Name: C. elegans Positieve Butanon Learning, op korte termijn en lange termijn geheugen Associatieve Assays (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2011-03-11T12:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 58 s
Description: Leer hoe je associatief leren en geheugen bij C. elegans evalueert met chemotaxis naar butanon. Deze methode meet kort- en langetermijngeheugen om inzicht te geven in cognitieve veroudering.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Wij danken W. Ryu voor advies over onze eerste beeldvorming set-up, Z. Gitai voor de suggestie om ImageJ 13 te gebruiken om wormen tellen, en J. Ashraf voor hulp met Google SketchUp. CTM is een Pew Scholar in de Biomedische Wetenschappen, een McKnight Scholar, en een Keck Scholar.

<ol><li>Bargmann, C. I., Hartwieg, E., Horvitz, H. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Odorant-selective+genes+and+neurons+mediate+olfaction+in+C.+elegans%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Odorant-selective genes and neurons mediate olfaction in C. elegans.</a> Cell. 74, 515-515 (1993).</li>
<li>Ward, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chemotaxis+by+the+nematode+Caenorhabditis+elegans%3A+identification+of+attractants+and+analysis+of+the+response+by+use+of+mutants%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Chemotaxis by the nematode Caenorhabditis elegans: identification of attractants and analysis of the response by use of mutants.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 70, 817-817 (1973).</li>
<li>Bono, M. de, Maricq, A. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neuronal+substrates+of+complex+behaviors+in+C.+elegans%5BTitle%5D)+AND+%22Annu+Rev+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Neuronal substrates of complex behaviors in C. elegans.</a> Annu Rev Neurosci. 28, 451-451 (2005).</li>
<li>Mori, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetics+of+chemotaxis+and+thermotaxis+in+the+nematode+Caenorhabditis+elegans%5BTitle%5D)+AND+%22Annu+Rev+Genet%22%5BJournal%5D)">Genetics of chemotaxis and thermotaxis in the nematode Caenorhabditis elegans.</a> Annu Rev Genet. 33, 399-399 (1999).</li>
<li>Zhang, Y., Lu, H., Bargmann, C. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pathogenic+bacteria+induce+aversive+olfactory+learning+in+Caenorhabditis+elegans%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Pathogenic bacteria induce aversive olfactory learning in Caenorhabditis elegans.</a> Nature. 438, 179-179 (2005).</li>
<li>Kauffman, A. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Insulin+signaling+and+dietary+restriction+differentially+influence+the+decline+of+learning+and+memory+with+age%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Biol%22%5BJournal%5D)">Insulin signaling and dietary restriction differentially influence the decline of learning and memory with age.</a> PLoS Biol. 8, e1000372-e1000372 (2010).</li>
<li>Torayama, I., Ishihara, T., Katsura, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Caenorhabditis+elegans+integrates+the+signals+of+butanone+and+food+to+enhance+chemotaxis+to+butanone%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Caenorhabditis elegans integrates the signals of butanone and food to enhance chemotaxis to butanone.</a> J Neurosci. 27, 741-741 (2007).</li>
<li>Silva, A. J., Kogan, J. H., Frankland, P. W., Kida, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CREB+and+memory%5BTitle%5D)+AND+%22Annu+Rev+Neurosci%22%5BJournal%5D)">CREB and memory.</a> Annu Rev Neurosci. 21, 127-127 (1998).</li>
<li>Meyer, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Iterative+image+transformations+for+an+automatic+screening+of+cervical+smears%5BTitle%5D)+AND+%22J+Histochem+Cytochem%22%5BJournal%5D)">Iterative image transformations for an automatic screening of cervical smears.</a> J Histochem Cytochem. 27, 128-128 (1979).</li>
<li>Otsu, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Threshold+Selection+Method+from+Gray-Level+Histograms%5BTitle%5D)+AND+%22IEEE+Transactions+on+Systems%2C+Man%2C+and+Cybernetics%22%5BJournal%5D)">A Threshold Selection Method from Gray-Level Histograms.</a> IEEE Transactions on Systems, Man, and Cybernetics. 9, 62-62 (1979).</li>
<li>Brenner, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+genetics+of+Caenorhabditis+elegans%5BTitle%5D)+AND+%22Genetics%22%5BJournal%5D)">The genetics of Caenorhabditis elegans.</a> Genetics. 77, 71-71 (1974).</li>
<li>Stephens, G. J., Johnson-Kerner, B., Bialek, W., Ryu, W. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dimensionality+and+dynamics+in+the+behavior+of+C.+elegans%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Comput+Biol%22%5BJournal%5D)">Dimensionality and dynamics in the behavior of C. elegans.</a> PLoS Comput Biol. 4, e1000028-e1000028 (2008).</li>
<li>Abramoff, M. agelhaes, Ram, P. J., J, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Image+Processing+with+ImageJ%5BTitle%5D)+AND+%22Biophotonics+International%22%5BJournal%5D)">Image Processing with ImageJ.</a> Biophotonics International. 11, 36-36 (2004).</li>
</ol>

