Name: Heterotope en orthotope Tracheale transplantatie in Muizen worden gebruikt als modellen voor de ontwikkeling van de obliterans luchtwegaandoeningen Study (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2010-01-20T18:15:00.000+00:00
Duration: 9 min 10 s
Description: Leer heterotopische en orthotopische tracheale transplantatie bij muizen om obliteratieve luchtwegaandoeningen te bestuderen. Deze modellen tonen chirurgische technieken en verschillen in ziekteontwikkeling voor transplantatieonderzoek.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

De auteurs danken Christiane Pahrmann (Lab Manager).

<ol><li> Man Balb / C-muizen (8-12 weken) worden gekocht van Charles River Laboratories (Sulzfeld, Duitsland). De muizen zijn gehuisvest onder gangbare condities, gevoed standaard muizen voedsel en water ad libitum. </li><li> 2% Isofluran wordt gebruikt voor anesthesie. </li></ol> DONOR VOORBEREIDING <ol><li> Scheren van de buik haar en desinfecteren van de omgeving met behulp van betaisodona. </li><li> Bij microscopisch bekijken, voert u een middellijn cervicale incisie van het niveau van het strottenhoofd aan het borstbeen. </li><li> Verwijder het onderhuidse vet en de band spieren om een ​​duidelijk beeld van de luchtpijp te krijgen. </li><li> Ontleden de luchtpijp van een omliggende weefsels, zoals de slokdarm, zenuwen, bloedvaten en het bindweefsel. </li><li> Verwijder de hele luchtpijp (van het strottenhoofd naar de bifurcatie). </li><li> Spoel de transplantatie met koud zout en bewaar het transplantaat bij 4 ° C. </li><li> De donor is gedood door cervicale dislocatie na de oogst van de luchtpijp. </li></ol> Ontvanger: heterotope TRANSPLANTATIE <ol><li> Scheren van de buik haar in een ruime marge rond de incisie en desinfecteer het gebied drie keer met betaisodona (betadine), gevolgd door alcohol. Ogen moeten worden gesmeerd met een oogzalf product aan de hoornvliezen niet uitdrogen. </li><li> Voer een mediane laparotomie en plaats de darm in een steriele, moistured handschoen. </li><li> Zorgvuldig Spreid de grotere omentum. Plaats het transplantaat in het midden en fixeer het met een enkele hechting met 8-0 (Prolene, Ethicon, Duitsland). </li><li> Volledig te dekken van de transplantatie met de grotere omentum en bevestig het transplantaat met een enkele hechting 8-0 (Prolene, Ethicon, Duitsland). </li><li> Terug verplaatsen van de darmen in de buik en vóór spoelen met warm, steriele zoutoplossing aan de sluiting. </li><li> Close-up in 2 lagen - buikwand en de huid laag met doorlopend patroon met 7-0 Prolene voor de spier en 7-0 Vicryl voor de huid. </li></ol> Ontvanger: orthotope TRANSPLANTATIE <ol><li> Scheren van de buik haar in een ruime marge rond de incisie en desinfecteer het gebied drie keer met betaisodona (betadine), gevolgd door alcohol. Ogen moeten worden gesmeerd met een oogzalf product aan de hoornvliezen niet uitdrogen. </li><li> Verdeel de band spieren om de hele laryngotracheale complex te visualiseren. </li><li> Zorgvuldig ontleden de luchtpijp van de omliggende weefsels, zorg om de steeds terugkerende larynx zenuwen te behouden. </li><li> Verdeel de luchtpijp drie ringen caudaal van de cricoid. Het dier houdt fysiologische ademhaling via de tracheostomie. </li><li> Zorgen voor een schone tracheale randen in de ontvanger als in het transplantaat. </li><li> De ent wordt geplaatst tussen de ontvanger tracheale gebreken en georiënteerd op anatomische polariteit. </li><li> Met behulp van 8-0 (Prolene, Ethicon, Duitsland) anastomose de donor transplantaat met het distale (mediastinale) luchtpijp. Het achterste deel van de anastomose wordt uitgevoerd in continu bedrijf mode. De voorste aspect wordt dan ingevuld met behulp onderbroken steken. </li><li> Verwijder eventuele afscheiding uit de luchtwegen. </li><li> De proximale anastomose wordt dan afgerond op dezelfde manier als de distale een. </li><li> Zorg ervoor dat de integriteit van de luchtweg en adequate, spontane ademhaling. </li><li> Verplaats de riem spieren en sluit het onderhuidse weefsel en de huid laag met 6-0 hechtingen (Vicryl, Ethicon, Duitsland) met doorlopend patroon. </li><li> Gebruik injectie anesthesie voor de ontvanger, dus het dier zal fysiologische ademhaling te behouden door de luchtpijp. Een combinatie van 75/1/0.2 mg / kg propofol, medetomidine en fentanyl, respectievelijk, wordt gebruikt voor ip anesthesie bij muizen. </li></ol><img src="/files/ftp_upload/1437/1437Fig1.jpg" alt="Figuur 1" /> Figuur 1: Donor luchtpijp. 1A: Donor luchtpijp in situ na bereiding. 1B: weggesneden donor luchtpijp. 1C: Donor luchtpijp na explantatie. <img src="/files/ftp_upload/1437/1437Fig2.jpg" alt="Figuur 2" /> Figuur 2: Heterotope Model. 2A: Het transplantaat is gepositioneerd in het midden van de grotere omentum. 2B: Het transplantaat is vast aan beide uiteinden met een hechtdraad. 2C: Het transplantaat is verpakt in de grotere omentum en gefixeerd met een hechting. <img src="/files/ftp_upload/1437/1437Fig3.jpg" alt="Figuur 3" /> Figuur 3: orthotope Model. 3A: De ent wordt geplaatst tussen de ontvanger tracheale gebreken en de achterste muur is geanastomoseerd in continu bedrijf mode. 3B: De voorste muur is ingevuld met behulp van een hechtdraad. <img src="/files/ftp_upload/1437/1437Fig4.jpg" alt="Figuur 4" /> Figuur 4: Histologie. 4A: Herstelde heterotope getransplanteerd luchtpijp na 28 dagen in de H + E staining (15x). Let op de 100% luminale vernietiging. 4B: Herstelde orthotope transplantatie luchtpijp na 60 dagen in de H + E kleuring (15x). Maximale bereikt luminale vernietiging is ongeveer 45%. <table border="1"><tbody><tr><td></td><td> Heterotope Tracheale Transplantatie Model </td><td> Orthotope Tracheale Transplantatie Model </td></tr><tr><td> Voordelen </td><td> + Makkelijk uit te voeren + Luminal obliteratie met volledige luchtwegen occlusie na 28 dagen + Geen fysieke affectie van dieren door de OAD </td><td> + Fysieke ventilatie van het transplantaat + Geïnhaleerde toediening van het geneesmiddel mogelijk + Sterke immunologische reacties zoals alloreactieve IgM productie van antilichamen + Fysiologische thoracale milieu + Tracheale-tracheale anastomose imiteert de klinische setting </td></tr><tr><td> Nadelen </td><td> - Geen ventilatie van getransplanteerde trachea - Geen evaluatie van ingeademde ziekteverwekkers mogelijk - Remming van mucociliaire klaring en behield afscheidingen - Peritoneale micro-omgeving in plaats van thoracale milieu </td><td> - Chirurgische opleiding nodig - Luminal obliteratie met luminal occlusie app. 45% na 60 dagen - Dieren kunnen ontwikkelen symptomen van OAD </td></tr></tbody></table> Tabel 1: Voordelen en nadelen van Heterotope en orthotope tracheale transplantatie.

