Name: Murine niertransplantatie Procedure (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2009-07-10T00:00:00.000+00:00
Duration: 18 min 48 s
Description: Leer de niertransplantatieprocedure bij muizen voor transplantatiebiologie. Deze methode omvat het oogsten van de donor nier, chirurgische transplantatie en monitoring van creatinine niveaus om graftfunctie te beoordelen.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

Deze studies werden ten dele ondersteund door de financiering door de NIH R01 AI36532 naar GAH. We willen de uitstekende ondersteuning bij transplantatiepatiënten pathologie verstrekt door Dr Tibor Nádasdy erkennen, en de waardevolle begeleiding en een vooruitziende blik door wijlen dr. Charles G. Orosz in het initiëren dit onderzoek inspanning.

Donor Organ Harvest (2): <ol><li> Verdoven van de donor met behulp van 65mg/kg pentobarbital IP; anesthesie wordt onderhouden door Isofluraan (2-3%). </li><li> Maak een middellijn incisie van borstbeen tot schaambeen aan de donor buik te gaan en de linker nier bloot door het bewegen van de darm zijdelings aan de rechterkant. </li><li> Isoleer de linker nier door het ligeren en het verdelen van de bijnieren en de testis schepen met een 8-0 zijden hechtdraad. </li><li> Mobiliseer de aorta boven de kruising met de nierslagader en de ader. </li><li> Mobiliseer de vena cava inferior (IVC) boven en onder de kruising met de nier-slagader en ader. </li><li> Afbinden van de aorta onder de nier-slagader en ader met een 8-0 zijden hechtdraad om het bloeden te minimaliseren. </li><li> Ontleden de linker urineleider van de nier navel naar de blaas. </li><li> Expose de ureterovesical kruising met behulp van caudale terugtrekken op de blaas koepel. </li><li> Accijnzen een kleine, elliptische patch van de blaas met de linker ureterovesical kruising, gebruikelijk is voor urinair reconstructie via een blaas-to-blaas anastomose. De juiste ureter wordt niet meegeleverd met de blaas. </li><li> Afbinden van de IVC onder de nier-slagader en ader met een 8-0 zijden hechtdraad. </li><li> Afbinden van de aorta boven de nier-slagader en ader, en langzaam het transplantaat in situ perfuseren met 0.2-0,4 ml koud, gehepariniseerd lactaat Ringer&#39;s via de infrarenale aorta. </li><li> Afbinden van de IVC boven de nier-slagader en ader met een 8-0 zijden hechtdraad. </li><li> Transect de nier-ader op de kruising met het IVC. </li><li> Schuin Verdeel de aorta, ongeveer 2 mm onder de nierslagader. </li><li> Verwijder de nier en de vasculaire voorzien ureter verbonden aan de blaas patch en bloc. Bewaren in lactaat Ringer&#39;s op het ijs. </li><li> Euthanaseren de donor muis door cervicale dislocatie onder narcose. </li></ol> Ontvanger transplantatie (2): <ol><li> Verdoven van de ontvanger met 65 mg / kg pentobarbital IP en onderhouden van de anesthesie door Isofluraan (2-3%). </li><li> Maak een middellijn incisie, dekking van de darm met natte gaas en voorzichtig trekken naar de linkerkant. </li><li> Afbinden de rechter ureter, nier-slagader en ader, en verwijder de rechter nier. </li><li> Zorgvuldig isoleren en cross-klem van de infrarenale aorta en IVC met twee 4-mm microvasular klemmen na ligeren van de lumbale takken. </li><li> Plaats een 10-0 nylon hechtdraad door middel van een volledige dikte van de aorta en het trekken aan een elliptische aortaotomy te maken door een enkele cut (ongeveer een vijfde van de diameter van het schip). </li><li> Maak een longitudinale venotomy door piercing de IVC met een 30 gauge naald en uit te breiden met behulp van de juiste microscissors. </li><li> Spoel zowel de aorta en IVC met gehepariniseerde zoutoplossing om intraluminale bloed of stolsels duidelijk. </li><li> Haal de donor nier van het ijs en plaats het intra-abdominaal in de rechter flank van de muis. De donor nier wordt vochtig gehouden met een koude zoutoplossing gedrenkt gaasje. </li><li> Plaats twee hechtingen verblijf in de proximale en distale top van de ontvangers aortaotomy met de donoren aorta manchet. </li><li> Maak een end-to-side anastomose tussen de donor aorta manchet en de voorste wand van de ontvangers aortaotomy, met