Onderzoeksartikel

Een bioactief bestanddeel van de aconitumpendule vermindert reumatoïde artritis-gerelateerde ontsteking bij ratten via de regulatie van de PI3K/Akt-route.

DOI:

10.3791/70473

⸱

21 april 2026

 ,  ,  ,  ,  ,  , 
1School of Pharmacy, Qinghai MinZu University, 2Qinghai Modern Plateau Biomedical Industry Institute, 3Qinghai Institute of Tibetan Medicine, 4Qinghai Provincial Key Laboratory of Plant Resource Chemistry on the Tibetan Plateau

In dit artikel

Samenvatting

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Met behulp van netwerkfarmacologie en moleculaire docking werden antireumatoïde artritis (RA) componenten van A. pendulum geïdentificeerd. In vivo studies toonden aan dat diterpenealkaloïden, vooral smirnotine A, RA-symptomen bij ratten verlichten via de PI3K/Akt-route.

Samenvatting

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

In de traditionele Chinese geneeskunde en diverse etnische medische praktijken worden de wortels van Aconitum pendulum N. Busch vaak gebruikt vanwege hun vermogen om meridianen uit te baggeren, reuma te verminderen, de bloedcirculatie te bevorderen en artralgie te verlichten. Als gevolg hiervan is deze medicinale plant een gerespecteerde behandeling geworden voor verstuikingen en reumatische aandoeningen in verschillende etnische medische systemen. Deze studie onderzocht de mechanismen waarmee zes eerder geïsoleerde verbindingen van A. pendulum reumatoïde artritis (RA)-gerelateerde ontstekingen verzachten, zowel in vitro als in vivo . Een combinatie van technieken, waaronder netwerkfarmacologie, moleculaire docking, enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA), hematoxyline- en eosinekleuring (H&E), kwantitatieve real-time polymerase kettingreactie (q-PCR) en western blot (WB), werd toegepast. De resultaten toonden aan dat smirnotine A, een van de zes verbindingen, RA-symptomen verlicht door zich te richten op de PI3K/Akt-signaalroute en de ontstekingsreactie te onderdrukken. Deze bevindingen vormen een wetenschappelijke basis voor het begrijpen van de materiële basis en de mechanistische werking die ten grondslag liggen aan het traditionele gebruik van A. pendulum bij de behandeling van RA.

Inleiding

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Reumatoïde artritis (RA) is een chronische auto-immuunziekte die wordt gekenmerkt door synoviale ontsteking, hyperplasie van de synoviale bekleding, infiltratie van immuuncellen, vorming van invasief pannusweefsel en de daaruit voortvloeiende gewrichtsvernietiging 1,2,3. Met een wereldwijde prevalentie van 0,5%–1% vormt RA een aanzienlijke last voor de volksgezondheid en heeft het een ernstige impact op de kwaliteit van leven van patiënten 4,5,6,7. Conventionele therapieën—zoals methotrexaat (MTX), glucocorticoïden, Januskinase (JAK)-remmers en niet-steroïde ontstekingsremmers (NSAID's)—worden vaak beperkt door bijwerkingen en variabele patiëntenrespons, wat de noodzaak van nieuwe behandelingen benadrukt8.

Natuurlijke producten, met name alkaloïden, hebben aandacht gekregen vanwege hun multi-doelmechanismen en gunstige veiligheidsprofielen bij RA-beheer. Alkaloïden zoals berberine, sinomenine en matrine moduleren belangrijke ontstekingsroutes, waaronder mitogeen-geactiveerde protenekinase (MAPK), nucleaire factor kappa B (NF-κB), fosfatidylinositol 3-kinase/eiwitkinase B (PI3K/Akt), en Janus-kinase/signaaltransducator en transcriptie-activator (JAK/STAT) en downreguleren cytokines zoals tumornecrose factor alpha (TNF-α), Interleukine (IL)-1β en IL-6, wat therapeutisch potentieel9 aantoont, 10.