<ol><li>Adams, B., Berry, G., Huang, X., Shorthouse, R., Brazelton, T., Morris, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Immunosuppressive+therapies+for+the+prevention+and+treatment+of+obliterative+airway+disease+in+heterotopic+rat+trachea+allografts%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Immunosuppressive therapies for the prevention and treatment of obliterative airway disease in heterotopic rat trachea allografts.</a> Transplantation. 69, 2260-2266 Forthcoming.</li>
<li>Adams, B., Brazelton, T., Berry, G., Morris, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+respiratory+epithelium+in+a+rat+model+of+obliterative+airway+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">The role of respiratory epithelium in a rat model of obliterative airway disease.</a> Transplantation. 69, 661-665 Forthcoming.</li>
<li>Deuse, T., Schrepfer, S., Reichenspurner, H., Hoyt, G., Fischbein, M., Robbins, R., Pelletier, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Techniques+for+experimental+heterotopic+and+orthotopic+tracheal+transplantations+%26%23x2013%3B+when+to+use+which+model%3B+Transplant+Immunology+17%5BTitle%5D)+AND+%22%22%5BJournal%5D)">Techniques for experimental heterotopic and orthotopic tracheal transplantations &#x2013; when to use which model; Transplant Immunology 17.</a> , 255-261 (2007).</li>
<li>Hele, D., Yacoub, M., Belvisi, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+heterotopic+tracheal+allograft+as+an+animal+model+of+obliterative+bronchiolitis%5BTitle%5D)+AND+%22Respiratory+Research%22%5BJournal%5D)">The heterotopic tracheal allograft as an animal model of obliterative bronchiolitis.</a> Respiratory Research. 2, 169-183 Forthcoming.</li>
<li>Hertz, M., Jessurun, J., King, M., Savic, S., Murray, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reproduction+of+the+obliterative+bronchiolitis+lesion+after+heterotopic+transplantation+of+mouse+airways%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Pathology%22%5BJournal%5D)">Reproduction of the obliterative bronchiolitis lesion after heterotopic transplantation of mouse airways.</a> American Journal of Pathology. 142, (1993).</li>
<li>McDyer, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+and+murine+obliterative+bronchiolitis+in+transplant%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+American+Thoracic+Society%22%5BJournal%5D)">Human and murine obliterative bronchiolitis in transplant.</a> Proceedings of the American Thoracic Society. 4, 37-43 Forthcoming.</li>
<li>Schrepfer, S., Deuse, T., Hoyt, G., Sheikh, A., Hoffmann, J., Reichenspurner, H., Robbins, R., Pelletier, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experimental+orthotopic+tracheal+transplantation%3A+the+stanford+technique%5BTitle%5D)+AND+%22Microsurgery%22%5BJournal%5D)">Experimental orthotopic tracheal transplantation: the stanford technique.</a> Microsurgery. 27, 187-189 (2007).</li>
</ol>

