Waarom is nulhypothesetoetsing belangrijk voor de kwantificering van schuifspanningsafhankelijke adhesie?

Toetsing van de nulhypothese maakt een objectieve beoordeling mogelijk van of de waargenomen bacteriële adhesie onder stroming significant verschilt van baseline- of controlecondities, wat bijdraagt aan een robuuste validatie van targets en mechanistische risicoreductie.

Hoe past de isolatie van onafhankelijke variabelen in de workflow voor in vivo VWF-activatie?

Het isoleren van variabelen, zoals de toepassing van een calciumionofoor, maakt een nauwkeurige toeschrijving van VWF-strengvorming en bacteriële aggregatie aan specifieke triggers mogelijk, wat de mechanistische paden in de ontdekkingspijplijn verheldert.

Wat maken kwantitatieve time-lapse beeldmetingen mogelijk in dit model?

Kwantitatieve time-lapse imaging biedt reproduceerbare metrieken van bacteriële adhesiegebeurtenissen, wat statistische vergelijking tussen experimentele groepen mogelijk maakt en datagestuurde beslissingen over verdere stappen ondersteunt.

Waarom zijn replicatie-eisen cruciaal voor cross-functionele teams op het gebied van infectieziekten?

Replicatie zorgt ervoor dat waargenomen adhesieverschijnselen robuust en reproduceerbaar zijn, wat het vertrouwen in de gegevens tussen teams vergemakkelijkt en bijdraagt aan gezamenlijke inspanningen voor de ontwikkeling en validatie van assays.

Welke statistische analysemogelijkheden zijn vereist vóór het implementeren van beeldgebaseerde adhesiekwantificering?

Teams moeten workflows opstellen voor het verwerken en analyseren van time-lapse beelden, inclusief drempelwaarde-bepaling (thresholding), het tellen van gebeurtenissen en statistische vergelijking, om betrouwbare en bruikbare resultaten te garanderen voor besluitvorming binnen R&D.

An In Vivo Model to Study Shear-Dependent Bacterial Adhesion

JoVE Encyclopedia of Experiments

Microbiologie

0 weergaven • 3:50 min • July 1st, 2026

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Take an anesthetized mouse fasted overnight to reduce bowel movements.

Apply eye ointment to prevent corneal drying. Secure it on a heating pad to regulate body temperature.

Expose the right jugular vein. Insert a catheter and secure it with stitches.

Open the peritoneal cavity, then place the mouse on a transparent plate.

Spread the intestine to expose the mesenterium, a supportive membrane, to access the blood vessels.

Maintain body temperature and apply saline to prevent dehydration.

Place the mouse under a fluorescence microscope, then immobilize the vessels.

Apply an ionophore that elevates calcium levels in endothelial cells. This triggers the release of von Willebrand factor (VWF), forming coiled strands on the cell surface.

Inject fluorescently labeled bacteria through the catheter to reach the blood vessel.

The shear stress from blood flow uncoils the VWF strands, which bind to bacterial adhesins and form bacterial aggregates.

Capture time-lapse images to quantify shear-dependent bacterial adhesion.

Fast six to eight-week-old mice the night before the experiment to reduce bowel movement. The day of the experiment begin by injecting 0.1 milligrams of buprenorphine per kilogram of body weight as an analgesic. Next, anesthetize the mouse and apply ointment to the eyes.

Place the mouse on the thermo-controlled heating pad under the dissecting scope and test that the mouse shows no pedal reflex. Make a one-centimetre incision parallel to the jugular vein. Remove the right side of the cervical muscle and then isolate the jugular vein from the surrounding tissue.

Insert a two French intravenous catheter into the right jugular vein and secure it in place using stitches. Then, make a midline abdominal incision to open the peritoneal cavity. Place the mouse on its right side on a transparent plate and secure the cannula with tape.

Gerelateerde video's

0 Bekeken

Laatst bijgewerkt: 22 augustus 2026

An In Vivo Model to Study Shear-Dependent Bacterial Adhesion

Overzicht

Belangrijkste studiecomponenten

Wetenschappelijk vakgebied

Achtergrond

Doel van de studie

Gebruikte methoden

Belangrijkste resultaten

Conclusies

Veelgestelde vragen

Industriële Relevantie voor Management

Strategische Toepassingen in Biofarmaceutische R&D

Vroege Ontdekking & Target Validatie

Screening & assayontwikkeling

Translationeel & Preklinisch Onderzoek

Pipeline- & workflowintegratie

Operationele & Bedrijfsimpact

Overwegingen voor implementatie

Biopharma Veelgestelde Vragen

Laminaire stroming gebaseerde testen te onderzoeken Leukocyte aanwerving op gekweekte vasculaire cellen en aanhangend bloedplaatjes

Een In Vitro Model van een Parallel-plaat perfusie-systeem te bestuderen van de naleving van de bacteriële om te enten van weefsels

Pneumococcus-infectie van primaire humane endotheliale cellen in constante stroming

In vitro assay van bacteriële hechting op zoogdieren epitheelcellen

Introductie van Shear Stress in de studie van bacteriële hechting

In Vitro Parallel-Plate Flow Model to Study Bacterial Adhesion on a Tissue Biopsy

In Vitro Gut Model to Assess Bacterial Adhesion and Internalization

Micro-Parallel Plate Flow Chamber Model for Studying Bacterial Adhesion to Human Endothelial Cells

Generatie afschuifhechting Kaart behulp SynVivo Synthetische Microvascular Networks

In vitro en in vivo model voor Bacteriële hechting aan de vaatwand Onder Flow omstandigheden te bestuderen