De C. elegans olfactorische associatief leren en het geheugen testen hier gepresenteerde onderscheid te maken tussen de processen van massale leren, afstand van elkaar leren, korte-termijn geheugen en lange-termijn geheugen. Deze testen vertrouwen op de wormen &#39;mogelijkheden om voedsel en chemische geuren zin in hun omgeving 1,2 en positieve associaties tussen de twee vormen. Daarom 6, de testen zijn zeer gevoelig voor de honger in de start populatie van de dieren, en de grote aandacht aan moet worden genomen om ervoor te zorgen dat goed wormen gevoed worden voor en na de training. Single massale opleiding levert op korte termijn associatief geheugen. Het toegenomen aantal van conditionering periodes en op een afstand training paradigma is van cruciaal belang voor het bereiken van lange-termijn-geheugen associatief in C. elegans als in andere organismen. 6,8 Misschien test kon worden gewijzigd om op lange termijn geheugen van associaties tussen verschillende geconditioneerde en ongeconditioneerde stimuli te produceren. Onze associatief leren en geheugen testen kunnen gebruikt worden om het leren en het geheugen capaciteiten van wild-type te vergelijken met ouder worden of genetische mutant dieren. Bijvoorbeeld, is terwijl zowel associatief leren en lange-termijn-geheugen associatieve vermogens daling van de vergrijzing van wild-type wormen, leren is meer onderhouden met de leeftijd bij dieren met een verminderde insuline signalering, en leren en geheugen meer onderhouden met de leeftijd in calorisch beperkt dieren. 6 Deze testen zijn ook vatbaar voor RNAi behandeling of farmacologische manipulatie van C. elegans. Bijvoorbeeld, de behandeling van wormen met een daf-2 RNAi verbetert de korte-en lange termijn associatieve geheugen, omgekeerd, het blokkeren van gentranscriptie en eiwitsynthese met drugs (actinomycine D en cycloheximide, respectievelijk) tijdens de training uit elkaar verstoort lange-termijn geheugen formatie. 6 Lange-termijn geheugen is een proces dat cruciaal is om te overleven in alle dieren, en het blijkt dat veel van de moleculaire machinerie die betrokken zijn bij het ​​geheugen van een Pavlov-vereniging is bewaard gebleven van wormen tot zoogdieren. 6 Het vermogen om onderscheid te maken en te testen associatief leren, korte en lange-termijn geheugen met behulp van deze geur testen maakt C. elegans een uitstekend systeem voor de verdere studie van het geheugen, en kan inzicht geven in neurodegeneratieve processen die leiden tot het verlies van leren en geheugen bij de mens.

<table><tbody><tr><td>Natriumazide</td><td>Fisher Scientific</td><td>S227</td><td>Bereid een concentratie van 1 M in gedistilleerd water</td></tr><tr><td>Ethylalcohol 190 Proof</td><td>Pharmco-AAPER</td><td>DSP-CT-18</td><td>&amp;gt;95% Ethanol kan onzuiverheden bevatten die chemotaxis-assays beïnvloeden</td></tr><tr><td>2-Butanon 99+%</td><td>Acros Organics</td><td>14967-0010</td><td></td></tr><tr><td>Basler IEEE-1394/FireWire Area Scan CMOS-camera</td><td>Edmund Scientific</td><td>NT56-683</td><td></td></tr><tr><td>InfiniMite videolen &amp;#8211; Alpha Industrial</td><td>Edmund Scientific</td><td>NT56-202</td><td></td></tr><tr><td>Dolan-Jenner MI-150 glasvezelverlichtingssysteem</td><td>Edmund Scientific</td><td>NT55-718</td><td></td></tr><tr><td>8&amp;#8221; x 8&amp;#8221; achtergrondverlichting</td><td>Schott AG</td><td>A08927</td><td></td></tr><tr><td>Standaard boomstatief</td><td>Edmund Scientific</td><td>NT54-120</td><td></td></tr><tr><td>3/4&amp;#8221; paaladapter voor boomstatieven</td><td>Edmund Scientific</td><td>NT54-124</td><td></td></tr><tr><td>Standaard vaste 1/4-20 montageplaat</td><td>Edmund Scientific</td><td>NT54-122</td><td></td></tr></tbody></table>

