We tonen de vorming en dimensionale karakterisering van micro- en nanoplastics (respectievelijk parlementsleden en NP's) met behulp van een stapsgewijs proces van mechanisch frezen, slijpen en beeldvormingsanalyse.
Een abonnement op JoVE is vereist om deze inhoud te bekijken. Log in of start vandaag met uw gratis proefperiode.
Methodenartikel
We tonen de vorming en dimensionale karakterisering van micro- en nanoplastics (respectievelijk parlementsleden en NP's) met behulp van een stapsgewijs proces van mechanisch frezen, slijpen en beeldvormingsanalyse.
Microplastics (MPs) en nanoplastics (NP's) verspreid in agrarische ecosystemen kunnen een ernstige bedreiging vormen voor de biota in de bodem en nabijgelegen waterwegen. Bovendien kunnen chemicaliën zoals pesticiden die door NP's worden geadsorbeerd, bodemorganismen schaden en mogelijk in de voedselketen terechtkomen. In deze context dragen in de landbouw gebruikte kunststoffen zoals plastic mulchfolies aanzienlijk bij aan plasticvervuiling in agrarische ecosystemen. De meeste fundamentele studies van het lot en ecotoxiciteit maken echter gebruik van geïdealiseerde en slecht representatieve MP-materialen, zoals polystyreenmicrosferen.
Daarom hebben we, zoals hierin beschreven, een meerstappenprocedure op laboratoriumschaal ontwikkeld om mechanisch representatieve kamerleden en np's voor dergelijke studies te vormen. Het kunststofmateriaal werd bereid uit in de handel verkrijgbare plastic mulchfilms van polybutyraatadipaat-co-tereftalaat (PBAT) die werden verbroed door cryogene behandeling (CRYO) of omgevingsverwering (W), en uit onbehandelde PBAT-pellets. De plastic materialen werden vervolgens behandeld door mechanisch frezen om parlementsleden te vormen met een grootte van 46-840 μm, waarbij de slijtage van plastic fragmenten door wind en mechanische machines werd nagebootst. De Kamerleden werden vervolgens in verschillende groottefracties gezeefd om verdere analyse mogelijk te maken. Ten slotte werd de zeeffractie van 106 μm onderworpen aan nat malen om NP's van 20-900 nm te genereren, een proces dat het langzame verkleiningsproces voor terrestrische parlementsleden nabootst. De afmetingen en de vorm voor kamerleden werden bepaald door middel van beeldanalyse van stereomicrografen, en dynamische lichtverstrooiing (DLS) werd gebruikt om de deeltjesgrootte voor NP's te beoordelen. Parlementsleden en NP's die door dit proces werden gevormd, bezaten onregelmatige vormen, wat in overeenstemming is met de geometrische eigenschappen van parlementsleden die uit landbouwvelden zijn hersteld. Over het algemeen bleek deze methode voor verkleining efficiënt voor het vormen van parlementsleden en NP's die zijn samengesteld uit biologisch afbreekbare kunststoffen zoals polybutyleenadipaat-co-tereftalaat (PBAT), die mulchmaterialen vertegenwoordigen die worden gebruikt voor de productie van landbouwspeciale gewassen.
In de afgelopen decennia heeft de snel toenemende wereldwijde productie van kunststoffen en onjuiste verwijdering en het gebrek aan recycling voor plastic afval geleid tot milieuvervuiling die van invloed is geweest op mariene en terrestrische ecosystemen 1,2,3. Plastic materialen zijn essentieel voor de hedendaagse landbouw, met name om groenten, klein fruit en andere speciale gewassen te verbouwen. Het gebruik ervan als mulchfolie, hoge en lage tunnelbekleding, druppeltape en andere toepassingen is gericht op het verbeteren van de gewasopbrengst en -kwaliteit, het verlagen van de productiekosten en het bevorderen van duurzame landbouwmethoden 4,5. De groeiende werkgelegenheid van "plasticulture" heeft echter bezorgdheid gewekt over de vorming, distributie en retentie van plastic stukken in agrarische omgevingen. Na een continu fragmentatieproces veroorzaakt door verbrossing door aantasting van het milieu tijdens de levensduur, vormen grotere plastic fragmenten micro- en nanoplastics (MNP's), die in de bodem blijven bestaan of migreren naar aangrenzende waterwegen via waterafvoer en wind 6,7,8. Omgevingsfactoren zoals ultraviolette (UV) straling door zonlicht, mechanische krachten van water en biologische factoren veroorzaken plastic verbrossing van milieuverdeelde kunststoffen, wat resulteert in de afbraak van grotere plastic fragmenten in macro- of meso-plastic deeltjes 9,10. Verdere defragmentatie vormt microplastics (MP's) en nanoplastics (NP's), die deeltjes van gemiddelde grootte (nominale diameter; dp) van 1-5000 μm en 1-1000 nm, respectievelijk11. De bovenste dp-grens voor NP's (d.w.z. een ondergrens voor Kamerleden) is echter niet universeel overeengekomen en in verschillende papers wordt dit vermeld als 100 nm12.
