Een abonnement op JoVE is vereist om deze inhoud te bekijken. Log in of start vandaag met uw gratis proefperiode.
Onderzoeksartikel
We presenteren een enkel-centra, pathologie-gevalideerde workflow voor borstkankerpatiënten (BC) die een tweede primaire longkanker (pLC) ontwikkelen. Grotere primaire tumorgrootte en een hoger Ki-67 definiëren risico, terwijl cohortniveau OS en iDFS vergelijkbaar blijven. De bevindingen ondersteunen risicogestratificeerde borstbeeldvorming en vroege pathologische correlatie in follow-up.
We voerden een retrospectieve studie uit met één centrum bij patiënten met borstkanker (BC) die een tweede primaire longkanker (pLC) ontwikkelden (BC-pLC; n = 54) versus alleen BC (n = 216) die curatieve intentiechirurgie ondergingen van 2012 tot 2017, met vervolg tot 30 juni 2023. Kliniopathologische variabelen werden vergeleken; multivariabele logistische regressie schatte correlaten van BC-pLC; de overleving werd beoordeeld met Kaplan-Meier-schattingen en Cox-proportional-hazardsmodellen. In vergelijking met BC had de BC-pLC-cohort hogere frequenties van oestrogeenreceptor-negatieve (ER-negatiefe) en progesteronreceptor-negatieve (PR-negatieve) tumoren en meer Ki-67-positieve tumoren; na multipliciteitsaanpassing (Bonferroni) bleven ER-negativiteit en Ki-67-positiviteit significant, terwijl humane epidermale groeifactorreceptor 2 (HER2) dat niet deed. In multivariabele analyses waren grotere tumorgrootte (>2 cm) en Ki-67-positiviteit onafhankelijk geassocieerd met BC-pLC (odds ratio [OR] 3,02, 95% BI 1,29-7,38; OR 3,10, 95% BI 1,32-7,49). Op cohortniveau waren verschillen in algehele overleving (OS) en invasieve ziektevrije overleving (iDFS) tussen BC-pLC en BC na aanpassing niet statistisch significant. Biomarker-gestratificeerde analyses toonden slechtere OS-tumoren voor ER-negatieve tumoren en nominaal betere iDFS voor Ki-67-negatieve tumoren. Tumorlast en proliferatieve activiteit kunnen risicogestratificeerde beeldvorming van de borst en vroege pathologische correlatie sturen om metastasen te onderscheiden van nieuwe primaire tijdens de follow-up van de BC.
Borstkanker (BC) is een van de meest voorkomende maligniteiten wereldwijd, en vooruitgang in screening en therapie heeft de overleving verlengd, waardoor de kans op meerdere primaire kankers toeneemt; opmerkelijk is dat het risico op een tweede primaire longkanker (pLC) hoger is bij BC-overlevenden dan bij de algemene bevolking1. Longkanker (LC) blijft een belangrijke oorzaak van kankersterfte, met een aanhoudend lage overleving van 5 jaar ondanks therapeutische vooruitgang 2,3. Geslachtsspecifieke patronen worden steeds vaker herkend: het aandeel LC bij vrouwen is gestegen, en tumoren bij vrouwen bevatten vaker bruikbare veranderingen zoals EGFR-mutaties 4,5. Het hormonale milieu (bijv. oestrogeensignalering) en leeftijd – beide vastgestelde kankerverwekkende factoren – kunnen bijdragen aan het verhoogde LC-risico dat wordt waargenomen bij anticonceptie-overlevenden, naast gedeelde blootstellingen (tabak, bestraling, familiegeschiedenis), behandelingsgerelateerde effecten, erfelijke vatbaarheid en overlappende oncogene routes (EGFR, KRAS, TP53, BRCA1)6.
BC met tweede primaire LC (BC-pLC) kan synchroon (gedetecteerd tijdens de BC-diagnostische onderzoek) of metachronisch (opkomen maanden tot jaren na BC) optreden. In de praktijk zijn diagnose en behandeling uitdagend. Een aanzienlijk deel van de gevallen wordt voor het eerst opgemerkt als longknobbels op routinematige CT-scans van de borst na anticonceptiebehandeling, maar radiologische verschijningen van pLC- en longmetastasen door BC overlappen vaak, wat leidt tot een aanvankelijke verkeerde classificatie en vertraging in definitieve weefseldiagnose 8,9. Ongeveer een derde van de BC-pLC-gevallen is synchroon (diagnostisch interval <6 maanden)10. Behandelingssequencing (borst-eerst versus long-eerst) kan perioperatief risico en adjuvante opties beïnvloeden, maar gestandaardiseerde richtlijnen blijven beperkt en de gerapporteerde 5-jaarsoverleving varieert per serie, deels als gevolg van verschillen in selectie en behandeling.