In de Tibetaanse geneeskunde wordt RA geclassificeerd als brum bu (vochtartralgie), toegeschreven aan een onevenwicht van de drie humoren en ophoping van onvolwassen geel water in de voegen11,12 (Figuur 1). Aconitum pendulum N. Busch is een traditioneel gebruikt kruid om vocht uit te voeren, de bloedsomloop te bevorderen en pijn te verlichten 13,14. Meer dan 50 klassieke Tibetaanse formuleringen die dit kruid bevatten zijn gedocumenteerd, met een geschiedenis van klinisch gebruik die meer dan 300 jaarbeslaat. Toch blijven de bioactieve componenten en mechanismen slecht gekarakteriseerd.

Hier combineren we netwerkfarmacologie en moleculaire koppeling om de anti-RA-bestanddelen van Aconitum pendulum N. Busch en hun potentiële doelwitten en routes te voorspellen. Deze voorspellingen worden vervolgens experimenteel gevalideerd (Figuur 2). Deze geïntegreerde benadering heeft als doel de materiële basis en mechanistische fundamenten van Aconitum pendulum N. Busch in RA-behandeling te verduidelijken, en zo een basis te bieden voor toekomstige geneesmiddelontwikkeling.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Vijftig specifieke ziekteverwekkervrije (SPF) mannelijke Sprague-Dawley ratten (met een gewicht van 180–200 g) werden geleverd door het Hubei Provincial Center for Disease Control and Prevention (Hubei Provinciale Academie voor Preventieve Geneeskunde) (Wuhan, China; Dierenvergunning nr. SCXK(JB) 2023-0005). Alle experimentele procedures met dieren werden uitgevoerd in strikte overeenstemming met de National Institutes of Health Guide for the Care and Use of Laboratory Animals (8e editie, 2011). Het studieprotocol werd beoordeeld en goedgekeurd door de Ethical Committee voor Experimentele Dieren van Tianjin Genink Biological Technology Co., Ltd. (Goedkeuringsnummer GENINK-20250074). Belangrijke reagentia en apparatuur die in deze studie zijn gebruikt, staan vermeld in de bijgevoegde Materiaaltabel.

Celkweek
De humane reumatoïde artritis (RA) cellijn MH7A werd gekweekt in Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) medium, aangevuld met 10% (v/v) foetaal rundereserum (FBS) en gehandhaafd op 37 °C in een bevochtigde incubator met 5% CO₂17.

Dieren en behandelingen
Dieren werden gehouden in een standaard specifiek pathogeervrije (SPF) faciliteit met een individueel geventileerd kooisysteem (IVC) onder streng gecontroleerde omgevingsomstandigheden: een klimaatgecontroleerde temperatuur van 21,0–25,0 °C, relatieve luchtvochtigheid van 40–70%, een 12 uur lange fotoperiode en volledige luchtvernieuwing 15 keer per uur. Na een acclimatisatieperiode van 7 dagen werden ratten willekeurig verdeeld in zes experimentele groepen, met extra ratten als reserve voor onvoorziene omstandigheden. Een acuut inflammatoire adjuvante artritis (AA) model werd geïnduceerd door subcutane injectie van 100 μL volledige Freund's adjuvant (CFA; 10 mg·mL-1) in de rechterachterpoot18. De experimentele groepen waren als volgt opgesteld: een blanco controlegroep, een AA-modelgroep, een positieve controlegroep (methotrexaat, 0,9 mg·kg-1)19, en drie smirnotine A-behandelingsgroepen toegediend op lage (0,962 mg·kg-1), middel- (1,923 mg·kg-1) en hoge dosis (3,846 mg·kg-1) niveaus gebaseerd op de IC₅₀-waarde.

Voorspelling van ziekte en verbindingdoelen
Op basis van voorlopige activiteitsscreening uitgevoerd door onze onderzoeksgroep werden zes verbindingen geselecteerd die gunstige bioactiviteit aantonen: vijf diterpenoïdalkaloïden (Figuur 3), benzoylaconine (1), 14-benzoyl-8-O-methylaconine (2), (−)-(A-b)-14α-benzoyloxy-N-ethyl-13β, 15α-dihydroxy-1α,6α,8β,16β,18-pentamethoxyaconitaan (3), smirnotine A (4) en aconitine (5), samen met één coumarin-derivaat, scopolinene (6)20. De vereenvoudigde moleculaire input-lijninvoersysteem (SMILES) notaties van deze verbindingen zijn opgehaald uit de PubChem-database (https://pubchem.ncbi.nlm. nih.gov/) of gegenereerd met ChemDraw 18.0. Deze notaties werden vervolgens geïmporteerd in de SwissTargetPrediction-database (https://swisstargetprediction.ch/), waarbij de soort werd gespecificeerd als "Homo sapiens". Potentiële doelwitten werden geïdentificeerd door genen te selecteren met een waarschijnlijkheidswaarde > 0, en de bijbehorende doelnamen en UniProt-ID's werdenverzameld 21,22.