MNP's van plastic afval vormen een opkomende wereldwijde bedreiging voor de gezondheid van de bodem en ecosysteemdiensten. Adsorptie van zware metalen uit zoet water door Kamerleden leidde tot een 800-voudig hogere concentratie zware metalen in vergelijking met de omgeving13. Bovendien vormen parlementsleden in aquatische ecosystemen meerdere stressoren en verontreinigingen door de lichtpenetratie te veranderen, zuurstofuitputting te veroorzaken en hechting aan verschillende biota te veroorzaken, waaronder penetratie en accumulatie in waterorganismen14.
Recente studies suggereren dat MNPs de geochemie en biota van de bodem kunnen beïnvloeden, inclusief microbiële gemeenschappen en planten 15,16,17. Bovendien bedreigen NP's het voedselweb 17,18,19,20. Omdat MNP's gemakkelijk verticaal en horizontaal transport in de bodem ondergaan, kunnen ze geabsorbeerde verontreinigingen zoals pesticiden, weekmakers en micro-organismen door de bodem naar grondwater of aquatische ecosystemen zoals rivieren en bekenvervoeren 21,22,23,24. Conventionele landbouwplastics zoals mulchfilms zijn gemaakt van polyethyleen, dat na gebruik van het veld moet worden verwijderd en op stortplaatsen moet worden verwijderd. Onvolledige verwijdering leidt echter tot aanzienlijke ophoping van plastic afval in de bodem 9,25,26. Als alternatief zijn bodem-biologisch afbreekbare plastic mulches (BDM's) ontworpen om na gebruik in de grond te worden bewerkt, waar ze na verloop van tijd zullen afbreken. BDM's blijven echter tijdelijk in de bodem en degraderen en fragmenteren geleidelijk in Kamerleden en NP's 9,27.
Veel huidige milieu-ecotoxicologische en lotgevallenstudies maken gebruik van geïdealiseerde en niet-representatieve parlementsleden en NP's-modelmaterialen. De meest gebruikte surrogaat-MNPs zijn monodisperse polystyreen micro- of nanosferen, die niet de werkelijke MNP's weerspiegelen die in de omgeving wonen12,28. Bijgevolg kan de selectie van niet-representatieve parlementsleden en np's leiden tot onnauwkeurige metingen en resultaten. Op basis van het ontbreken van geschikte modelμnp's voor terrestrische milieustudies, waren de auteurs gemotiveerd om dergelijke modellen te bereiden op basis van landbouwplastics. We rapporteerden eerder over de vorming van MNP's uit BDM's en polyethyleenpellets door mechanisch frezen en malen van plastic pellets en filmmaterialen en de dimensionale en moleculaire kenmerken van MNP's29. Het huidige artikel biedt een meer gedetailleerd protocol voor het voorbereiden van MNP's dat breder kan worden toegepast op alle landbouwplastics, zoals mulchfolies of hun gepelletiseerde grondstoffen (figuur 1). Hier, om als voorbeeld te dienen, kozen we een mulchfilm en bolvormige pellets van het biologisch afbreekbare polymeer polybutyleenadipaattereftalaat (PBAT) om landbouwplastics te vertegenwoordigen.
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
1. Verwerking van parlementsleden van plastic pellets via cryogene voorbehandeling en frezen
OPMERKING: Deze methodologie is gebaseerd op een elders beschreven procedure, waarbij gebruik wordt gemaakt van een PBAT-film die is samengesteld uit hetzelfde materiaal dat voor deze gepresenteerde studie is gebruikt29.
2. Verwerking van kunststoffolies door cryogene voorbehandeling en frezen
3. Verwerking van kunststoffolies die zijn voorbehandeld door milieuverwering en frezen
4. Zevenprocedure door cascadezeven
5. Bereiding van een waterige NP-drijfmest voor nat malen
6. Voorbereiding van de natte slijpmachine voor NP-productie
7. Terugwinning en droging van NP's uit de drijfmest
8. MP-beeldvorming via stereomicroscopie
9. Beeldanalyse via ImageJ
10. Deeltjesdiameter (dp) en vormfactorberekening in spreadsheetsoftware
OPMERKING: Kennis van deeltjesdiameter en vormfactoren zijn essentieel voor deeltjesgedrag (lot, transport) in de omgeving en de bepaling van het oppervlak. Daarom is geometrie essentieel wanneer Kamerleden worden gebruikt voor milieustudies. Er werden bijvoorbeeld verschillende interactiemechanismen met de bodem waargenomen, afhankelijk van de maten en vormen van parlementsleden, zoals MP-MP en MP-bodem agglomeraties, die de deeltjesbeweging in de bodem beïnvloeden15,32. Daarom worden de volgende stappen voorgesteld om de d p-deeltjesgrootteverdeling en geometrische parameter te bepalen.




