die een set gedefinieerde cytokines produceren voor het uitoefenen van hun effectorfunctie9. Onder de CD4+ helper T-cel subsets spelen interleukine-17 (IL-17)-producerende Th17-cellen een cruciale rol bij auto-immuunziekten en antischimmelimmuniteit10. In dit opzicht is huidschimmelinfectie een robuust model geweest om de Th17-immuniteit in vivo te bestuderen 11,12,13. Wanneer met tape gestripte huiden epicutaan worden blootgesteld aan de gist Candida albicans (C. albicans), spelen epidermale LC's een cruciale rol bij het aansturen van antigeenspecifieke Th17-differentiatie14.

Beschermende immuniteit tegen intradermale C. albicans-infectie vereist aangeboren immuniteit, zoals de fibrinolytische activiteit van fibroblasten en fagocyten15. Er is echter weinig bekend over de rol van cutane DC-subgroepen bij het tot stand brengen van Th17-immuniteit bij diepe dermale C. albicans-infectie . Dit artikel beschrijft een methode van intradermale huidinfectie van C. albicans, die lokale en regionale Th17-immuunresponsen veroorzaakt. De toepassing van difterietoxine (DT)-geïnduceerde DC-subset depletie-muizenstammen onthulde dat CD301b+ dermale DC's cruciaal zijn voor de immuniteit van Th17 in dit model. De hier beschreven benadering maakt het mogelijk om de Th17-respons op diepe dermale invasieve schimmelinfectie te bestuderen.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

LET OP: Alle dierproeven zijn goedgekeurd door de Institution Animal Care and Use Committee (IACUC, Approval ID: 2019-0056, 2019-0055). Voor dit onderzoek werden zeven tot 9 weken oude wildtype (WT) C57BL/6 vrouwelijke muizen met een gewicht van 18-24 g gebruikt. Sommige onderzoeken werden uitgevoerd met vrouwelijke Langerin-difterietoxinereceptor (DTR) en CD301b-DTR-muizen van dezelfde leeftijd en hetzelfde gewicht. Vier tot zes muizen werden in elke groep gebruikt voor een experiment en de gegevens zijn representatief voor drie onafhankelijke experimenten. Deze werkzaamheden werden uitgevoerd onder omstandigheden van bioveiligheidsniveau 3, die ook konden worden uitgevoerd onder omstandigheden van bioveiligheidsniveau 2 volgens de richtlijnen van de instelling (kamertemperatuur 23 °C ± 3 °C, vochtigheid 50% ± 10%).

1. Bereiding van Candida albicans

OPMERKING: Experimenten in dit gedeelte zijn uitgevoerd in een biologische veiligheidskast.

  1. Streep C. albicans stam SC5314 op een gist-pepton-dextrose-adenine (YPDA) agarplaat met behulp van een inoculatielus en naald.
  2. Incubeer de plaat ondersteboven gedurende 2 dagen bij 30 °C.
    OPMERKING: De YPDA-agarplaat met C. albicans kan maximaal 1 maand bij 4 °C worden bewaard.
  3. Isoleer een enkele kolonie van de plaat voor inoculatie in 10 ml YPDA-medium in een tube van 50 ml met behulp van een steriele pipetpunt.
  4. Incubeer bij 30 °C met schudden bij 230-250 tpm gedurende ~17 uur.
  5. Plaats de gistsuspensie in een cuvet en meet elke 30 minuten de optische dichtheid (OD) bij 600 nm met behulp van een UV-VIS-spectrofotometer totdat de OD600 1,5-2,0 bereikt.
    OPMERKING: Deze stap kan 16-18 uur duren.
  6. Draai de gistsuspensie gedurende 5 minuten op 1000 × g .
  7. Gooi het bovenstaande weg en resustribueer de gistcellen in een geschikte hoeveelheid steriele fosfaatgebufferde zoutoplossing (PBS).
  8. Tel de cellen van C. albicans met behulp van een hemocytometer en draai de suspensie gedurende 5 minuten op 1000 × g .
  9. Gooi de supernatant weg en suspendeer de C. albicans-cellen in PBS tot een concentratie van 1 × 107 cellen in 40 μL PBS per voetzool.
  10. Voor de bereiding van door hitte gedode (HK) C. albicans worden de gistcellen gedood door ze gedurende 60 minuten bij 65 °C te verhitten met behulp van een verwarmingsmixer na bepaling van het celaantal.

