Virale genoverdracht in het muizenhart voor het evalueren van geneffecten op de hartfunctie

Begin met een geanestheseerde muis in rugligging, waarbij de huid van de thorax is geschoren.

Desinfecteer de geschoren huid.

Gebruik echografie om het hart te visualiseren en de buitenwand van de linker ventrikel te identificeren.

Neem een microspuit met een recombinant virus dat een testgen codeert waarvan wordt vermoed dat het de hartfunctie beïnvloedt.

Breng onder echogeleiding de naald in de ventricelwand in.

Injecteer het virus in de spierlaag van de wand.

Voer een tweede en derde injectie uit, gericht op verschillende ventriculaire locaties om een bredere genexpressie te bereiken.

Trek de naald terug en laat de muis herstellen.

Het virus bindt aan receptoren op ventriculaire spiercellen, waardoor receptor-gemedieerde endocytose en transport van het virale genoom naar de nucleus worden geïnitieerd.

De expressie van het virale genoom leidt tot de synthese van het gecodeerde eiwit.

Het muismodel is nu gereed om de effecten van virus-geïnduceerde genexpressie op de hartfunctie te beoordelen.

Begin met het steriliseren van de linkeronderzijde van de borststreek van de geanestheseerde muis door drie keer in een cirkelvormige beweging afwisselend een scrub op basis van jodium of chloorhexidin