Multicenterregisters bieden breedte en statistische kracht, maar retrospectieve analyses van één centrum bieden unieke diepgang: geharmoniseerde beeldvormingspaden, uniforme pathologieworkflows en beoordeling door een toegewijd multidisciplinair team maken fijnmazige klinisch-pathologische validatie mogelijk met intern consistente langdurige follow-up11. Deze kenmerken zijn vooral waardevol bij het onderscheiden van intrathoracale metastase van een tweede primaire metastase, waar kleine classificatiefouten de uitkomsten en behandelingsbeslissingen kunnen verstoren. We erkennen echter dat enkel-centrum ontwerp de generaliseerbaarheid beperkt ten opzichte van cohorten op registerschaal12.
Praktische toepasbaarheid. Door klinisch-pathologische correlaten van BC-pLC (bijv. primaire BC-tumorgrootte en Ki-67 proliferatieve index) te kwantificeren en overleving te rapporteren met duidelijke noemers en effectgroottes, streeft deze studie ernaar risico-stratificeerde CT-surveillance van de borst te ondersteunen, eerdere multidisciplinaire beoordeling van onbepaalde knobbels en weefselacquisitiestrategieën die zijn afgestemd op het onderscheiden van metastasen van nieuwe primairetumoren 13,14. In situaties waar beeldvormende bevindingen dubbelzinnig zijn, kunnen gemakkelijk beschikbare klinisch-pathologische signalen patiënten prioriteit geven voor een versnelde pathologische correlatie.
Tegen deze achtergrond probeerden we het klinisch-pathologische profiel van BC-pLC af te bakenen, factoren te identificeren die met het optreden geassocieerd zijn, en prognostische implicaties te beoordelen met behulp van Kaplan-Meier- en Cox-modellen voor algehele overleving (OS) en invasieve ziektevrije overleving (iDFS). Om de bijdrage van een enkel-centrum ontwerp transparant te positioneren, vullen we primaire analyses aan met intervalgestratificeerde en behandelingsgecorrigeerde modellen en stellen we methodologische voordelen en beperkingen duidelijk vast.
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Deze retrospectieve studie werd goedgekeurd door de ethische commissie van de instelling 2024YX070 en uitgevoerd in overeenstemming met de Verklaring van Helsinki. Gezien het niet-interventionele, gedeïdentificeerde karakter van de dataset en het minimale risico, werd informed consent volgens het institutionele beleid opgegeven. De gegevens werden opgeslagen op beveiligde, toegangsgecontroleerde servers, en de analyses gebruikten een geanonimiseerde, vergrendelde dataset met een controleerbaar spoor en een vooraf gespecificeerde datum voor gegevensbevriezing.
Studieontwerp en setting
We voerden een retrospectieve cohortstudie uit met één centrum, inclusief patiënten met borstkanker (BC) die een tweede primaire longkanker (pLC) ontwikkelden (BC-pLC) en alleen gelijktijdige patiënten met BC. Alle patiënten ondergingen tussen januari 2012 en januari 2017 een curatieve intentie-operatie, met vervolg tot 30 juni 2023. De BC-pLC-cohort vereiste pathologische bevestiging van zowel primaire anticonceptie- als primaire longkanker; de BC-cohort omvatte alleen patiënten met primaire anticonceptie. Er is geen propensity score matching uitgevoerd en wordt erkend als een beperking; Om selectiebias te beperken zijn covariaten vooraf gespecificeerd voor multivariabele aanpassing en worden transparant gerapporteerd. Synchrone BC-pLC werd gedefinieerd als een diagnostisch interval van ≤6 maanden tussen primaire en metachrone BC-pLC als >6 maanden. Een stroomdiagram dat screening, uitsluitingen, inclusie en analyses samenvat, wordt weergegeven in Figuur 1.
