Het muismodel van gedeeltelijke 2/3 (66%) hepatectomie is goed beschreven in de literatuur, maar meer uitgebreide hepatectomieën die het klein-voor-grootte-syndroom na levertransplantatie nabootsen, zijn zelden gebruikt. We beschrijven een uitgebreide hepatectomieprocedure van 78% in een muismodel die resulteert in ongeveer 50% postoperatieve letaliteit bij gezonde muizen.
Een abonnement op JoVE is vereist om deze inhoud te bekijken. Log in of start vandaag met uw gratis proefperiode.
Methodenartikel
Uitgebreide hepatectomie van 78% in een chirurgisch muismodel
In dit artikel
Samenvatting
Samenvatting
Gedeeltelijke 2/3 hepatectomie bij muizen wordt gebruikt in onderzoek om het regeneratieve vermogen van de lever te bestuderen en de resultaten van leverresectie in een aantal ziektemodellen te onderzoeken. Bij de klassieke gedeeltelijke 2/3 hepatectomie bij muizen worden twee van de vijf leverkwabben, namelijk de linker- en mediane kwabben die ongeveer 66% van de levermassa vertegenwoordigen, en bloc verwijderd met een verwachte postoperatieve overleving van 100%. Agressievere gedeeltelijke hepatectomieën zijn technisch uitdagender en zijn daarom zelden bij muizen gebruikt. Onze groep heeft een muismodel ontwikkeld van een uitgebreide hepatectomietechniek waarbij drie van de vijf leverkwabben, waaronder de linker, mediane en rechter bovenkwabben, afzonderlijk worden verwijderd om ongeveer 78% van de totale levermassa te verwijderen. Deze uitgebreide resectie, bij verder gezonde muizen, laat een restlever achter die niet altijd een adequate en tijdige regeneratie kan ondersteunen. Het niet regenereren resulteert uiteindelijk in 50% postoperatieve letaliteit binnen 1 week als gevolg van fulminant leverfalen. Deze procedure van uitgebreide 78% hepatectomie bij muizen vertegenwoordigt een uniek chirurgisch model voor de studie van het small-for-size-syndroom en de evaluatie van therapeutische strategieën om leverregeneratie en resultaten te verbeteren in de setting van levertransplantatie of uitgebreide leverresectie voor kanker.
Inleiding
Chirurgische leverresectiemodellen van muizen en ratten, voor het eerst beschreven in 1931, zijn de meest voorkomende experimentele modellen die worden gebruikt om de moleculaire basis van leverregeneratie te bestuderen. Ze kunnen ook nuttig zijn in translationeel wetenschappelijk onderzoek om strategieën te testen en te ontwikkelen om de resultaten te verbeteren na uitgebreide leverresectie of transplantatie van suboptimale levertransplantaten 1,2,3,4. Gedeeltelijke hepatectomieën (PH) bij muizen omvatten de verwijdering van ongeveer 2/3 (....
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Protocol
De methoden die in dit procedureprotocol worden beschreven, zijn goedgekeurd door het Institutional Animal Care and Use Committee (IACUC) van het Beth Israel Deaconess Medical Center (BIDMC). Alle experimenten werden voltooid in overeenstemming met en in overeenstemming met de IACUC en de richtlijnen van de BIDMC-faciliteit voor dierproeven.
1. Preoperatieve voorbereiding van de muis
- Scheer de buik van de muis van het midden van het borstbeen tot het suprapubische gebied met een tondeuse.
- Induceer algemene anesthesie met 1-4% isofluraan in 100% zuurstof. Wanneer verdoofd, plaatst u de muis op zijn rug op....
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Resultaten
Een succesvolle uitgebreide hepatectomie van 78% zal naar verwachting binnen 1 week 50% mortaliteit veroorzaken bij gezonde volwassen muizen in de leeftijd van 8-12 weken16. Bij goed uitgevoerde uitvoering wordt minimaal bloedverlies verwacht. Resterende bloedingen die aanhouden, kunnen worden gecontroleerd door handmatige druk. Perioperatieve dood binnen 24 uur na de operatie wordt vaak veroorzaakt door technische fouten. Technische storingen zijn onder meer onbedoeld letsel aan grote bloedvaten .......