2. Muisvoetzolinfectie met C. albicans

figure-protocol-1
Figuur 1: Schematisch diagram van het intradermale Candida albicans-infectiemodel . (A) De achterpotloden van muizen werden intradermaal geïnjecteerd met 1 × 107 C. albicans. Na 7 dagen werden de voetzolen van muizen opnieuw blootgesteld aan 1 × 107 HK C. albicans door intradermale injectie en werd de overgevoeligheidsrespons van het vertraagde type 24 uur na antigeenprovocatie gemeten. Lokale immuunrespons tijdens C. albicans-sensibilisatie werd na 7 dagen geanalyseerd in huiddrainerende LN's. (B, C) Afbeeldingen van voetzolen vóór intradermale voetzolinjectie met C. albicans. (D, E) Injectie van C. albicans in de diepe dermis van de rechter voetzool. (F, G) Klinische tekenen van roodheid en zwelling na injectie van de rechtervoetzool. (H) Een schets van de lymfepaden van het voetkussen naar popliteale LN's na injectie met C. albicans . (I) Blootgestelde popliteale LN's achter de knie 7 dagen na injectie met C. albicans en (J) zonder injectie. Afkortingen: HK = hitte-gedood; LNs = lymfeklieren. Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.

  1. Verdoof de muizen met isofluraan in een inductiekamer totdat de muizen een langzame ademhalingsfrequentie hebben en geen ontwenningsverschijnselen vertonen op teen- of staartknijpen.
    OPMERKING: Tijdens de anesthesie wordt oogzalf aanbevolen om droge ogen te voorkomen, vooral bij anesthesie die langer dan 5 minuten aanhoudt.
  2. Verwijder de dop van een naald van 31 G en vul de insulinespuit van 0,3 ml met de voorbereide C. albicans uit stap 1.9 na het mengen van de cellen.
  3. Haal de verdoofde muis uit de inductiekamer en injecteer voorzichtig 40 μL van de gistcellen (1 × 107 cellen) in de diepe dermis van de rechter voetzool voor C . albicans-sensibilisatie .
    OPMERKING: Het maximale volume dat in een voetzool kan worden geïnjecteerd is 50 μL.
  4. Trek de naald van de spuit langzaam terug van de injectieplaats.
  5. Plaats elke muis alleen in een kooi totdat hij volledig hersteld is van de narcose en breng hem dan veilig terug naar de thuiskooi.
  6. Om een antigeenspecifieke respons op C. albicans te ontwikkelen, moet de rechtervoetzool van de muizen 7 dagen na de sensibilisatie worden uitgedaagd met de bereide HK C. albicans via intradermale injectie, zoals eerder beschreven (1 × 107 cellen; 40 μL per voetzool; herhaal stap 2.1-2.5).
  7. Oogst huiddrainerende LN's 7 dagen na C. albicans-sensibilisatie of laesie-voetzoolweefsels 24 uur na antigeenprovocatie na euthanasie in een CO2 -kamer.

3. Door difterietoxine geïnduceerde dendritische celdepletie in vivo

OPMERKING: In deze studie werden zowel Langerin-DTR- als CD301b-DTR-muizen 1 dag voor en na intradermale sensibilisatie voor C. albicans behandeld met DT.

  1. Bereid een oplossing van 10 μg/ml DT in PBS.
  2. Verwijder de dop van de naald van een insulinespuit van 1 ml, meng de DT en vul de spuit met de DT.
  3. Houd de muizen goed in een positie met het hoofd naar beneden.
  4. Desinfecteer de buikzijde van de muizen met 70% ethanol.
  5. Injecteer elke muis langzaam met 100 μl 1 μg DT intraperitoneaal in het kwadrant linksonder van de buik om specifieke subsets van dendritische cellen uit te putten.
    OPMERKING: Zorg ervoor dat u geen organen beschadigt tijdens de injectie.
  6. Wacht 5 s; Verwijder vervolgens langzaam de naald.