behulp van 2 ~ 3 doorlopende 10-0 nylon hechtingen in de buitenkant van de aorta. </li><li> Draai de donor nier transplantaat over aan de linkerflank van de ontvanger. herhaalt u de vorige procedure tussen de donor aorta manchet en de achterste muur van de ontvangers aortaotomy </li><li> Voer een end-to-side anastomose tussen de donor nier-ader en de achterste muur van de ontvangers IVC, met behulp van 4-5 continue 10-0 nylon hechtingen in de binnenkant van het IVC. en dan de voorste wand van de IVC en donateurs renale ader worden afgesloten met een 4 ~ 5 doorlopende hechtingen buiten het IVC. </li><li> De anastomose van zowel de ader en slagader moet worden afgerond binnen 20 minuten. </li><li> Spoel het transplantaat met koud zout meerdere keren tijdens anastomose. </li><li> Verdeel de koepel van de ontvanger blaas, en stoppen met bloeden cauterisatie. </li><li> Maak een kleine snee in de koepel. </li><li> Plaats twee hechtingen verblijf van 10-0 nylon aan de donoren kleine blaas patch anastomize met de ontvangers blaas koepel. Elke zijde van de anastomose wordt gehecht met 8 ~ 10 opeenvolgende steken. </li><li> Sluit de buik in twee lagen met continue 4-0 steriele, synthetische absorbeerbare Vicryl hechtdraad. </li><li> Geef ontvangende muizen 0,4 ml warm zout tijdens de operatie door intermitterende injectie IV. </li></ol> Post-operatieve zorg van de ontvanger <ol><li> Na het sluiten van de buik, is een eenmalige intramusculaire injectie van penicilline (500U/10g) toegediend (2). </li><li> Daarnaast, ontvangers krijgen 0,05 mg / kg intramusculair buprenorfine op dag 0 en dag 1 na de operatie voor de pijn. Na de operatie, ontvangers van een transplantaat te ontvangen water met daarin sulfatrim (100mg/kg) totdat het experiment is terminated. </li><li> Voor de eerste 24 uur postoperatief muizen worden bewaard in een temperatuur gecontroleerde incubator. </li><li> Muizen meestal te herstellen van narcose binnen 1 uur na de operatie en krijgen regelmatig voedsel en water ad libitum. </li><li> Skin hechtingen worden verwijderd twee weken na de operatie. </li></ol> Ontvanger Nephrectomy <ol><li> Verdoven van de ontvanger 4 ~ 7 dagen na een niertransplantatie hebben ondergaan met 65 mg / kg pentobarbital IP; anesthesie wordt onderhouden door Isofluraan (2-3%). </li><li> Open de buik via een middellijn incisie. </li><li> Bedek de darm met een zoutoplossing gedrenkte gaasje en voorzichtig trekken aan de rechterkant. </li><li> Verwijder het linker nier na ligeren van de linker ureter-, nier-ader en slagader. </li><li> Sluit de buik in twee lagen met continue 4-0 synthetische absorbeerbare Vicryl hechtdraad. </li></ol> Volbloed Creatinine Afmetingen <ol><li> Wekelijks naar tweewekelijkse bloedafname van minder dan 0,2 cc is ofwel submandibularly uitgevoerd zonder verdoving of retro-orbitaal onder Isofluraan verdoving. </li><li> Kwantitatieve volbloed creatinine niveaus worden bepaald met behulp van een I-Stat Portable Clinical Analyzer (Heska Corp, Fort Collins, CO). </li><li> Conventionele eenheden (mg / dl) worden geconverteerd naar SI-eenheden van de micromol / L door vermenigvuldiging van de conventionele units van 88,4. </li></ol>

<ol><li>Russell, P. S., Chase, C. M., Colvin, R. B., Plate, J. M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Kidney+transplants+in+mice.+An+analysis+of+the+immune+status+of+mice+bearing+long-term%2C+H-2+incompatible+transplants%5BTitle%5D)+AND+%22JExpMed%22%5BJournal%5D)">Kidney transplants in mice. An analysis of the immune status of mice bearing long-term, H-2 incompatible transplants.</a> JExpMed. 147, 1449-1468 (1978).</li>
<li>Zhang, Z., Schlachta, C., Duff, J., Stiller, C., Grant, D., Zhong, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improved+techniques+for+kidney+transplantation+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Microsurgery%22%5BJournal%5D)">Improved techniques for kidney transplantation in mice.</a> Microsurgery. 16 (2), 103-109 (1995).</li>
</ol>

Experimenten op dieren werden uitgevoerd in overeenstemming met de richtlijnen en voorschriften uiteengezet door de Ohio State University IACUC in te stellen.