c. elegans positieve butanon learning, op korte termijn en lange termijn geheugen associatieve assays

C. elegans Positive Butanone Learning, Short-term, and Long-term Associative Memory Assays

Het geheugen van ervaringen en geleerde informatie is cruciaal voor organismen om keuzes te maken die hun overleving hulp. C. elegans navigeert zijn omgeving door middel van neuron-specifieke detectie van voedsel-en chemische geuren 1, 2, en kan nutritieve staten associëren met chemische geuren 3, de temperatuur 4, en de pathogeniteit van een bron van voedsel 5. We beschrijven hier analyses van C. elegans associatief leren en korte-en lange termijn associatief geheugen. We pasten een aversieve olfactorisch leren paradigma zes in plaats daarvan een positief antwoord, de test gaat om uitgehongerde ~ 400 wormen, dan is het voeden van de wormen in de aanwezigheid van de AWC-neuron voelde vluchtige chemoattractant butanon in een concentratie die een lage chemotactische index lokt (vergelijkbaar naar Toroyama et al.. 7). Een standaard bevolking chemotaxis assay1 test de wormen &#39;attractie aan de geurstof onmiddellijk of minuten tot uren na conditionering. Na het conditioneren, wild-type dieren &#39;chemotaxis naar butanon verhoogt ~ 0,6 Chemotaxis Index eenheden, de &quot;Learning Index&quot;. Associatief leren is afhankelijk van de aanwezigheid van zowel de voedsel-en butanon tijdens de training. Koppelen voedsel en butanon voor een periode van conditionering (&quot;massale training&quot;) produceert op korte termijn associatief geheugen dat ~ 2 uur duurt. Meerdere conditioning perioden met rustperiodes tussen (&quot;afstand training&quot;) levert op lange termijn associatief geheugen (&lt;40 uur), en is afhankelijk van de cAMP Response Element Binding protein (CREB), 6 een transcriptiefactor die nodig zijn voor lange-termijn geheugen over soorten. 8 Ons protocol omvat ook beeldanalyse methoden voor een snelle en nauwkeurige bepaling van chemotaxis indices. Een hoog contrast afbeeldingen van dieren op de chemotaxis assay platen worden opgevangen en geanalyseerd door worm te tellen software in MatLab. De software corrigeert voor oneffen achtergrond met behulp van een morfologische tophat transformatie. Negen Otsu De methode wordt vervolgens gebruikt om een drempel te bepalen te scheiden wormen van de achtergrond. 10 zeer kleine deeltjes worden automatisch verwijderd en grotere niet-worm regio&#39;s (plaatranden of agar stoten) zijn verwijderd door handmatige selectie. De software schat dan de grootte van een worm door het negeren van regio&#39;s die boven een bepaalde maximale omvang en het nemen van de mediane grootte van de overige regio&#39;s. Het aantal wormen is dan geschat door de totale oppervlakte die als bezet door wormen door de geschatte grootte van een enkele worm. We hebben gevonden dat het leren en korte-en lange-termijn geheugen kan worden onderscheiden, en dat deze processen soortgelijke belangrijke moleculen te delen met hogere organismen. 6,8 Onze testen kunnen snel testen nieuwe kandidaat-genen of moleculen die leren en korte of lange invloed -termijn geheugen in C. elegans die relevant zijn voor verschillende diersoorten.