4. Kwantitatieve real-time polymerasekettingreactie

  1. Plaats de muis in een CO2 -kamer totdat er geen ademhalingsbeweging meer wordt waargenomen.
  2. Desinfecteer de muis met 70% ethanol en snijd de laesie van de huid van de achterste voetzool in kleine stukjes met behulp van een tang en een schaar.
  3. Dompel de gesneden weefsels volledig onder in RNA-isolatiereagens.
  4. Homogeniseer de monsters met behulp van een weefselhomogenisator volgens de instructies van de fabrikant (2 cycli van 3 minuten bij 30 Hz).
    OPMERKING: In dit onderzoek werden roestvrijstalen kralen gebruikt voor weefsellysis.
  5. Centrifugeer op 10.000 × g gedurende 5 min, 4 °C.
  6. Breng het bovenstaande voorzichtig over in een nieuwe buis.
  7. Isoleer totaal RNA van de laesiehuid met behulp van een totale RNA-isolatiekit.
  8. Bepaal de RNA-concentratie met behulp van een UV-Vis-spectrofotometer.
  9. Synthetiseer cDNA met behulp van een reverse transcriptiekit voor kwantitatieve real-time polymerasekettingreactie (qPCR).
  10. Voer real-time qPCR uit met het real-time PCR-systeem door de synthese van dubbelstrengs DNA tijdens PCR-cycli te monitoren met behulp van groene fluorescerende kleurstof.
    OPMERKING: In deze studie werden de resultaten genormaliseerd naar het niveau van hypoxanthine-guaninefosforibosyltransferase (Hprt). De primersequenties zijn vermeld in tabel 1 en het PCR-protocol is als volgt: initiële denaturatie bij 95 °C gedurende 30 s, amplificatie gedurende 42 cycli (95 °C gedurende 5 s, 60 °C gedurende 30 s).

5. Celisolatie en flowcytometrische analyse

  1. Ontleed na CO2 -euthanasie de muizen met behulp van een tang en een schaar, waarbij u de voetzol-drainerende LN's, popliteale LN's genaamd, die zich achter de knie bevinden, zorgvuldig blootlegt en oogst.
  2. Bereid eencellige suspensies van de voetzoolafvoerende LN's van elke muis door de weefsels na homogenisatie door een zeef van 70 μm te filtreren met behulp van de zuiger van een spuit van 3 ml.
  3. Was de cellen met PBS en centrifugeer gedurende 5 minuten op 500 × g bij 4 °C.
  4. Gooi de supernatant weg en was de cellen opnieuw met PBS.
  5. Centrifugeer 5 minuten op 500 × g bij 4 °C.
  6. Gooi het bovenstaande weg en suspendeer de cellen in een volledig RPMI-10-medium dat 55 μM β-mercaptoethanol, 50 ng/ml phorbol 12-myristaat 13-acetaat (PMA) en 500 ng/ml ionomycine bevat in een plaat met 24 putjes voor T-celstimulatie.
  7. Voeg na 1 uur 10 μg/ml brefeldin A en 1000x monensin toe aan de celsuspensie en kweek gedurende nog eens 5 uur.
  8. Oogst de cellen en was ze met een door fluorescentie geactiveerde celsortering (FACS) buffer.
  9. Centrifugeer 5 minuten bij 500 × g bij 4 °C en gooi het bovenstaande weg.
  10. Kleur de dode cellen met een fixeerbare kleurstof die dode cellen kleurt en incubeer gedurende 30 minuten bij 4 °C.
  11. Was de monsters met FACS-buffer en centrifugeer ze gedurende 5 minuten bij 500 × g bij 4 °C.
  12. Gooi het supernatant weg en kleur de cellen gedurende 30 minuten bij 4 °C met antilichamen tegen fluorchroomgeconjugeerde oppervlaktemarkers en Fc-receptorblokkers.
  13. Was de monsters met FACS-buffer en centrifugeer ze gedurende 5 minuten op 500 × g bij 4 °C.
  14. Gooi het bovenstaande weg en suspendeer de gepelleteerde cellen opnieuw in fixatie- en permeabilisatieoplossing gedurende 15-20 minuten bij 4 °C voor intracellulaire kleuring.
  15. Was de monsters met 1x wasbuffer en centrifugeer ze 5 minuten op 500 × g op 4 °C.
  16. Gooi het supernatant weg en voer intracellulaire cytokinekleuring uit gedurende 30 minuten bij 4 °C.
  17. Was de monsters met 1x wasbuffer en centrifugeer 5 minuten op 500 x g op 4 °C.
  18. Resuspendeer de cellen in het juiste volume (200-300 μL) FACS-buffer.
  19. Analyseer eiwitexpressie met behulp van flowcytometrie.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Resultaten

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Hier hebben we een intradermale infectiemodel van C. albicans gedemonstreerd om de rol van cutane DC-gemedieerde Th17-immuunrespons in vivo te bestuderen. Na een eerste intradermale injectie met C. albicans in de voetzolen werden de huiddrainerende LN's vergroot (Figuur 2A). Tijdens de sensibilisatieperiode was de verhouding van CD4+ tot CD8+ effector-T-cellen aanzienlijk verhoogd (Figuur ...