PPI-netwerken
De overlappende doelgenen werden geanalyseerd door een eiwit-eiwitinteractie (PPI) netwerk met behulp van de STRING-database (https://string-db.org/)23. De resulterende TSV-geformatteerde data werd vervolgens geïmporteerd in Cytoscape 3.9.1 voor verdere visualisatie en analyse. Topologische parameters van het netwerk werden berekend met behulp van de ingebouwde Network Analyzer-plugin . In het gevisualiseerde netwerk werden knooppuntgrootte en kleurintensiteit in kaart gebracht naar de graadwaarde, terwijl de randdikte de sterkte van de interactie tussen doelen weerspiegelde. Kerndoelen werden geïdentificeerd en gerangschikt op basis van hun associatiegraad24.

Analyse van de verrijking van de genen-encyclopedia (KEGG) van de genontologie (GO) en de Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes (KEGG)
De gemeenschappelijke doelen werden ingediend bij de Metascape-database (https://metascape.org) voor GO- en KEGG-padverrijkingsanalyses25. Functionele resultaten werden gevisualiseerd met behulp van het WeiShengXin bio-informaticaplatform (https://www.bioinformatics.com.cn).

De netwerkconstructie van de "geneesmiddel-actieve componenten-ziekte-doel-routes"
Actieve componenten en hun bijbehorende doelen werden systematisch gescreend, gevolgd door functionele verrijkingsanalyse om belangrijke signaalroutes en hun bijbehorende doelen te identificeren. Deze elementen werden vervolgens geïntegreerd met behulp van Cytoscape 3.9.1 om een uitgebreid netwerk van "geneesmiddel–actieve componenten–ziekte–doelwitten–routes" op te bouwen. Topologische analyse werd vervolgens uitgevoerd met de Network Analyzer-tool, waarbij knooppunten werden gerangschikt op basis van sleutelparameters, waaronder Graad en Betweenness, om centrale elementen binnen het netwerk te identificeren.

Moleculaire koppeling van belangrijke verbindingen aan kerndoelen
De driedimensionale structuren van kerndoeleiwitten, waaronder ESR1 (9BQE), PTGS2 (5F19), EGFR (2XKN), GSK3B (5HLN), SRC (5MTJ) en ERBB2 (8U8X), zijn opgehaald uit de RCSB Protein Data Bank (http://www.rcsb.org/; geraadpleegd op 7 mei 2025). Samengestelde structuren werden geconstrueerd in ChemDraw (versie 18.0) en vervolgens omgezet naar driedimensionaal SDF-formaat met behulp van de geïntegreerde Chem3D-module. De moleculaire koppelingsresultaten werden visualiseerd met PyMOL, en de bindingsaffiniteiten werden beoordeeld op interactie-energie (kcal·mol-1)26.

Cellevensvatbaarheidstest
MH7A-cellen in de logaritmische groeifase werden ingezaaid in 96-wellplaten met een dichtheid van 5 × 103-cellen per put. Bij het bereiken van 80% confluentie werden de cellen eerst 6 uur behandeld met lipopolysaccharide (LPS) (1 μg·mL-1) en vervolgens blootgesteld aan verschillende concentraties smirnotine A (5, 25, 50, 75 en 100 μg·mL-1). Elke behandelgroep werd in viertal geplaatst en 24 uur geïncubeerd bij 37 °C onder 5% CO₂. Na de incubatie werd 100 μL 10% CCK8-oplossing aan elke put toegevoegd, gevolgd door extra incubatie bij 37 °C gedurende 2 uur. De absorptie bij 450 nm werd gemeten met een microplaatlezer.