Sonja Schrepfer heeft een onderzoekssubsidie ​​van de Deutsche Forschungsgemeinschaft (DFG) (SCHR992/3-1).] Alle dieren kregen menselijke zorg in overeenstemming met de beginselen van het Laboratory Animal Care, werden experimenten op dieren uitgevoerd in overeenstemming met de richtlijnen en voorschriften uiteengezet door de Nationale Vereniging voor Medisch onderzoek en de Gids voor de zorg en het gebruik van proefdieren gepubliceerd door de National Institutes of Health (National Institutes of Health publicatie 85-23, herzien 1985). Alle dieren werden verkregen van Charles River Laboratories (Sulzfeld, Duitsland) en werden gehouden in het dier opvang van het Universitair Ziekenhuis Hamburg Eppendorf. De dieren kregen standaard chow en water ad libitum.

Muizen zijn verkrijgbaar in verschillende transgeneic en knockout model, en dus geschikt om mechanistische vragen met betrekking tot OAD (4) te bestuderen. Beide modellen van tracheale transplantatie in deze video kan gebruikt worden als betrouwbare modellen voor het bestuderen van OAD ontwikkeling. Echter, elk model demonstreert voordelen en beperkingen. De heterotope tracheale transplantatie is eenvoudig uit te voeren en vereist geen speciale chirurgische opl...

heterotope en orthotope tracheale transplantatie in muizen worden gebruikt als modellen voor de ontwikkeling van de obliterans luchtwegaandoeningen study

Heterotopic and Orthotopic Tracheal Transplantation in Mice used as Models to Study the Development of  Obliterative Airway Disease