Toelatingscriteria en zaakbeoordeling
In aanmerking komende deelnemers waren ≥18 jaar oud met pathologisch bevestigde vroege primaire BC, beschikbare kern klinisch-pathologische variabelen, beeldvorming voor beoordeling en blokken/slides voor centrale pathologiebeoordeling indien gedimissioneerd. Patiënten werden uitgesloten als zij een gelijktijdige maligniteit op een andere locatie hadden, radiologisch of pathologisch bewijs van pulmonale metastase door BC, metastatische of recidiverende BC bij de indexdiagnose, of onvolledige follow-up gegevens. De classificatie van longlaesies als primaire longkanker in plaats van metastatische anticonceptie was gebaseerd op histomorfologie en, indien beschikbaar, op een immunofenotypisch profiel dat consistent is met longoorsprong (bijv. TTF-1/Napsin A voor adenocarcinoom en p40 voor plaveiseldifferentie). Dissonante of onbepaalde gevallen werden opgelost door multidisciplinaire consensus (borstoperatie, thoracale chirurgie, radiologie, pathologie).
Beeldvormingsprotocol en surveillance
Tijdens de anticonceptiezorg volgde de borstbeeldvorming institutionele trajecten die onder meer baseline staging-CT bij diagnose en surveillance-CT doorgaans elke 6-12 maanden gedurende de eerste 2-3 jaar omvatten, en daarna jaarlijks of eerder als symptomen of abnormale bevindingen tot beeldvorming leidden. Acquisitieparameters werden gestandaardiseerd volgens radiologieprotocollen. Omdat de intensiteit van de toezicht de detectie en de verdeling van de fasen kan beïnvloeden, werd mogelijke detectie-/doorlooptijdbias aangepakt in gevoeligheidsanalyses door rekening te houden met beeldintensiteit en kalenderperiode.
Pathologieworkflow en immunohistochemie
Tumormonsters werden vastgezet in neutraal gepufferde formaline, 4%, meestal 6-24 min/mm weefseldikte (conventioneel 6-24 uur voor routinemonsters), gedehydrateerd en paraffine-ingebed vóór de sectie. Secties van 3-4 μm werden gesneden en op geladen schuilen gemonteerd. Warmte-geïnduceerde epitoopwinning werd uitgevoerd met behulp van citratbuffer (pH 6,0) of EDTA-buffer (pH 9,0) bij 95-100 °C gedurende ongeveer 20 minuten, gevolgd door afkoeling bij kamertemperatuur gedurende 10 minuten. Primaire antilichamen voor ER, PR, HER2 en Ki-67 werden aangebracht volgens gevalideerde laboratoriumprotocollen met een typische incubatie van 30-60 minuten bij kamertemperatuur, polymergebaseerde secundaire detectie en DAB-ontwikkeling gedurende 5-10 minuten; De preparaten werden 30-60 seconden gecontrasteerd met hematoxyline, gedehydrateerd, schoongemaakt en gemonteerd. ER- en PR-positiviteit werden gedefinieerd als ≥1% tumorcel-nucleaire kleuring. HER2 volgde de ASCO/CAP 2018-criteria (3+ door IHC of versterking door in situ hybridisatie wanneer 2+ en dubbelzinnig). Ki-67 werd gedichotomiseerd met een vooraf gespecificeerde grens van 14%. Twee door de raad gecertificeerde pathologen beoordeelden onafhankelijk alle preparaten en de discrepanties werden bij consensus opgelost om de score te standaardiseren.
Bewaaromstandigheden voor biospecimen
Formaline-gefixeerde, paraffine-ingebedde (FFPE) blokken werden opgeslagen bij gecontroleerde kamertemperatuur (18-25 °C), droog en donker, met een luchtvochtigheid onder de 60%. Blokken werden volgens het institutionele beleid ≥10 jaar behouden, en opnieuw gesneden vanaf het oorspronkelijke blok werd uitgevoerd telkens wanneer de leeftijd van de sectie de vooraf gedefinieerde stabiliteitsvensters overschreed. Ongekleurde secties (3-4 μm) werden opgeslagen in afgesloten schuifdozen met droogmiddel, beschermd tegen licht. Voor immunohistochemie (ER, PR, Ki-67) werden ongekleurde glaasglaascellen gekoeld bij 2-8 °C en binnen 8 weken na het doorsnijden gekleurd; dia's die ouder waren dan deze drempel werden weggegooid en opnieuw gesneden. Voor in situ hybridisatie/FISH-bevestiging van onduidelijke HER2-resultaten werden ongekleurde glaasglaasjes binnen 2-4 weken na het doorsnijden gebruikt bij 2-8 °C opslag, of opnieuw gesneden als ze ouder waren. Opslagtemperatuur en doorsnijdingsdata werden geregistreerd in het laboratoriuminformatiesysteem, en eventuele afwijkingen veroorzaakten opnieuw snijden vóór het kleuren.