Wij hebben ongeveer 1200 gevallen van nier-transplantatie in muizen met een technisch succespercentage van&gt; 90%. In vergelijking met harttransplantatie, het succes van niertransplantatie is meestal laag. Toch heeft ons laboratorium vastgehouden aan een hoog slagingspercentage (&gt; 90%) van de niertransplantatie. De belangrijkste punten voor succes zijn reperfusie verwondingen aan zowel de donor nier en ontvangers, en bloeden en trombose tijdens de gehele procedure en post-operatief te minimaliseren. De volgende fact...

<table><tbody><tr><td>i-STAT</td><td>Overig</td><td>HESKA</td><td>Cat 5101</td><td></td></tr><tr><td>i-STAT Cartridge</td><td>Overig</td><td>HESKA</td><td>CAT 5110-CREA</td><td></td></tr><tr><td>Sulfatrim</td><td>Overig</td><td>Actavis</td><td>R02109</td><td></td></tr><tr><td>Isofluraan</td><td>Overig</td><td>NOVAPLUS</td><td>CA-0474</td><td></td></tr><tr><td>10-0 Hechtmateriaal</td><td>Chirurgie</td><td>Sharpoint</td><td>AK0100</td><td></td></tr></tbody></table>

murine niertransplantatie procedure

Murine Renal Transplantation Procedure

Nier orthotope transplantatie in muizen is een technisch uitdagend procedure. Hoewel de eerste niertransplantaties bij muizen werden uitgevoerd door Russell et al. meer dan 30 jaar geleden (1) en verfijnd door Zhang et al. jaar later (2), hebben weinig mensen in de wereld onder de knie deze procedure. In ons laboratorium hebben we met succes uitgevoerd 1200 orthotope niertransplantaties met&gt; 90% overlevingskans. De belangrijkste punten voor succes zijn onder strikte controle van de reperfusie schade, bloeden en trombose, zowel tijdens de procedure en na transplantatie, en het gebruik van 10-0 in plaats van 11-0 hechtdraad voor anastomosen. Post-operatieve zorg en de behandeling van de ontvanger is uiterst belangrijk voor transplantatie succes en evaluatie. Alle niertransplantaat ontvangers krijgen antibiotica in de vorm van een injectie van penicilline onmiddellijk na de transplantatie en sulfatrim in het drinkwater voortdurend. De algemene gezondheid van dieren wordt geëvalueerd dagelijks en volbloed creatinine-analyses worden routinematig uitgevoerd met een draagbare I-STAT machine transplantaatfunctie te beoordelen.

Niertransplantatie bij muizen is een technisch uitdagend procedure die een zorgvuldige postoperatieve zorg en behandeling voor succes vereist.

Murine niertransplantatie Procedure

Orthotope renale transplantatie bij muizen is een technisch uitdagende procedure. Hoewel de eerste niertransplantaties bij muizen werden uitgevoerd door Russell ...

De procedure voor niertransplantatie bij muizen begint met het winnen van het donororgaan, waarbij de linker nier uit de donormuis wordt verwijderd en op ijs wordt bewaard. De rechter nier wordt uit de ontvangermuis verwijderd om ruimte te maken voor de donornier. De donornier wordt vervolgens van het ijs gehaald en in de ontvangermuis getransplanteerd.De muis krijgt vier dagen de tijd om te herstellen voordat de resterende eigen nier wordt verwijderd. Na zeven dagen worden de creatininegehaltes gemonitord met een I STAT portable clinical analyzer om de graftfunctie te beoordelen. Hallo, ik ben Sarah Heimer van het laboratorium van dr. Greg Hadley en de afdeling transplantatiechirurgie van de Ohio State University.Vandaag tonen we u een procedure voor nier transplantatie bij de muis. De niertransplantatiechirurgie die u vandaag zult zien, wordt uitgevoerd door onze resident expert neurochirurg Jing Wing. Gebruik deze procedure in ons laboratorium om de immunologische gebeurtenissen bij transplantatieafstoting te bestuderen, evenals strategieën om afstoting te voorkomen.Laten we beginnen. Om de oogst van het donororgaan te starten, wordt een teenknijp uitgevoerd om te bevestigen dat

Research

JoVE Journal

Biology

Biologie

Geregisseerd differentiatie van hESC 's in de specifieke cellen heeft gegenereerd veel belangstelling voor regeneratieve geneeskunde. Wij bieden een beknopte, stap-voor-stap protocol voor het bepalen van...