11. Statistische analyse voor kamerleden en parlementsleden
12. Beste pasvorm van dp grootteverdeling en deeltjesvormfactoren
13. Dimensionale karakterisering van NP's door dynamische lichtverstrooiing
14. Chemische analyse van MNP's met behulp van Fouriertransformatie infrarood (FTIR) spectrometrie-verzwakte totale reflectie (ATR)
OPMERKING: Chemische analyses van MNP's door Fouriertransformatie-infrarood (FTIR) en kernspinresonantie (NMR) spectroscopieën zijn zeer geschikte hulpmiddelen om de impact van nat malen op chemische bindingseigenschappen te beoordelen, evenals de relatieve hoeveelheden belangrijke componenten en de monomere bestanddelen van de polymeren, respectievelijk10. Bovendien kunnen de thermische eigenschappen en de stabiliteit van de polymere bestanddelen van MNPs worden beoordeeld door middel van differentiële scanningcalorimetrie (DSC) en thermogravimetrische analyse (TGA), respectievelijk29.
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Om de experimentele proceduremethode en -analyse te valideren, werden kamerleden en NP's gevormd uit pellets en filmmaterialen en vergeleken op grootte en vorm met behulp van microscopische beelden. De in figuur 1 beschreven methode vormde efficiënt parlementsleden en np's uit biologisch afbreekbare plastic pellets en folies; dit werd bereikt door cryogene koeling, frezen en natslijpen en karakteriseren. De eerste stap was niet nodig voor milieuvriendelijke films omdat verwering verbrossing ...
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Deze methode beschrijft een effectief proces dat oorspronkelijk werd beschreven in een eerdere publicatie29, om MNPs afkomstig van pellets en mulchfilms voor te bereiden op milieustudies. Het verkleiningsproces omvatte cryogene koeling (alleen voor film), droog frezen en natte slijpfasen om model-MNPs te produceren. We hebben deze methode toegepast om MNP's te bereiden uit een breed scala aan polymere grondstoffen, waaronder polyethyleen met lage dichtheid (LDPE), polybutyraatadipaat-co-tereftalaa...
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
De auteurs hebben niets te onthullen.
Dit onderzoek werd gefinancierd door het Herbert College of Agriculture, de Biosystems Engineering and Soil Department en de Science Alliance aan de Universiteit van Tennessee, Knoxville. Bovendien erkennen de auteurs dankbaar de financiële steun die via de USDA Grant 2020-67019-31167 voor dit onderzoek is verstrekt. De eerste grondstoffen voor het voorbereiden van MNPs van PBAT-gebaseerde biologisch afbreekbare mulchfolie werden vriendelijk geleverd door BioBag Americas, Inc. (Dunevin, FL, VS) en PBAT-pellets door Mobius, LLC (Lenoir City, TN).
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
| Naam | Bedrijf | Catalogusnummer | Opmerkingen |
|---|---|---|---|
| Aluminium schaal, 150 mL | Fisher Scientific, Waltham, MA, USA | 08-732-103 | Drogeren van verzamelde NPs |
| Aluminium schaal, 500 mL | VWR International, Radnor, PA, USA | 25433-018 | Verzamelen van NPs na nat-slijpen |
| Centrifuge | Fisher Scientific, Waltham, MA, USA | Centrific 228 | Container voor centrifugatie |
| Distributieslang, #20, 840 µm | Thomas Scientific, Swedesboro, NJ, USA | 3383M30 | Zeven van de eerste fractie tijdens het malen |
| Distributieslang, #60, 250 µm | Thomas Scientific, Swedesboro, NJ, USA | 3383M45 | Zeven van de tweede fractie (3x) tijdens het malen |
| Thermomixer, 5350 Mixer | Eppendorf North America, Enfield, CT, USA | 05-400-200 | Analyse van zevenexperimenten |
| FT-IR Spectrum Two, spectrometer met geattenueerde totale reflectie (ATR) | Perkin Elmer, Waltham, MA, USA | L1050228 | Meten van FTIR-spectra |