Hier beschrijven we methoden om te testen C. elegans associatief leren en korte-en lange termijn associatief geheugen. Deze populatie testen maken gebruik van de wormen mogelijkheden om chemotax in de richting van vluchtige geur-, en vormen positieve associaties bij de paring voedsel met de chemoattractant butanon. Verhoging van het aantal van conditionering periodes leidt tot lange-termijn geheugen.

C. elegans Positieve Butanon Learning, op korte termijn en lange termijn geheugen Associatieve Assays

Het geheugen van ervaringen en aangeleerde informatie is cruciaal voor organismen om keuzes te maken die bijdragen aan hun overleving. C. elegans navigeert door zijn omgeving ...

Het algemene doel van het volgende experiment is om het korte- en langetermijngeheugen van een aangeleerde positieve associatie tussen voedsel en de chemoattractant butaan te testen, met C. elegans als model. Dit wordt bereikt door eerst gesynchroniseerde, goed gevoede jonge volwassen wormen gedurende één uur uit te hongeren.Vervolgens worden de wormen getraind in aanwezigheid van voedsel en butanon; dit gebeurt via massconditioning voor kortstondig associatief geheugen en via gespatieerde conditionering voor langdurig associatief geheugen. Na de conditionering wordt de chemotaxis naar butanon gemeten en vergeleken met de naïeve chemotaxis. Om de retentie van het geheugen te bestuderen, worden resultaten verkregen die de duur van het kort- en langetermijn associatief geheugen van de aangeleerde associatie tussen voedsel en butanon aantonen, op basis van veranderingen in de leerindex.Deze methode kan helpen bij het beantwoorden van kernvragen op het gebied van cognitieve veroudering en ziekten, zoals welke genetische paden vereist zijn voor de neuronale functie bij normale veroudering en neurodegeneratieve ziektebeelden, en hoe leren en geheugen kunnen worden verbeterd. Onder omstandigheden van cognitieve beperking worden wormen voorbereid met standaardmethoden op groeimedia-platen van 100 millimeter hoog, ingezaaid met één milliliter OP 50 e coli. Gebruik jonge volwassenen met een dichtheid van ongeveer 5.000 wormen of minder per plaat.Verzamel de wormen door voorzichtig M9-buffer op de plaat te gieten en de wormen los te schudden. Probeer agitatie te minimaliseren, omdat dit ongewenste bacteriën kan losmaken. Kantel vervolgens de plaat en zuig het mengsel van buffer en wormen vanuit de hoek op.Gebruik een P 1000 pipet. Draag de wormen over naar een conisch buisje van 15 milliliter. Let erop dat u de wormen niet tegen de wand van het buisje pipetteert als er nog wormen op de plaat achterblijven.Herhaal deze stap één tot twee keer. Laat de wormen door zwaartekracht naar de bodem van de buis zakken. Centrifugatie wordt niet aanbevolen voor optimale resultaten.Zodra de cellen zijn neergeslagen, wordt het supernatant via vacuüm verwijderd en wordt er gewassen met ten minste drie tot vier milliliters M nine buffer. Werk snel om uithongering te voorkomen. Herhaal deze procedure twee keer, voor een totaal van drie wasbeurten.Op dit punt kan een cohort wormen apart worden gezet om te dienen als de naïeve groep in de chemotaxis-assays die later zullen worden gedemonstreerd om de wormen voor te bereiden op de training; voeg drie tot vier milliliter M9-buffer toe aan de buis en laat de wormen één uur uithongeren bij kamertemperatuur. Bereid de conditioneringsplaten voor door twee microliter 2-butanon in 95% ethanol uit te strijken op de binnenzijde van de deksels van 60 millimeter NGM-platen die zijn geënt met 500 microliter OP50 E. coli. Haal de suspensie uit de buis met uitgehongerde wormen en gebruik een P1000-pipet om 100 tot 200 microliter wormen naar elke conditioneringsplaat over te brengen. Incubeer de conditioneringsplaten één uur bij kamertemperatuur na de conditionering.Was de wormen van de platen met ongeveer één milliliter M9-buffer en breng ze over naar een conische buis van 15 milliliter. Herhaal de eerder gedemonstreerde milde wasmethode totdat de buffer helder oogt. Na het wassen kan een deel van de wormen worden verwijderd en getest in de chemotaxis-assay om als nulmeting-groep voor één keer mast-associatief leren te dienen, ter voorbereiding op platen die aanvullende tijdspunten vertegenwoordigen.Breng 100 tot 200 microliters wormen over naar gezaaide 60 millimeter NGM-platen. Incubeer deze platen na conditionering gedurende 0,51 of twee uur bij kamertemperatuur. Was na elk tijdstip de wormen voorzichtig van de platen in een 15 milliliter conische buis en herhaal dit nog één tot twee keer.Met M nine-buffer, waarbij dezelfde milde wasprocedures worden gevolgd, wordt het kortetermijnassociatieve geheugen getest met behulp van de chemotaxis-assay, die later wordt gedemonstreerd. Bereid de conditioneringsplaten en wormen voor zoals