Obliterans luchtwegen ziekte (OAD) is de belangrijkste complicatie na longtransplantaties die lange termijn overleving (1-7) grenzen. De studie van de pathofysiologie, zijn behandeling en preventie van OAD, verschillende diermodellen van tracheale transplantatie in knaagdieren ontwikkeld (1-7). Hier gebruiken we twee bestaande modellen van luchtpijp transplantatie, de heterotope en orthotope model en blijk geven van hun voordelen en beperkingen. Voor de heterotope model, is de donor luchtpijp verpakt in de grotere omentum van de ontvanger, terwijl de donor luchtpijp wordt geanastomoseerd door de end-to-end anastomose in de orthotope model. In beide modellen, heeft de ontwikkeling van obliteratieve laesies histologische overeenkomend met klinische OAD aangetoond (1-7). Deze video laat zien hoe uit te voeren zowel de heterotope evenals de orthotope tracheale transplantatie techniek in muizen, en vergelijkt het tijdsverloop van OAD ontwikkeling in zowel modellen met histologie.

Deze video laat zien en vergelijkt twee experimentele modellen te bestuderen van de ontwikkeling van obliteratieve luchtwegaandoeningen (OAD) in muizen, de heterotope en orthotope tracheale transplantatie model.

Heterotope en orthotope Tracheale transplantatie in Muizen worden gebruikt als modellen voor de ontwikkeling van de obliterans luchtwegaandoeningen Study

Obliteratieve luchtwegziekte (OAD) is de belangrijkste complicatie na longtransplantaties die de overleving op lange termijn beperkt (1-7).
Om de ...

Zowel de heterotope als de orthotope tracheatransplantaties beginnen met het verwijderen van de donorluchtpijp voor de heterotope transplantatie. Er wordt een abdominale incisie gemaakt bij de ontvanger en de darmen worden op een handschoen geplaatst. Voor de orthotope transplantatie wordt de donorluchtpijp in het midden van het omentum majus geplaatst en met twee hechtingen vastgezet.Nadat er een cervicale incisie is gemaakt bij de ontvanger, wordt de trachea bevrijd van het omliggende weefsel en doorgesneden. Vervolgens wordt de donor-trachea tussen de twee uiteinden van de trachea van de ontvanger geplaatst en worden de trachea's aan elkaar gehecht. Hoi, ik ben Sonya Refa.Ik ben professor in de immunologie en cardiale chirurgie bij de afdeling cardiovasculaire chirurgie van het University Heart Center in Hamburg. Mijn laboratorium richt zich op transplantatie-immunologie en stamcel-immunobiologie. Vandaag introduceren we u bij het onderwerp Moon Auto en het transplantatiemodel van de twig hier.Hallo, ik kom van het TSI-lab. We maken gebruik van de also-topic en de heterotopische trachea-transplantatie muismodellen om de mechanismen achter de ontwikkeling van obstructieve luchtwe

heterotopic-orthotopic-tracheal-transplantation-mice-used-as-models

Research

JoVE Journal

Biology

Biologie

Bronchiolitis obliterans is de sleutel belemmering voor de lange termijn overleving van patiënten na longtransplantatie en het ontbreken van een robuuste preklinisch model sluit de behandeling van bronchiolitis obliterans immunopathogenese. In tegenstelling tot andere vaste orgaantransplantaties, gevasculariseerd muis longtransplantatie heeft pas recent ontwikkeld. Hier laten we ons onafhankelijk van elkaar ontwikkeld Bronchiolitis obliterans model na murine orthotoop single-longtransplantatie.

Ontwikkeling van Bronchiolitis obliterans in een muizenmodel van orthotope longtransplantatie

We hebben een eenvoudige, betrouwbare en relatief goedkope methode voor endotracheale intubatie bij muizen via directe laryngoscopie behulp van een otoscoop met een 2,0 mm speculum ontwikkeld. Deze techniek is atraumatische en kan worden gebruikt voor herhaalde metingen in chronische experimenten. We vinden het superieur aan tracheostomie of eerder gerapporteerde niet-chirurgische technieken.

Luchtpijpintubatie in Muizen<em&gt; Via</em&gt; Directe laryngoscopie behulp van een otoscoop

Het gebruik van een model dat de toestand van longziekten bij mensen nabootst is kritiek voor het bestuderen van de pathofysiologie en / of etiologie van een bepaalde ziekte en ontwikkelen van therapeutische interventie. Hier een niet-invasieve intratracheaal intubatie methode die direct exogene materialen kunnen leveren aan muizenlongen wordt gepresenteerd.