Lot in kaart brengen van menselijke embryonale stamcellen door teratoom Formation

Transplantatie van geïsoleerde eilandjes is voorgesteld om een ​​potentiële behandeling voor diabetes type 1 zijn. Hier beschrijven we een methode om de eilandjes van de muis pancreata isoleren en transplantatie ze aan de subcapsulaire ruimte van de nier.

Een methode voor Murine Islet Isolatie en subcapsulaire Niertransplantatie

Hier presenteren we een protocol om de immunologie van afstoting te bestuderen. Het gepresenteerde chirurgische model rapporteert een korte operatietijd en een beknopte techniek. Afhankelijk van de donor-recipiënt stamcombinatie, kan de getransplanteerde nier acute cellulaire afstoting of chronische allotransplantaatbeschadiging ontwikkelen, gedefinieerd door interstitiële fibrose en tubulaire atrofie.

Muis Niertransplantatie: Modellen van transplantaatafstoting

Dit rapport geeft een gedetailleerde beschrijving van het verplanten van murine thymussen van donormuizen van verschillende leeftijden onder de niercapsule van immuungecompromitteerde muizen als ontvangers. Het doel van deze aanpak is om T-celontwikkeling en thymische selectiegebeurtenissen in vivo te modelleren.

Isolatie en Transplantatie van verschillende Aged Muriene Thymic Enten.

Het doel van dit manuscript is om de stappen te beschrijven die nodig zijn om een niertransplantatie uit te voeren bij een muis, met bijzondere aandacht voor de details van de arteriële anastomose.

Muizen Niertransplantatie Techniek

Wij bieden een eenvoudige en efficiënte methode voor het transplantatie van 2 '-deoxyguanosine behandeld E 18.5 Thymus in de niercapsule van een naakt muis. Deze methode moet worden assistent in de studie van zowel Thymus epitheliale cellen functie en T-cellen rijping.

Renale Subcapsulaire transplantatie van 2 '-Deoxyguanosine-behandelde Muriene embryonale Thymus in naakt muizen

Dit protocol presenteert een nieuwe chirurgische techniek van niertransplantatie bij muizen, gericht op een aangepaste arteriële anastomosestrategie. Een vasculaire hechttechniek inclusief een eenvoudige en veiligere ureter-blaas anastomose methode wordt ook gepresenteerd. Deze wijzigingen verkorten de operatietijd en verbeteren het slagingspercentage van de niertransplantatieprocedure bij muizen.

Een aangepaste chirurgische techniek voor niertransplantatie bij muizen

Het orthotopische niertransplantatiemodel bij ratten draagt bij aan het onderzoek naar het mechanisme van renale allograftafstoting. Het huidige model verhoogt de overleving van de ontvangers zonder interferentie met de bloedtoevoer en veneuze reflux van het onderlichaam met behulp van een end-to-end anastomose van nierimplantatie en een end-to-side "tunnel" -methode van ureter-blaasanastomose.

Een rat orthotopisch niertransplantatiemodel voor niertransplantaatafstoting

Dit protocol beschrijft een overlevingsprocedure voor een veilige en goed verdraagde bilaterale murale nierlymfadenectomie.

Murine bilaterale nierlymfadenectomie

De muis heterotope harttransplantatie model is bewezen door vele onderzoekers een belangrijke methode voor het bestuderen van de mechanismen van de afwijzing en immuunrespons worden. Echter, de betrokken technieken zijn nog steeds uitdagend. Door het wijzigen van standaard technieken die we hebben succes gehad met meer dan 1000 transplantaties.

Heterotope harttransplantatie in Muizen

Leer de niertransplantatieprocedure bij muizen voor transplantatiebiologie. Deze methode omvat het oogsten van de donor nier, chirurgische transplantatie en monitoring van creatinine niveaus om graftfunctie te beoordelen.

Murine niertransplantatie Procedure

Meer video's verkennen