$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
Emulsies zijn heterogene systemen die bestaan uit twee niet-mengbare vloeistoffen, waarbij de ene vloeistof als druppeltjes in de andere wordt gedispergeerd. Deze systemen zijn alomtegenwoordig in verschillende industrieën, waaronder voeding, farmaceutica1, cosmetica en petrochemie. De stabiliteit en functionaliteit van emulsies zijn kritisch afhankelijk van de interacties tussen druppels, die kunnen worden beïnvloed door verschillende factoren, zoals oppervlaktechemie, omgevingsomstandigheden en de aanwezigheid van enzymen2.
In veel toepassingen, met name in de voedingswetenschap en de afgifte van medicijnen, worden emulsies blootgesteld aan enzymatische omgevingen 3,4. In het menselijke spijsverteringsstelsel komen bijvoorbeeld ingenomen voedingsmiddelen en medicijnen op basis van emulsie verschillende enzymen tegen die hun structuur en functie kunnen veranderen. Inzicht in de dynamiek van druppelinteracties tijdens enzymatische vertering is cruciaal voor het ontwerpen van stabiele en effectieve producten op basis van emulsie 5,6.
Traditionele methoden voor het bestuderen van de stabiliteit van de emulsie 2,7, zoals lichtverstrooiing of reologische metingen, leveren waardevolle bulkinformatie op, maar kunnen interacties tussen individuele druppels niet direct waarnemen en kwantificeren8. Deze beperking heeft het begrip belemmerd van de processen op microschaal die plaatsvinden tijdens de enzymatische vertering van emulsies.
Optische pincetten zijn naar voren gekomen als een krachtig hulpmiddel voor het manipuleren van microscopisch kleine objecten en het meten van krachten op micro- en nanoschaal9. Door gebruik te maken van het momentum van licht, kan een optisch pincet individuele druppels met uitzonderlijke precisie opvangen en verplaatsen. Deze mogelijkheid opent nieuwe mogelijkheden voor het bestuderen van druppel-druppelinteracties in complexe omgevingen 10,11.
Dit protocol presenteert een unieke methode die een dubbel optisch pincet combineert met real-time krachtmetingen om de interacties tussen emulsiedruppels tijdens enzymatische vertering te onderzoeken. Als representatief voorbeeld wordt de methode gedemonstreerd met behulp van een emulsiesysteem dat bestaat uit koolzaadolie of een vetdruppel gestabiliseerd door wei-eiwit, die wordt verteerd door trypsine. Dit modelsysteem is met name relevant voor voedingswetenschap en voeding, omdat het veel voorkomende voedselemulsies en hun gedrag in het spijsverteringskanaal nabootst12.
De aanpak maakt directe observatie en kwantificering van krachten tussen individuele druppeltjes mogelijk terwijl ze enzymatische afbraak ondergaan, wat ongekende inzichten oplevert in de dynamiek van emulsiestabiliteit onder spijsverteringsomstandigheden. De methode maakt gebruik van het optische pincetsysteem, een state-of-the-art dual-trap optische pincetopstelling, om emulsiedruppels te manipuleren en de krachten tussen de druppels met hoge precisie te meten13.
Deze experimentele techniek overbrugt de kloof tussen bulkemulsiestudies en onderzoeken op moleculair niveau en biedt een uniek perspectief op het gedrag van emulsies tijdens enzymatische vertering. De inzichten die met deze methode worden verkregen, hebben verstrekkende implicaties voor verschillende gebieden, waaronder voedseltechnologie, farmaceutische formuleringen en fundamentele colloïdwetenschap. Hoewel een specifiek olie-eiwit-enzymsysteem als voorbeeld wordt gebruikt, kan de hier gepresenteerde methodologie worden aangepast om een breed scala aan organische emulsiesystemen en spijsverteringsenzymen in verschillende industrieën te bestuderen.