ELISA-test in MH7A-cellen
Het supernatant werd opgevangen door centrifugatie bij 2000 × g gedurende 20 minuten bij 4 °C. De niveaus van inflammatoire cytokines, waaronder IL-6, IL-1β, TNF-α en IL-10, werden gekwantificeerd in de supernatant met behulp van bijbehorende ELISA-kits, strikt volgens de instructies van de fabrikant.

Meting van de mate van toezwelling
De zwelling van de rechterachterpoot werd geëvalueerd door het pootvolume elke 3 dagen na de modellering te meten. Metingen werden twee keer per rat genomen en gemiddeld gemaakt. De ontstekingsreactie werd gekwantificeerd als de procentuele toename van het pootvolume ten opzichte van de basislijn.

figure-protocol-1

Orgaanindexmeting
Alle ratten werden 24 uur na de laatste toediening verdoofd en geëuthanaseerd. De humane methode die door de internationale veterinaire gemeenschap wordt erkend, wordt aangenomen. Ten eerste wordt een hoge concentratie (5%) isoflurane gebruikt om het dier diep te verdoven. Zodra het bewustzijn en alle reflexen verliest, wordt de borstkas geopend en het hart doorgesneden, waardoor het dier pijnloos en zonder enige sensatie sterft. De milt en thymus werden direct verwijderd en gewogen. Na spoelen met normale zoutoplossing werd overtollig vocht op de weefseloppervlakken verwijderd door te deppen met filterpapier, en werden de natte gewichten van de organen geregistreerd:27,28.

figure-protocol-2

Hematoxyline en eosine (HE)
Om de integriteit van de pootweefselmonsters te behouden, werd het gehele deel distaal van het rechterenkelgewricht van elke rat verzameld en opgeslagen. Voor het delen werd het gezwollen pootweefsel gebruikt. De bemonsteringsprocedure was als volgt: Het weefsel ongeveer 1 cm boven het rechterenkelgewricht werd volledig ontleed, de vacht werd verwijderd en de botschacht werd aan het proximale uiteinde doorgesneden. Het monster werd onmiddellijk vastgezet in een oplossing van 10% paraformaldehyde. Na fixatie werd het weefsel in een 15% EDTA-ontkalkingsoplossing geplaatst. Decalcificatie werd elke 3 dagen gecontroleerd en de oplossing werd ververst wanneer nodig totdat het weefsel zacht was, wat duidt op voltooiing van decalcificatie. Het weefsel werd vervolgens gedehydrateerd via een gegradueerde ethanolreeks (75% voor 4 uur, 85% voor 2 uur, 90% voor 1,5 uur, 95% voor 1 uur, en twee keer 100% ethanol voor 0,5 uur). Secties werden gedeparaffiniseerd, gerehydrateerd met ethanol, 10 minuten gekleurd met hematoxyline, afgespoeld met kraanwater, 10 seconden gedifferentieerd in zoutzuur–ethanol, afgespoeld met kraanwater, blauw gemaakt, opnieuw afgespoeld, 5 minuten ondergedompeld in 85% ethanol, 5 minuten gekleurd met eosine, 3 seconden afgespoeld met kraanwater, gedehydrateerd, schoongemaakt en gemonteerd voor observatie29.

ELISA-test van rattenserum
Bloedmonsters werden gecentrifugeerd bij 2000 × g gedurende 20 minuten bij 4 °C, en het resulterende supernatant werd verzameld voor cytokineanalyse. De concentraties van IL-1β, IL-6 en TNF-α werden bepaald met commerciële ELISA-kits, strikt volgens de protocollen van de fabrikant. Een standaardcurve werd gegenereerd en aangepast met behulp van de cvxpt32-software, en de expressieniveaus van elke cytokine werden berekend door de absorptiewaarden te interpoleren in de bijbehorende standaardkrommevergelijking. De uiteindelijke eiwitconcentraties werden berekend op basis van de daadwerkelijke experimentele metingen.