Dataverzameling en -beheer
Demografische en klinisch-pathologische variabelen werden uit het elektronische medisch dossier gehaald volgens een vooraf gedefinieerde datadictionary. Variabelen omvatten leeftijd bij diagnose, menopauzale status, hypertensie, familiegeschiedenis, grootte van de primaire tumor, histologisch subtype en gradatie, knooppuntstatus en aantal onderzochte klieren, lymfeovasculaire invasie en biomarkerstatus voor ER, PR, HER2 en Ki-67. Histologische subtypes en TNM-stadiëring werden beschrijvend samengevat in Tabel 1 en Tabel 2, met verduidelijkende voetnoten voor afkortingen en subgroepdefinities. Gegevenskwaliteitsprocedures bestonden uit controles van bereik en logica en bronverificatie door een tweede beoordelaar. Analyses werden gereproduceerd uit een vergrendelde dataset met een gedocumenteerd codeboek en manifest.
Uitkomsten en vervolg
De algehele overleving (OS) werd gemeten vanaf de datum van kankerdiagnose tot aan overlijden door welke oorzaak dan ook of de meest recente follow-up. Invasieve ziektevrije overleving (iDFS) werd berekend vanaf het einde van de curatieve behandeling tot het optreden van een invasieve terugkeer, de ontwikkeling van een nieuwe primaire maligniteit, of overlijden door niet-gerelateerde oorzaken. Patiënten die zonder gebeurtenissen leefden, werden bij het laatste contact gecensureerd. De follow-up vond plaats via telefonische contacten, kliniekbezoeken en het beoordelen van het elektronische medisch dossier tot 30 juni 2023. Oorzaak-specifieke sterfte werd niet beoordeeld; Er zijn daarom geen concurrerende risicoanalyses uitgevoerd, en deze beperking wordt vermeld in de Discussie.
Statistische analyse
Continue variabelen werden geëvalueerd op normaliteit met behulp van de Shapiro-Wilk-test en samengevat als mediaan (IQR) of gemiddelde (SD) indien van toepassing, en categorische variabelen als n (%). Groepsvergelijkingen gebruikten de t-test of Wilcoxon-rangsomtest en de chi-kwadraattest of de exacte test van Fisher waar van toepassing. Voor correlaten van BC-pLC werd univariabele logistische regressie gevolgd door multivariabele logistische regressie met a priori variabelen (tumorgroottecategorie, ER, PR, Ki-67), met overwegingen per variabele, variantie-inflatiefactoren voor collineariteit en standaard goodnessness-of-fit-diagnostiek. De overleving werd beoordeeld met Kaplan-Meier-schattingen en log-rank tests en met Cox proportional-hazards modellen die leeftijd, tumorgrootte, nodale status, ER, PR, HER2, Ki-67 en cohort vooraf specificeerden (BC-pLC versus BC). Proportionele hazards-aannames werden geëvalueerd met behulp van Schoenfeld-residuen. Ontbrekende gegevens werden behandeld met volledige casusanalyse, en de mate van ontbreken wordt weerspiegeld in noemers. Gegeven meerdere biomarkervergelijkingen tussen ER, PR, HER2 en Ki-67, gebruikte familie-gewijze foutcontrole Bonferroni-aanpassing met een aangepaste ɑ van 0,0125, en werden ook nominale tweezijdige P-waarden gerapporteerd. Alle P-waarden in de tekst en tabellen worden gekoppeld aan effectgroottes en 95% betrouwbaarheidsintervallen.
Gevoeligheids- en robuustheidsanalyses
Robuustheid werd onderzocht met intervalgestratificeerde overlevingsanalyses die synchrone gevallen vergeleken met metachrone gevallen gecategoriseerd als ≤12 maanden, 13-36 maanden en >36 maanden, waarbij aangepaste hazard ratio's werden gerapporteerd naast 95% betrouwbaarheidsintervallen en nominale P-waarden. Een baanbrekende aanpak van 12 maanden werd gebruikt om garantie-tijdbias te beperken waarbij postoperatieve of adjuvante therapieën anders de tijd-tot-gebeurtenis schattingen zouden kunnen vertekenen. Extra modellen zijn aangepast voor behandelklassen waar beschikbaar, waaronder type longchirurgie, blootstelling aan radiotherapie en systemische therapiecategorieën (chemotherapie, gerichte therapie, immunotherapie). Gevoeligheidsanalyses hielden verder rekening met beeldvormingsintensiteit en kalenderperiode om potentiële detectie- en seculier-trend biases aan te pakken.