| Glazen beker, 1000 mL | DWK Life Sciences, Milville, NJ, USA | 02-555-113 | Roeren van MPs-water suspensie voor het malen |
| Glazen voorplaat | Thomas Scientific, Swedesboro, NJ, USA | 3383N55 | Voorplaat voor Wiley Mini Mill |
| Glazen pot, 50 mL | Uline, Pleasant Prairie, WI, USA | S-15846P | Verzamelen van MPs na het malen |
| Handschoenenbox, neopreen | Bel-Art-SP Scienceware, Wayne, NJ, USA | BEL-H500290000 | 22-Inch, Maat 10 |
| Zetasizer Nano ZS 90 grootte-analyzer | Malvern Panalytical, Worcestershire, UK | Zetasizer Nano ZS | Meten van nanoplastics verspreid in DI-water |
| Microscoopcamera | Nikon, Tokyo, 108-6290, Japan | Nikon Digital Sight 10 | Gecombineerd met Olympus microscoop om digitale beelden te ontvangen |
| Microscoop | Olympus, Shinjuku, Tokyo, Japan | Model SZ 61 | Beeldvorming van MPs |
| Stiekproefvat, lage vorm dewar flacons | Cole-Palmer, Vernon Hills, IL, USA | UX-03771-23 | Opslag van vloeibare stikstof tijdens kryogene koeling |
| Accurate Blend 200, 12-snelheids blender | Oster, Boca Raton, FL, USA | 6684 | Beginnen met het verkleinen van de grootte van kryogene behandelde plastic film |
| PBAT film, - BioAgri™ (Mater-Bi®) | BioBag Americas, Inc, Dunedin, FL, USA | 0.7 mm dik | Grondstof om MPs en NPs te vormen, landbouw mulch film |
| PBAT pellets | Mobius, LLC, Lenoir City, TN, USA | Diameter 3 mm | Grondstof om microplastics (MPs) en nanoplastics (NPs) te vormen door middel van malen en slijpen |
| Plastiek centrifugebuizen, 50 mL | Fisher Scientific, Waltham, MA, USA | 06-443-18 | Centrifugatie van suspensie na nat-slijpen |
| Plastiek pot, 1000 mL, voorgereinigd, rechtzijdig | Fisher Scientific, Waltham, MA, USA | 05-719-733 | Verzamelen van NPs tijdens en na nat slijpen |
| Vierkante roerstaafjes, diameterø=8 mm, lengte=50.8 mm | Fisher Scientific, Waltham, MA, USA | 14-512-127 | Roeren van MPs suspensie voorafgaand aan nat-slijpen |
| Schaar, titanium gebonden | Westcott, Shelton, CT, USA | 13901 | Snijden van initiële PBAT film grondstoffen |
| Vierkante glazen cel met vierkante opening en dop, 12 mm O.D. | Malvern Panalytical, Worcestershire, UK | PCS1115 | Meten van NPs deeltjesgrootte |
| Roestvrijstalen bodem, 3 inch, pan | Hogentogler & Co. Inc, Columbia, MD, USA | 8401 | Voor zeven na Wiley-maling |
| Roestvrijstalen zeef, 3 inch, No. 140 (106 µm) | Hogentogler & Co. Inc, Columbia, MD, USA | 1308 | Voor zeven na Wiley-maling |
| Roestvrijstalen zeef, 3 inch, No. 20 (850 µm) | Hogentogler & Co. Inc, Columbia, MD, USA | 1296 | Zeven van MPs na Wiley-maling |
| Roestvrijstalen zeef, 3 inch, No. 325 (45 µm) | Hogentogler & Co. Inc, Columbia, MD, USA | 1313 | Zeven van MPs na Wiley-maling |
| Roestvrijstalen zeef, 3 inch, No. 60 (250 µm) | Hogentogler & Co. Inc, Columbia, MD, USA | 1303 | Zeven van MPs na Wiley-maling |
| Roestvrijstalen bovendeksel, 3 inch | Hogentogler & Co. Inc, Columbia, MD, USA | 8406 | Zeven van MPs na Wiley-maling |
| Roestvrijstalen pincet | Global Industrial, Port Washington, NY, USA | T9FB2264892 | Overbrengen van bevroren filmdeeltjes uit pot naar blender |
| Vakuumoven, model 281A | Fisher Scientific, Waltham, MA, USA | 13-262-50 | Vakuumoven om NPs te drogen na nat-slijpen |
| Frictie-slijpmachine, Supermass Colloider | Masuko Sangyo, Tokyo, Japan | MKCA6-2J | Slijpmachine om NPs te vormen van MPs |
| Nat-slijpsteen, korrelgrootte: 297 μm -420 μm | Masuko Sangyo, Tokyo, Japan | MKE6-46DD | Slijpsteen om NPs te vormen van MPs |
| Wiley Mini Mill, roterende snijmolen | Thomas Scientific, Swedesboro, NJ, USA | NC1346618 | Groottereductie van pellets en film in MPs en NPs |
| Software | |||
| FTIR-Spectroscopie software | Perkin Elmer, Waltham, MA, USA | Spectrum 10 | Verzamelen van spectra van |
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.