Kwantitatieve polymerasekettingreactie-analyse (qPCR)
Totaal RNA werd geïsoleerd uit synoviale cellen met behulp van het TRIzol-reagens, waarbij fase-scheiding werd bereikt door chloroform-toevoeging30. Vervolgens werd een commerciële reverse transcription kit gebruikt om cDNA te synthetiseren uit het geïsoleerde RNA, strikt volgens de instructies van de fabrikant. qRT-PCR werd uitgevoerd met een SYBR Premix-reagens. Glyceraldehyde-3-fosfaatdehydrogenase (GAPDH) werd gebruikt als endogeen referentiegen, en de relatieve genexpressieniveaus werden berekend met de 2-ΔΔCt-methode . De volgende primersequenties werden gebruikt: GAPDH Vooruit: ACAGCAACAGGGTGGTGGAC, en GAPDH Omgekeerd: TTTGAGGGTGCAGCGAACTT; IL-17A Voor: CTGATGCTGTTGCTGCTACTGA, en IL-17A Achteruit: TGGAACGGTTGAGGTAGTCTGA; TRAF6 Vooruit: ACATTTCCCTTTGTCCACAC, en TRAF6 Achteruit: TTAGCATCCATGACCTCTTCGT; IL-10 Voor: CTGCAGGACTTTAAGGGTTACTT, en IL-10 Achteruit: CTTGCTTTTATTCTCACAGGGGA; IL-1β Voor: CCTGTGTGATGAAAGACGGC, en IL-1β Achteruit: TATGTCCCGACCATTGCTGT; IL-6 Vooruit: GTTGCCTTCTGGGGATG, en IL-6 Achteruit: TACTGGTCTGTGTGGGTGGTGGT.

Eiwitextractie en western blotting
Synoviaal weefsel werd gelyseerd in een met fosfatase/protease-remmer aangevuld radio-immunoprecipitatietest (RIPA) buffer, en de eiwitconcentraties werden gemeten met een bicinchoninezuur (BCA) assaykit. Voor Western blotting werden lysaten met gelijke hoeveelheden eiwit onderworpen aan natriumdodecylsulfaat-polyacrylamide gelelektroforese (SDS-PAGE) en vervolgens overgebracht op polyvinylidienfluoride (PVDF) membranen. Na blokkering met 5% magere melk in Tris-gebufferde zoutoplossing met 0,1% Tween (TBST) gedurende 2 uur bij 25 °C, werden de membranen 's nachts geïncubeerd bij 4 °C met primaire antilichamen (GAPDH 1:50000; P-PI3K 1:1000; PI3K 1:1000; P-AKT 1:3000; AKT 1:6000). Na uitgebreide wasbeurt met TBST reageerden de membranen met mierikswortelperoxidase (HRP)-geconjugeerde secundaire antilichamen (Anti-Mouse IgG 1:10000; Anti-konijn IgG 1:1000) gedurende 2 uur op kamertemperatuur. Na een nieuwe reeks TBST-washes werden eiwitbanden gevisualiseerd met behulp van een enhanced chemiluminescence (ECL) substraat. Bandintensiteiten werden gekwantificeerd met ImageJ-software en genormaliseerd naar GAPDH als laadregeling.

Statistische analyse
Alle gegevens werden geanalyseerd met behulp van Graphpad Prism 9.5-software en worden gepresenteerd als het gemiddelde ±± standaarddeviatie. Statistische vergelijkingen werden uitgevoerd met eenrichtings-ANOVA waar van toepassing. Een p-waarde van minder dan 0,05 werd als statistisch significant beschouwd. Vergeleken met de controlegroep: *p < 0,05, **p < 0,01, p < 0,001 en p < 0,0001; Vergeleken met de Model/LPS-groep: #p < 0,05, ##p < 0,01, ###p < 0,001, en ####p < 0,0001.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Resultaten

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Effecten van A. pendulum-derivaten op anti-RA-doelen
De 3D-structuren van de zes verbindingen werden in SDF-formaat opgehaald, en de SMILES-nummers werden geüpload naar de SwissTargetPrediction-database voor doelvoorspelling. Doelen met een kans groter dan 0 werden behouden en de resultaten werden geëxporteerd als een CSV-bestand. Na het verwijderen van duplicaten werden in totaal 97 potentiële verbinding-gerelateerde doelen geïdentificeerd.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Discussie

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Deze geïntegreerde studie biedt nieuwe mechanistische inzichten in de anti-reumatoïde artritisactiviteit van smirnotine A, een C19-diterpenoïde alkaloïde uit Aconitum pendulum N. Busch. Onze bevindingen tonen aan dat smirnotine A RA-ontsteking vermindert door gerichte remming van de PI3K/Akt-signaalroute, wat een ander mechanisme vertegenwoordigt dan eerder gerapporteerde diterpenoïde alkaloïden.

