De NHANES-gegevensverzamelingsprotocollen zijn goedgekeurd door de Research Ethics Review Board (ERB) van het National Center for Health Statistics (NCHS). Omdat de NHANES-datasets openbaar beschikbaar zijn, hebben onderzoekers geen extra goedkeuring nodig van hun eigen institutionele beoordelingscommissies (IRB's).
Studiepopulatie en toelatingscriteria
De NHANES hanteert een meerfasig, gestratificeerd probability sampling-ontwerp en verzamelt uitgebreide gezondheids- en voedingsinformatie via huishoudinterviews, gestandaardiseerde lichamelijke onderzoeken en laboratoriumbeoordelingen bij Mobile Examination Centers (MEC). Publiek beschikbare gegevens van de enquêtecycli van 1999 tot 2004 werden geanalyseerd. Omdat de gegevens volledig geanonimiseerd en openbaar toegankelijk waren, vereiste deze retrospectieve studie geen extra ethische goedkeuring. De studie bestond uit twee componenten: (1) een dwarsdoorsnedeanalyse die de relatie tussen de RAR en het optreden van migraine onderzocht, en (2) een prospectieve cohortanalyse die de relatie tussen RAR-niveaus en sterfte van alle oorzaken onder personen met migraine evalueerde om de prognosewaarde te beoordelen. Figuur 1 illustreert het algemene studieontwerp en de selectieworkflow van deelnemers, zoals vereist door de JoVE-richtlijnen. Kort gezegd werden aanvankelijk in totaal 15.332 deelnemers ≥ 20 jaar overwogen. Na toepassing van exclusiecriteria en rekening houden met ontbrekende gegevens werden 8.781 deelnemers opgenomen in de dwarsdoorsnede-analyse. Ontbrekende gegevens werden behandeld met een volledige casusanalyse, waarbij deelnemers met ontbrekende waarden voor belangrijke variabelen (RAR, migrainestatus of covariaten) werden uitgesloten om reproduceerbaarheid te waarborgen. Voor de cohortanalyse werden deelnemers die als migraine werden geïdentificeerd (n = 1.762) longitudinaal gevolgd om de relatie tussen RAR en sterfterisico te onderzoeken.
Meting en categorisering van RAR
RDW in NHANES werd gemeten als onderdeel van standaard laboratoriumprocedures voor volledige bloedtellingen, uitgevoerd door getraind personeel. Alle laboratoriumwaarden, inclusief RDW en albumine, werden verkregen uit één basislijnmeting per deelnemer. Serumalbumineniveaus werden bepaald met behulp van de bromocresol purple (BCP) methode onder gestandaardiseerde pH-omstandigheden. De RAR werd berekend als RDW (%) gedeeld door serumalbumine (g·dL-1) en is in eerdere studies veel toegepast als samengestelde marker voor ontsteking en voedingsstatus19. Voor de dwarsdoorsnedeanalyse werden deelnemers gecategoriseerd in kwartielen (Q1–Q4) op basis van de verdeling van RAR in de totale studiepopulatie: Q1 (≤ 2,73), Q2 (> 2,73–2,93), Q3 (> 2,93–3,18) en Q4 (> 3,18). In de cohortanalyse, die alleen deelnemers met migraine omvatte, verschilde de RAR-verdeling; kwartielen werden binnen deze subgroep opnieuw berekend: Q1 (≤ 2,74), Q2 (> 2,74–2,95), Q3 (> 2,95–3,23) en Q4 (> 3,23).
Migrainebeoordeling
Migraine (of ernstige hoofdpijn) bij NHANES werd beoordeeld via een vragenlijst: deelnemers kregen de vraag: "Had u de afgelopen 3 maanden ernstige hoofdpijn of migraine?" Eerdere studies, waaronder de Migraine Prevalence and Prevention-studie en meerdere op NHANES gebaseerde nationale enquêtes, hebben een goede overeenstemming aangetoond tussen zelfgerapporteerde ernstige hoofdpijn en klinisch gediagnosticeerde migraine 20,21,22. Daarom biedt identificatie op basis van vragenlijsten een redelijke en vergelijkbare benadering om individuen met potentiële migraine in populatiestudies te identificeren.
Sterftebeoordeling
De follow-up begon op de datum van het MEC-examen en ging door tot overlijden op 31 december 2019. Mortaliteitsuitkomsten werden geclassificeerd volgens ICD-10-codes om de sterfte door alle oorzaken te beoordelen.
Covariate beoordeling
Potentiële confounders werden geselecteerd op basis van eerdere literatuur en hun klinische relevantie 23,24,25. Demografische variabelen omvatten leeftijd, geslacht, ras/etniciteit (Mexicaans-Amerikaans, niet-Spaanse blanke, niet-Spaanse zwarte, overige personen), opleiding (< middelbare school, middelbare school, > middelbare school), burgerlijke staat (getrouwd/samenwonend met partner versus niet-getrouwd) en gezinsinkomen-naar-armoedeverhouding (PIR: < 1, 1–3, > 3). Leefstijlfactoren waren onder andere rookstatus (huidig, voormalig en nooit) en alcoholgebruik (ooit versus nooit). De fysieke status werd weergegeven door BMI (< 25, 25–30 en > 30), en medische aandoeningen omvatten zelfgerapporteerde diabetes en hypertensie.
Statistische analyse
Alle analyses hielden rekening met het complexe surveyontwerp van NHANES door MEC-gewichten, primaire steekproefeenheden (clusters) en strata te betrekken, waarmee nationaal representatieve en reproduceerbare schattingen werden gegarandeerd. Continue variabelen werden uitgedrukt als gewogen medianen met interkwartielbereiken (IQR) en vergeleken met de Kruskal–Wallis-test, terwijl categorische variabelen werden gepresenteerd als gewogen percentages en vergeleken met de Rao–Scott chi-kwadraattest. Gewogen logistische regressiemodellen werden gebruikt in de dwarsdoorsnedeanalyse om de verbanden tussen RAR en migraine te evalueren, waarbij de resultaten werden gepresenteerd als odds ratios (ORs) en 95% betrouwbaarheidsintervallen (BI's). In de cohortanalyse werden Cox-proportionele hazardmodellen toegepast om de associatie tussen RAR-quartielen en sterfte door alle oorzaken te beoordelen, met resultaten gerapporteerd als hazard ratios (HRs) en 95% BI. Er werden drie hiërarchische modellen gebouwd: Model 0 was niet aangepast; Model 1 werd aangepast voor demografische factoren; Model 2 werd verder aangepast voor leefstijl- en fysieke factoren (roken, alcohol, BMI); en Model 3 werd daarnaast aangepast voor medische aandoeningen (hypertensie en diabetes). Restricted cubic spline (RCS) regressie, waarbij 3 knopen worden gebruikt op de 10e, 50e en 90e percentielen van de RAR-verdeling, werd toegepast om mogelijke niet-lineaire relaties tussen RAR en migraine of mortaliteit te onderzoeken. Kaplan–Meier-overlevingscurves werden gegenereerd om overleving over RAR-kwartielen te vergelijken, en tijdsafhankelijke receiver operating characteristic (ROC)-curves werden gebruikt om de voorspellende prestaties van RAR voor mortaliteitsuitkomsten te beoordelen. Subgroepanalyses werden uitgevoerd met interactietermen, waarbij een tweezijdige P < 0,05 als statistisch significant werd beschouwd. Alle analyses werden uitgevoerd met R-software (versie 4.2.2).