gedemonstreerd voor kortetermijntraining, maar laat de wormen slechts 30 minuten incuberen bij kamertemperatuur. Verzamel na de incubatie de wormen zoals eerder gedemonstreerd.Breng ze over naar NIET-GEZAAIDE NGM-platen van 60 millimeter. Laat de wormen 30 minuten lang uithongeren op de ongezaaide platen bij kamertemperatuur. Nadat de wormen zijn uitgehongerd, wast u de wormen met M9-buffer en plaatst u ze terug in de conische buis van 15 milliliter. Herhaal deze stappen totdat in totaal zeven conditioneringsblokken en zes uithongeringsblokken zijn voltooid.Wanneer de conditionering is voltooid, worden de wormen van de conditioneringsplaten teruggewassen in een conische buis. Zoals eerder beschreven, kan een cohort wormen worden gebruikt om direct na de conditionering te testen op associatief leren met zeven tijdsintervallen. Breng de resterende populatie wormen over naar 100 millimeter HGM-platen met één milliliter OP 50.Breng opnieuw 100 tot 200 µL wormen per plaat aan om er zeker van te zijn dat er voldoende bacteriën aanwezig zijn om de populatie te ondersteunen. Incubeer de platen na conditionering bij 20 °C gedurende 16, 24 of 40 uur, wat de tijdspunten voor het langetermijnassociatieve geheugen vertegenwoordigt, om het langetermijnassociatieve geheugen voor de associatie tussen voedsel en butanon te testen. Was de wormen voorzichtig van de platen in een conische buis van 15 mL, en vervolgens nog één tot twee keer met M9-buffer na elk tijdspunt, en test de wormen in de chemotaxis-assay.Om de platen voor de chemotaxis-assay voor te bereiden, markeert u de onderkant van niet-geplaatste 100 millimeter NGM-platen met stippen nabij de zijkant op drie locaties, zoals hier weergegeven. Breng één microliter van één molar natriumazide aan op de geurstof- en controleplaatsen. Doe dit niet meer dan 15 minuten voordat de assay start om diffusie van de verlammende middelen te minimaliseren.Breng vervolgens één microliter 95% ethanol en 10% butanon aan op de overeenkomstige posities op de gemarkeerde assayplaat. Dit moet bovenop het eerder aangebrachte natriumazide gebeuren. Verwijder zoveel mogelijk van de M9-buffer uit de buis met de bezonken wormen.Gebruik een P 20 pipet met een voorgesneden tip om 15 µL wormen in drie intervallen van vijf µL op de oorsprong van de assayplaat aan te brengen. Draai vervolgens de hoek van een Kimwipe tot een klein puntje en gebruik deze om het overtollige M9-buffer weg te blotten, waarbij u voorzichtig bent om de agar niet te doorprikken.Door het overschot aan buffer te verwijderen, komen de wormen vrij op de assayplaat. Indien beeldvorming wordt gebruikt om de wormen te tellen, geeft een afbeelding van de startpositie direct na deze vrijgave het totaal aantal dieren voor een assayplaat. Incubeer de chemotaxis-assayplaat na incubatie één uur bij kamertemperatuur, tel het aantal wormen bij de startpositie, de ethanolvlekken en de butonvlekken, evenals het totaal aantal wormen op de assayplaat.Over het algemeen zullen wormen die verlamd zijn door natriumazide zich binnen een straal van één centimeter rond de plekken bevinden en er kaarsrecht uitzien. Omdat veel dieren op elkaar gestapeld liggen, kunnen de wormen handmatig worden geteld of worden gekwantificeerd met behulp van beeldbewerkings- en analyse-software. Wij geven de voorkeur aan dat laatste voor het gemak en de betrouwbaarheid van de resultaten.Zodra de wormen bij de startvlekken met ethanol en butanon zijn gekwantificeerd, berekent u de KeyAx-index zoals hier wordt weergegeven. De typische naïeve chemotaxisindex voor wild-type wormen die reageren op 10%Butone is ongeveer 0,2. Massale of gespreide training verhoogt de chemotaxisindex over het algemeen naar 0,7 tot 0,8 op tijdstip nul, wat resulteert in een leerindex van ongeveer 0,6.Naïve chemotaxis is zeer gevoelig voor de juiste verzorging van de wormen. Deze figuur toont het duidelijke verschil in de CI tussen goed gevoede en uitgehongerde naïve wormen en benadrukt het belang van een correcte techniek. Geheugenretentie wordt weerspiegeld in de tijd die de chemotaxis-index nodig heeft om terug te keren naar naïve niveaus wanneer de leerindex bij wildtype dieren gelijk is aan nul.Kortetermijnassociatief geheugen begint af te nemen één uur na een massatraining die ongeveer twee uur duurt en is in vergelijking hiermee onafhankelijk van de transcriptiefactor Creb. Langetermijnassociatief geheugen begint doorgaans pas significant af te nemen 16 uur na een ruimtetraining die tot 40 uur kan duren en is Creb-afhankelijk. Tijdens het uitvoeren van deze procedure is het belangrijk om te onthouden dat chemotaxis-assays kunnen worden beïnvloed door uithongering of overmatige geuren in de omgeving, en ook dat het geheugen en de wormen kunnen worden verstoord door te veel fysieke agitatie.