De combinatie van netwerkfarmacologievoorspelling en va...

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Openbaarmakingen

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

De auteurs geven aan dat zij geen bekende concurrerende financiële belangen of persoonlijke relaties hebben die het werk in dit artikel zouden kunnen beïnvloeden.

Dankbetuigingen

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Dit onderzoek werd financieel ondersteund door het Jeugdproject van het Qinghai Science and Technology Department Natural Science Fund (nr. 2022-ZJ-950Q) en de National Natural Science Foundation of China (NSFC) (nr. 82460845).

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Materialen

Lijst van materialen gebruikt in dit artikel
NaamBedrijfCatalogusnummerOpmerkingen
AceQ qPCR SYBR Green Master MixVazymeQ111
AKT (60 kDa) monoklonaal muisantilichaamWuhan Sanying Biotechnology60203-2-Ig
BCA Protein Assay KitGuangzhou Jiebeisi BiotechnologyG3522
BSA StandaardGuangzhou Jiebeisi BiotechnologyG8532
Complete Medium voor MH7A-cellenShanghai Fuheng BiotechnologyFH-MH7A
ELISA Kit voor IL-10Lunchangshuo BiotechnologyED-13626
ELISA Kit voor IL-17ALunchangshuo BiotechnologyED-10344
ELISA Kit voor IL-1βLunchangshuo BiotechnologyED-10351
ELISA Kit voor IL-6Lunchangshuo BiotechnologyED-10377
ELISA Kit voor TNF-αLunchangshuo BiotechnologyED-11776
Fluorescentie Kwantitatieve PCR SysteemApplied BiosystemsViiA-7
GAPDH monoklonaal muisantilichaamWuhan Sanying Biotechnology60004-1-Ig
Hogesnelheid Gekoelde CentrifugeHunan Kecheng Instrument EquipmentHI-16KR
HiScript II Q Select RT SuperMix voor qPCRVazymeR223
HRP-gelabeld geiten-anti-muis secundair antilichaamWuhan Sanying BiotechnologySA00001-1
HRP-gelabeld geiten-anti-konijn secundair antilichaamBeyotime BiotechnologyA0208
Human reumatoïde artritis fibroblast-achtige synoviocyt lijn MH7AQisai BiotechnologyQS-H075
Microplaat ReaderBioTekMQX200
MicroscoopLeicaFLEXACAM C1
Multimode Microplaat ReaderMolecular DevicesFlexStation 3
P-AKT (60 kDa) polyklonaal konijnantilichaamWuhan Sanying Biotechnology28731-1-AP
Paraffine MicrotoomLeicaRM 2016
PCR VersterkerApplied BiosystemsproFlex
Fosfaat Gebufferde Saline (1× PBS)Qisai BiotechnologyQS-S001
PI3K (85 kDa) polyklonaal konijnantilichaamAffinityAF6241
P-PI3K (85 kDa) polyklonaal konijnantilichaamAffinityAF3242
Smirnotin Ageïsoleerd en geïdentificeerd door ons laboratoriumC39H49NO11
Weefsel DehydratorWuhan Junjie ElectronicJT-12J
Weefsel Inbedding MachineWuhan Junjie ElectronicJB-L6
Weefsel Verspreiding en BakmachineWuhan Junjie ElectronicJK-6
TrizolAmbion15596-026
Trypsine Cel Digestie Oplossing (0,25% trypsine,  met EDTA, zonder fenol rood)Qisai BiotechnologyQS-S401

