JoVE Encyclopedie van Experimenten
Microbiologie
0 weergaven • 2:44 min. • September 30th, 2026
Begin met een multi-wellplaat met een seriële verdunning van de testverbinding om de antivirale activiteit te beoordelen.
Voeg in elke put een suspensie van menselijke embryonale niercellen toe die recombinant mazelenvirus dat luciferase tot expressie brengt bevat.
Incubeer de cellen zodat ze kunnen hechten aan de bodem van elke put.
In de controleput zonder de testverbinding fuseert het virus met het celmembraan en laat het zijn genoom vrij in het cytoplasma.
Het virale genoom stuurt de productie van viraal RNA en eiwitten aan, samen met het reportereiwit luciferase.
In de testputjes remt de antivirale verbinding de virale replicatie, waardoor de productie van luciferase afneemt.
Voeg een luciferase-specifiek substraat toe aan elke put, dat interageert met de luciferase en luminescentie afgeeft.
Gebruik een platenlezer om de luminescentie-intensiteit in elke put te meten.
Een lagere luminescentie in de testputjes vergeleken met het controleputje duidt op virale inhibitie.
Een progressieve afname van de luminescentie bij een toenemende concentratie van de verbinding duidt op een dosisafhankelijke remming van de virale replicatie.
Voeg één microliter van de plaat met verbindingverdunningen to
Bekijk het volledige transcript en krijg toegang tot duizenden wetenschappelijke video's