Amoebe-gebaseerde verrijking van reuzenvirussen uit een watermonster uit het milieu

Neem een multi-wellplaat met amoeben die zijn gekweekt in starvation medium.

Het uithongeringsmedium bevat antibiotica en antischimmelmiddelen die de microbiële groei beperken, terwijl de amoeben levensvatbaar blijven zonder zich te vermenigvuldigen of rustcysten te vormen.

Neem een buis met het milieuwatermonster en vortex deze om virussen vrij te maken uit zwevende vaste stoffen en residuen.

Voeg het watermonster dat de virussen bevat toe aan de amoeben.

Plaats de plaat in een zak met een nat kompres om verdamping te voorkomen en incubeer.

Tijdens de incubatie nemen de amoeben de reusachtige virussen op via fagocytose.

Zodra het virus is geïnternaliseerd, laat het zijn genoom vrij in het cytoplasma van de amoebe.

Er vormt zich een cytoplasmatische virale fabriek rond het virale genoom, waar het de machinerie van de gastheer gebruikt om te repliceren en virale eiwitten te produceren die assembleren tot nieuwe virionen.

Dit zorgt ervoor dat de amebe-cellen afronden en lyseren, waarbij nieuwe virionen in het medium vrijkomen, wat de concentratie van de reuzenvirussen voor daaropvolgende detectie verhoogt.

Na het verzamelen van vuile watermonsters volgens het tekstprotocol, bereidt u de gasth