Referenties

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Perera, J., Delrosso, C. A., Nerviani, A., Pitzalis, C. Clinical phenotypes, serological biomarkers, and synovial features defining seropositive and seronegative rheumatoid arthritis: a literature review. Cells. 13 (9), 743(2024).
  2. Jiang, N., Tian, X. P., Zeng, X. F. Interpretation on the 2024 Chinese for the diagnosis and treatment of rheumatoid arthritis. Med J PUMCH. 16 (1), 28-34 (2025).
  3. Nygaard, G., Firestein, G. S. Restoring synovial homeostasis in rheumatoid arthritis by targeting fibroblast-like synoviocytes. Nat Rev Rheumatol. 16 (6), 316-333 (2020).
  4. Dumoulin, Q. A., et al. Development of rheumatoid arthritis after methotrexate in anticitrullinated protein antibody-negative people with clinically suspect arthralgia at risk of rheumatoid arthritis: 4-year data from the TREAT EARLIER trial. Lancet Rheumatol. 6 (12), e827-e836 (2024).
  5. Zhang, R. Y., et al. Mechanisms of NLRP3 inflammasome in rheumatoid arthritis and osteoarthritis and the effects of traditional Chinese medicine. J Ethnopharmacol. 321, 117432(2024).
  6. Parveen, A., Wal, P., Kumar Rai, A., Wal, A. An outlook of substantial progress in nanotechnology emerged in treatment approaches for rheumatoid arthritis. Curr Drug Ther. 19 (3), 289-301 (2024).
  7. Shen, P., et al. Wutou decoction attenuates rheumatoid arthritis in rats through SIRT1-mediated deacetylation of the HMGB1/NF-κB pathway. J Ethnopharmacol. 337, 118921(2025).
  8. Wang, X. W., et al. Jingfang granules alleviates the lipid peroxidation induced ferroptosis in rheumatoid arthritis rats by regulating gut microbiota and metabolism of short chain fatty acids. J Ethnopharmacol. 339, 119160(2025).
  9. Wang, X. D., Mao, J. X. Systematic pharmacology-based strategy to investigate the mechanism of beta-sitosterol for the treatment of rheumatoid arthritis. Front Genet. 15, 1507606(2024).
  10. Liu, S., et al. Treatment of rheumatoid arthritis with alkaloids in natural medicines: a review. Mod Chin Med. 24 (4), 721-727 (2022).
  11. Tan, X. Y., et al. Rapid visual characterization of alkaloid changes in traditional processing of Tibetan medicine Aconitum pendulum by high-performance thin-layer chromatography coupled with desorption electrospray ionization mass spectrometry imaging. Front Pharmacol. 14, 1104473(2023).
  12. Yu, L. Q., et al. Traditional Tibetan medicine: therapeutic potential in rheumatoid arthritis. Front Pharmacol. 13, 938915(2022).
  13. Ai, C. Q. Sibu Yidian Sman Thang Detailed. , Qinghai Ethnic Publishing House. (2012).
  14. Zhang, X. R., et al. Medication regularity of Tibetan patent medicines for gZav-Grib disease based on data mining. Shanxi Med Periodical Press. 21 (16), 29923-29928 (2023).
  15. Liu, Y., et al. An integrated strategy of UPLC-Q-TOF/MS and HPTLC/PAD-DESI-MSI for the analysis of chemical variations: a case study of Tibetan medicine Tiebangchui. J Pharm Anal. 14 (4), 100907(2024).
  16. Li, C. Y., et al. Aconitum pendulum and Aconitum flavum: a narrative review on traditional uses, phytochemistry, bioactivities and processing methods. J Ethnopharmacol. 292, 115216(2022).
  17. Xie, C. M., et al. Triptolide suppresses human synoviocyte MH7A cells mobility and maintains redox balance by inhibiting autophagy. Biomed Pharmacother. 115, 108911(2019).
  18. Wang, X. W., et al. Exploration of protective effect and mechanism of Jingfang granules on rheumatoid arthritis based on network pharmacology and metabolomics. Chin Tradit Herb Drugs. 55 (23), 8067-8078 (2024).
  19. Yin, Q., et al. Anti-rheumatoid arthritis effects of traditional Chinese medicine Fufang Xiaohuoluo pill on collagen-induced arthritis rats and MH7A cells. Front Pharmacol. 15, 1374485(2024).
  20. Dong, D., et al. A new phenolic glycoside from roots of Aconitum pendulum. China J Chin Mater Med. 50 (22), 6380-6386 (2025).