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Discussie

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Dit artikel beschrijft een methode van intradermale C. albicans-infectie die het mogelijk maakt om de rol van cutane DC's in de Th17-immuunrespons in vivo te bestuderen. Door multiparametrische flowcytometrische analyse toe te passen met DT-geïnduceerde muizenstammen, ontdekten we dat CD301b+ dermale DC's een cruciale cutane DC-subset zijn voor het initiëren van Th17-immuniteit tegen diepe dermale C. albicans-infectie . Bovendien toonden de resultate...

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Openbaarmakingen

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

De auteurs hebben geen belangenconflicten te melden.

Dankbetuigingen

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Dit onderzoek werd ondersteund door de onderzoeksbeurs van de Samjung-Dalim Faculty van Yonsei University College of Medicine (6-2019-0125), door een Basic Science Research Program via de National Research Foundation of Republic of Korea, gefinancierd door het ministerie van Onderwijs (2019R1A6A1A03032869) en het ministerie van Wetenschap en Informatie- en Communicatietechnologie (2018R1A5A2025079, 2019M3A9E8022135 en 2020R1C1C1014513), en door Korea Centers for Disease Control and Prevention (KCDC, 2020-ER6714-00).

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Materialen

Lijst van materialen gebruikt in dit artikel
NaamBedrijfCatalogusnummerOpmerkingen
0.3 mL (31 G) insulin syringe BD328822
1x  Perm/Wash bufferBD554723
1 mL (30 G) syringe insulin syringe BD328818
24 well-plateFalcon353047
50 mL conical tubeFalcon50050
70 μm strainerFalcon352350
70% ethanol
ABI StepOnePlus real-time PCR systemApplied Biosystems
Anesthesia chamberHarvard Apparatus
Brefeldin ABDBD 555029
β-MercaptoethanolGibco21985023
Candida albicans strain SC5314provided by Daniel Kaplan at Pittsburgh University
CD3BioLegend100216Clone 17A2
CD301b-DTR miceprovided by Akiko Iwasaki at Yale University
CD4BioLegend100408Clone GK1.5
CD44eBioscience47-0441-80Clone IM7
CD8aBD Biosciences553031Clone 53.6.7
Centrifuge
Clicker counter
CuvetteKartellKA.1938
Cytofix/Cytoperm solutionBD554722
Diphtheria toxin (DT)Sigma
Dulbecco's phosphate-buffered saline (DPBS)WelgeneLB001-02
FACS (Fluorescence-activated cell sorting) bufferIn-house
Fc receptor blockerBD553142
Fetal bovine serum (FBS)WelgeneS101-07
ForcepsRobozfor harvesting sample
HemocytometerFisher Scientific267110
Hybrid-R total RNA kitGeneAll Biotechnology305-101
hydroxyethyl piperazine ethane sulfonic acid (HEPES)Gibco15630-080
IL-17A (intracellular cytokine)BioLegend506912Clone TC11-18H10.1
IonomycinSigmaI0634
Isoflurane
Langerin-DTRprovided by Heung Kyu Lee at Korea Advanced Institute of Science and Technology
LIVE/DEAD Fixable Aqua Dead Cell Stain KitInvitrogenL34957
Loop and NeedleSPL90010
MonensinBDBD554724
NanoDrop 2000Thermo Scientific
Penicillin Gibco15140-122
Petri dishSPL10090
Phorbol 12-myristate 13-acetate (PMA)SigmaP8139
PrimeScript RT Master MixTakara BioRR360A
RPMI 1640Gibco11875-093
ScissorsRobozfor harvesting sample
Stainless Steel Beads, 5 mmQIAGEN69989
Sterile pipette tip
SYBR Green Premix Ex Taq IITakara BioRR820A
TCRβBioLegend109228Clone H57-597
ThermoMixer CEppendorf
TissueLyserQIAGEN
UV-VIS spectrophotometerPerkinElmer
Wild-type C57BL/6 miceOrient Bio7- to 9-week-old mice were used
Yeast-peptone-dextrose-adenine (YPDA) medium, liquid, sterile (1% yeast extract, 2% Bacto peptone, 2% dextrose)
YPDA agar plate, sterile (1% yeast extract, 2% Bacto peptone, 2% dextrose, 2% Bacto agar)