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Discussie
Om met succes een uitgebreide hepatectomie van 78% uit te voeren die 50% dodelijkheid bij muizen veroorzaakt, is het van cruciaal belang dat elke leverkwab nauwkeurig wordt verwijderd. Dit niveau van competentie en precisie kan alleen worden bereikt als de procedure herhaaldelijk wordt uitgevoerd. De trainingscurve varieert tussen operators, maar vereist doorgaans 3-6 maanden oefening. Een leverresectie die minder dan 78% van de TLM verwijdert, zou resulteren in hogere overlevingskansen, terwijl een leverresectie die mee.......
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Openbaarmakingen
Er zijn geen belangenconflicten om bekend te maken.
Dankbetuigingen
Dit werk werd ondersteund door NIH R01-beurzen DK063275 en HL086741 aan CF. PB en TA ontvangen een NRSA-fellowship van de NHLBI T32-trainingsbeurs HL007734.
....Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Materialen
| Naam | Bedrijf | Catalogusnummer | Opmerkingen |
|---|---|---|---|
| 2 x 2 Gauze | Covidien | 2146 | Chirurgie: dissectie |
| 5-O Nylon Monofilament Suture | Oasis | 50-118-0631 | Chirurgie: huid sluiting |
| 5-O Silk Suture | Fine Science Tools | 18020-50 | Chirurgie: leverkwab ligatie |
| 5-O Vicryl Suture | Ethicon | NC9335902 | Chirurgie: buikwand sluiting |
| Addson Forceps | Braintree Scientific | FC028 | Chirurgie: dissectie |
| Alcohol Swabs (2) | BD | 326895 | Ontsmettingsmiddel |
| Buprenorphine Extended Release Formulation | Zoopharm | N/A | Pijnstilling |
| Cordless Trimmer | Braintree Scientific | CLP-9868-14 | Scherven |
| Curved Forceps | Braintree Scientific | FC0038 | Chirurgie: dissectie |
| Hemostat | Braintree Scientific | FC79-1 | Chirurgie: dissectie |
| Isoflurane Inhalant Anesthetic | Patterson Veterinary | RXISO-250 | Algemene anesthesie |
| Magnet Fixator (2-slot) (2) | Braintree Scientific | ACD-001 | Chirurgie: voor kleine retractors |
| Magnet Fixator (4-slot) | Braintree Scientific | ACD-002 | Chirurgie: voor kleine retractors |
| Microscissors | Braintree Scientific | SC-MI 151 | Chirurgie: dissectie |
| Operating tray | Braintree Scientific | ACD-0014 | Chirurgie: voor het vaststellen van chirurgisch veld |
| Povidone Iodine 10% Swabstick (2) | Medline | MDS093901ZZ | Ontsmettingsmiddel |
| Scalpel (15-blade) | Aspen Surgical Products | 371615 | Chirurgie: dissectie |
| Sharp Scissors (Curved) | Braintree Scientific | SC-T-406 | Chirurgie: dissectie |
| Sharp Scissors (Straight) | Braintree Scientific | SC-T-405 | Chirurgie: dissectie |
| Small Cotton-Tipped Applicators | Fisher Scientific | 23-400-118 | Chirurgie: dissectie |
| Tissue Forceps (Straight x2) | Braintree Scientific | FC1001 | Chirurgie: dissectie |
| Warming Pad (18" x 26") | Stryker | TP 700 | Verwarming |
| Warming Pad Pump | Stryker | TP 700 | Verwarming |
| Wire Handle Retractor (2) | Braintree Scientific | ACD-005 | Chirurgie: om de blootstelling van de buikholte te vergemakkelijken |
| Xenotec Isoflurane Small Animal Anesthesia System | Braintree Scientific | EZ-108SA | Algemene anesthesie: bevat Isoflurane vaborizer & console, Inductiekamer, Regulator/Slang, Gezichtsmasker (M) |
Referenties
- Martins, P. N., Theruvath, T. P., Neuhaus, P. Rodent models of partial hepatectomies. Liver Int. 28 (1), 3-11 (2008).
- Higgins, G., Anderson, R. Experimental pathology of the liver I. Restoration of the liver of the white rat following partial surgical removal.
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Herprints en machtigingen