  21. Wang, X., et al. Network pharmacology provides new insights into the mechanism of traditional Chinese medicine and natural products used to treat pulmonary hypertension. Phytomedicine. 135, 156062(2024).
  22. Nam, D. G., Kim, M., Choi, A. J., Choe, J. S. Health benefits of antioxidant bioactive compounds in ginger (Zingiber officinale) leaves by network pharmacology analysis combined with experimental validation. Antioxidants. 13 (6), 652(2024).
  23. Chen, G. Y., et al. Prediction of Rhizoma drynariae targets in the treatment of osteoarthritis based on network pharmacology and experimental verification. Evid Based Complement Alternat Med. 2021, 5233462(2021).
  24. Guo, Z. W., et al. Mechanism of crocin in improving Alzheimer's disease based on network pharmacology, molecular docking and cellular validation. Chin Tradit Herb Drugs. 56 (13), 4712-4723 (2025).
  25. Chen, G. Y., et al. Network pharmacology-based strategy to investigate the mechanisms of Cibotium barometz in treating osteoarthritis. Evid Based Complement Alternat Med. 2022, 1826299(2022).
  26. Zheng, Y. T., Xia, L. J., Zhang, X. J., Jin, M. Exploration of potential anti-inflammatory targets and key ingredients of Arisaematis rhizoma in treatment of major depressive disorder based on machine learning and molecular dynamics simulation. Chin Tradit Herb Drugs. 55 (15), 5174-5188 (2024).
  27. Guo, M., et al. Levamisole ameliorates rheumatoid arthritis by downregulating the PI3K/Akt pathway in SD rats. Pharmaceuticals. 17 (11), 1504(2024).
  28. Zhang, B. L., et al. Mechanism of Yiqi Yangyin Tongluo decoction regulating miR-885-5p/PTEN signaling pathway to regulate autophagy-inflammation in collagen-induced arthritis model rats. Liaoning J Tradit Chin Med. 52 (3), 182-189 (2025).
  29. Chen, G. Y., et al. Integrating network pharmacology and experimental validation to explore the key mechanism of Gubitong recipe in the treatment of osteoarthritis. Comput Math Methods Med. 2022, 7858925(2022).
  30. Li, J. Y., et al. Effect of Danggui Niantongtang on key factors of extrinsic and intrinsic apoptotic pathway in synovial tissue of adjuvant arthritis rats. Chin J Exp Tradit Med Form. 27 (4), 1-7 (2021).
  31. Xia, Z. X., Li, Q., Tang, Z. Y. Network pharmacology, molecular docking, and experimental pharmacology explored Ermiao wan protected against periodontitis via the PI3K/AKT and NF-κB/MAPK signal pathways. J Ethnopharmacol. 303, 115900(2023).
  32. Sabbah, D. A., Hajjo, R., Sweidan, K. Review on epidermal growth factor receptor (EGFR) structure, signaling pathways, interactions, and recent updates of EGFR inhibitors. Curr Top Med Chem. 20 (10), 815-834 (2020).
  33. Guo, X., et al. The antiangiogenic effect of total saponins of Panax japonicus CA Meyer in rheumatoid arthritis is mediated by targeting the HIF-1α/VEGF/ANG-1 axis. J Ethnopharmacol. 333, 118422(2024).
  34. Jiang, L., et al. Elucidating the role of Rhodiola rosea L. in sepsis-induced acute lung injury via network pharmacology: emphasis on inflammatory response, oxidative stress, and the PI3K-AKT pathway. Pharm Biol. 62 (1), 272-284 (2024).
  35. Bai, Y. M., Liang, S., Zhou, B. Yangyinghuoxue decoction exerts a treatment effect on hepatic fibrosis by PI3K-AKT pathway in rat model: based on network pharmacology and molecular docking. Aging (Albany NY). 16 (4), 3773(2024).
  36. Ba, X., et al. WTD attenuating rheumatoid arthritis via suppressing angiogenesis and modulating the PI3K/AKT/mTOR/HIF-1α pathway. Front Pharmacol. 12, 696802(2021).

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Herprints en machtigingen

Toestemming aanvragen om de tekst of afbeeldingen van dit JoVE-artikel te hergebruiken

Toestemming aanvragen

Trefwoorden

OntstekingsreactieNetwerkfarmacologieMoleculaire DockingEnzyme Linked Immunosorbent AssayWestern BlotReal Time PCRTraditionele Chinese Geneeskunde
Video binnenkort beschikbaar

Gerelateerde artikelen