Referenties

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Nestle, F. O., Di Meglio, P., Qin, J. Z., Nickoloff, B. J. Skin immune sentinels in health and disease. Nature Reviews Immunology. 9 (10), 679-691 (2009).
  2. Bouwstra, J. A., Ponec, M. The skin barrier in healthy and diseased state. Biochimica et Biophysica Acta. 1758 (12), 2080-2095 (2006).
  3. Kabashima, K., Honda, T., Ginhoux, F., Egawa, G. The immunological anatomy of the skin. Nature Reviews Immunology. 19 (1), 19-30 (2019).
  4. Banchereau, J., et al. Immunobiology of dendritic cells. Annual Review of Immunology. 18, 767-811 (2000).
  5. Kashem, S. W., Haniffa, M., Kaplan, D. H. Antigen-presenting cells in the skin. Annual Review of Immunology. 35, 469-499 (2017).
  6. Kaplan, D. H. Ontogeny and function of murine epidermal Langerhans cells. Nature Immunology. 18 (10), 1068-1075 (2017).
  7. Kim, T. G., et al. Skin-specific CD301b(+) dermal dendritic cells drive IL-17-mediated psoriasis-like immune response in mice. Journal of Investigative Dermatology. 138 (4), 844-853 (2018).
  8. Durai, V., Murphy, K. M. Functions of murine dendritic cells. Immunity. 45 (4), 719-736 (2016).
  9. O'Shea, J. J., Paul, W. E. Mechanisms underlying lineage commitment and plasticity of helper CD4+ T cells. Science. 327 (5969), 1098-1102 (2010).
  10. Korn, T., Bettelli, E., Oukka, M., Kuchroo, V. K. IL-17 and Th17 cells. Annual Review of Immunology. 27, 485-517 (2009).
  11. Hernandez-Santos, N., Gaffen, S. L. Th17 cells in immunity to Candida albicans. Cell Host & Microbe. 11 (5), 425-435 (2012).
  12. Burstein, V. L., et al. IL-17-mediated immunity controls skin infection and T helper 1 response during experimental Microsporum canis dermatophytosis. Journal of Investivative Dermatology. 138 (8), 1744-1753 (2018).
  13. Sparber, F., et al. The skin commensal yeast Malassezia triggers a type 17 response that coordinates anti-fungal immunity and exacerbates skin inflammation. Cell Host & Microbe. 25 (3), 389-403 (2019).
  14. Igyarto, B. Z., et al. Skin-resident murine dendritic cell subsets promote distinct and opposing antigen-specific T helper cell responses. Immunity. 35 (2), 260-272 (2011).
  15. Santus, W., et al. Skin infections are eliminated by cooperation of the fibrinolytic and innate immune systems. Science Immunology. 2 (15), (2017).
  16. Kashem, S. W., et al. Candida albicans morphology and dendritic cell subsets determine T helper cell differentiation. Immunity. 42 (2), 356-366 (2015).
  17. Chen, H., Zhou, X., Ren, B., Cheng, L. The regulation of hyphae growth in Candida albicans. Virulence. 11 (1), 337-348 (2020).
  18. Santus, W., Mingozzi, F., Vai, M., Granucci, F., Zanoni, I. Deep dermal injection as a model of Candida albicans skin infection for histological analyses. Journal of Visualized Experiments: JoVE. (136), e57574(2018).
  19. Villablanca, E. J., Mora, J. R. A two-step model for Langerhans cell migration to skin-draining LN. European Journal of Immunology. 38 (11), 2975-2980 (2008).
  20. Persson, E. K., et al. IRF4 transcription-factor-dependent CD103(+)CD11b(+) dendritic cells drive mucosal T helper 17 cell differentiation. Immunity. 38 (5), 958-969 (2013).
  21. Marcoux, D., et al. Deep cutaneous fungal infections in immunocompromised children. Journal of the American Academy of Dermatology. 61 (5), 857-864 (2009).

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Herprints en machtigingen

Toestemming aanvragen om de tekst of afbeeldingen van dit JoVE-artikel te hergebruiken

Toestemming aanvragen

Trefwoorden

Intradermale infectiehuidbarri reantigeenpresenterende cellenflowcytometriegenexpressiedermale DC subsetsschimmelinfectie van de huid
Video binnenkort beschikbaar

Gerelateerde artikelen