Niet-invasieve Intratracheaal intubatie om te studeren de Pathologie en Fysiologie van Mouse Lung

Om gecombineerde transplantatie van vaste organen en vaatvoorziene samengestelde allogene transplantaten te bestuderen, beschrijven we een nieuw heterotopisch en bloc model voor borstwand-, thymus- en harttransplantatie bij muizen, waarbij gebruik wordt gemaakt van een cervicale niet-naadloze manchettechniek.

A Novel Microchirurgische Model voor Heterotope, En Bloc borstwand, Thymus, en harttransplantatie in Muizen

Dit artikel presenteert een snelle en eenvoudige methode voor het toedienen van bleomycine rechtstreeks in de muis luchtpijp via intubatie. Belangrijkste voordelen van deze werkwijze zijn dat het zeer reproduceerbaar, gemakkelijk onder de knie, en vereist geen gespecialiseerde apparatuur of lange hersteltijden.

Een verbeterde werkwijze voor snelle intubatie van de trachea in muizen

Graft stenose vormt een kritische obstakel in weefsel ontworpen airway vervanging. Om te onderzoeken cellulaire mechanismen ten grondslag liggen aan stenose, gebruiken we een lymfkliertest model van weefsel ontworpen tracheale vervanging met geplaatste beenmerg mononucleaire cellen (BM-MNC). Hier, detail we onze protocol, met inbegrip van de steiger productie, BM-MNC isolatie, graft zaaien en implantatie.

Zaaien en implantatie van een Biosynthetic weefsel-engineered tracheale Graft in een muismodel

Verschillende diermodellen van congenitale diafragmatische hernia en foetale tracheale occlusie bieden voor- en nadelen met betrekking tot ethische kwesties, kosten, chirurgische moeilijkheidsgraad, grootte, overlevingspercentages en beschikbaarheid van genetische hulpmiddelen. Dit model biedt een nieuw hulpmiddel om de impact van zowel tracheale occlusie als verhoogde luminale druk op de longontwikkeling te bestuderen.

Transuterine foetale tracheale occlusie model in muizen

Het doel van dit manuscript is om de microchirurgische stappen te beschrijven die nodig zijn om een heterotope larynxtransplantatie bij muizen uit te voeren. De voordelen van dit muismodel ten opzichte van andere diermodellen van larynxtransplantatie zijn de kosteneffectiviteit en de beschikbaarheid van immunologische testen en gegevens.

Een heterotopisch muismodel voor het bestuderen van larynxtransplantatie

Het muizen intrapulmonale tracheale transplantatie (IPTT) model is waardevol voor het bestuderen van obliteratieve luchtwegaandoeningen (OAD) na longtransplantatie. Het biedt inzicht in longspecifiek immunologisch en angiogeen gedrag bij luchtwegvernietiging na allotransplantatie met een hoge reproduceerbaarheid. Hier beschrijven we de IPTT-procedure en de verwachte resultaten.

Intrapulmonale tracheale transplantatie bij muizen: een model voor het onderzoeken van obliteratieve luchtwegaandoeningen na longtransplantatie

Het testen van visuele gevoeligheid bij hagedissen met behulp van een operante conditionering paradigma dat het afspelen van video van de random-dot kinematograms en computer-gegenereerde ongewervelde dieren in dienst heeft.

Het testen van visuele gevoeligheid voor de snelheid en richting van de beweging in Lizards

Leer heterotopische en orthotopische tracheale transplantatie bij muizen om obliteratieve luchtwegaandoeningen te bestuderen. Deze modellen tonen chirurgische technieken en verschillen in ziekteontwikkeling voor transplantatieonderzoek.

Heterotope en orthotope Tracheale transplantatie in Muizen worden gebruikt als modellen voor de ontwikkeling van de obliterans luchtwegaandoeningen Study (Video) | JoVE Journal

Heterotope en orthotope Tracheale transplantatie in Muizen worden gebruikt als modellen voor de ontwikkeling van de obliterans luchtwegaandoeningen Study

Meer video's verkennen