Controlepunten voor reproduceerbaarheid
Belangrijke controlepunten die de reproduceerbaarheid beïnvloeden, waren onder andere expliciete beoordelingscriteria die primaire longkanker onderscheidden van uitgezaaide anticonceptie, vooraf bepaalde drempels voor ER, PR, HER2 en Ki-67, dubbele onafhankelijke pathologie-uitingen met consensusresolutie, transparante rapportage van beeldvormingsintensiteit en a priori covariaatspecificatie met meervoudigheidscontrole. Eventuele afwijkingen van het protocol werden gedocumenteerd, inclusief de onderbouwing en een beoordeling van hun mogelijke impact op de resultaten.
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Basiskenmerken
Het patiëntselectiepad is weergegeven in Figuur 1. De basislijn-klinisch-pathologische kenmerken worden samengevat in Tabel 1. De mediane leeftijd was 51 jaar (IQR 45-59) in de BC-cohort en 52 jaar (IQR 46-60) in de BC-pLC-cohort. In vergelijking met BC had de BC-pLC-cohort grotere primaire borsttumoren en een hoger aandeel T2-T4-ziekte; Nodale metastasen kwamen iets vaker voor bij BC-pLC. ...
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
De toenemende erkenning van meerdere primaire kankers weerspiegelt vooruitgang in beeldvorming, therapieën en longitudinale surveillance, gecombineerd met een langere overlevingstijd en de wisselwerking van genetische en omgevingsfactoren15,16. Met behulp van routinematig verzamelde klinisch-pathologische gegevens karakteriseerde deze studie borstkanker met een tweede primaire longkanker (BC-pLC) en onderzocht het correlaties van...
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
De auteurs verklaren dat zij geen concurrerende financiële belangen hebben.
Er werd geen specifieke financiering ontvangen van publieke, commerciële of non-profitorganisaties. De auteurs bedanken de afdelingen Pathologie en Cardiothoracale Chirurgie voor hun hulp bij de beoordeling van casussen en het beoordelen van de slides.
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
| Naam | Bedrijf | Catalogusnummer | Opmerkingen |
|---|---|---|---|
| Coverslips | Fisher Scientific | 12?545?10 | Gebruikt om gekleurde weefselsecties te bedekken voor microscopie |
| DAB Chromogen | Thermo Fisher Scientific | K346711 | Gebruikt voor de kleurontwikkeling in immunohistochemie |
| Oestrogeen Receptor (ER) Antilichaam | Thermo Fisher Scientific | MA1?10066 | Monoklonaal antilichaam voor ER-eiwitdetectie RRID: AB_2252608 |
| Fluorescentie In-Situ Hybridisatie (FISH) Kit | Abbott | 32?10030 | Voor bevestigende HER2-amplificatiestudies |
| Formaline (4% Geneutraliseerd Gebufferd) | Neomarkers, USA | – | Voor weefselfixatie in histopathologische studies |
| HER2 Antilichaam | Dako / Agilent | A0485 | Monoklonaal antilichaam voor HER2-eiwitdetectie RRID: AB_2252608 |
| Immunohistochemische Kleuring Kit | Neomarkers, USA | – | Voor het uitvoeren van IHC-tests op tumormonsters |
| Ki67 Antilichaam | Dako / Agilent | M7240 | Monoklonaal antilichaam voor Ki67-eiwitdetectie RRID: AB_2341197 |
| Microtoom | Leica | RM2255 | Voor het snijden van in paraffine ingebedde weefselmonsters |
| Montage Media | Sigma-Aldrich | M2681 | Gebruikt voor het plaatsen van weefselsecties op glazen platen |
| Paraffine | Sigma-Aldrich | P?6001 | Gebruikt voor weefselinbedding in histologie |
| Progesteron Receptor (PR) Antilichaam | Thermo Fisher Scientific | MA1?10176 | Monoklonaal antilichaam voor PR-eiwitdetectie |
| SPSS v23.0 |
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.