c-elegans-positive-butanone-learning-short-term-long-term-associative

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Neurowetenschap

Hier beschrijven we een moleculaire uitlezing van langdurige geur...

Een Moleculaire Uitlezen van lange termijn Olfactorische aanpassing in<em&gt; C. elegans</em

Deze video introduceert een overlevingstest op korte termijn die een behandeling op acute toxiciteit test of een genetische stam test op resistentie tegen een toxische aandoening.  Het voorbeeldprotocol toont een voorbeeld overlevingstest waarbij wormen worden getest op hun vermogen om oxidatieve stress veroorzaakt door paraquat (PQ) te weerstaan.

C. elegans Overlevingstest: een toxiciteitstest op korte termijn

Deze video introduceert de touch habituation assay, een C. elegans gedragsmethode om mechanosensatie te beoordelen en de tijd tot gewent te kwantificeren.

Touch Habituation Assay: een methode om niet-associatief leren te bestuderen bij C. elegans

Werkwijze voor het kwantitatief beoordelen van de chemotactische respons...

C. elegans Chemotaxis Assay

Dit protocol beschrijft een Drosophila- leer- en geheugenassessie, genaamd courtship conditioning. Deze klassieke test is gebaseerd op een vermindering van mannelijk hofgedrag na seksuele afwijzing door een non-receptive premated female. Deze natuurlijke vorm van gedragsplasticiteit kan worden gebruikt om leer, kortlopend geheugen en langdurig geheugen te testen.

Drosophila Courtship Conditioning als een maat van leren en geheugen

We presenteren een gedragsopname-opstelling en protocol waarmee geautomatiseerde analyse van de nematode, Caenorhabditis elegans , de voorkeur geeft aan oplosbare verbindingen in een populatie gebaseerde assay. Dit artikel beschrijft de constructie van een gedragskamer, het gedragsprotocol en het gebruik van videoanalyse software.

Geautomatiseerde Analyse van een Chemische Sensorische Preference Assay van een Nematodebevolking

Het hier gepresenteerde protocol geeft informatie over de gelijktijdige elektro-encefalografie (EEG) en gedragsbeoordeling in realtime. We hebben alle stappen in dit protocol besproken als een aantrekkelijke oplossing voor onderzoekers op vele gebieden van de neurowetenschappen, met name op het gebied van leren en geheugen.

Gelijktijdige monitoring van draadloze elektrofysiologie en geheugengedragstest als een hulpmiddel om hippocampale neurogenese te bestuderen

We hebben eerder protocollen ontwikkeld voor Caenorhabditis elegans om associatieve herinneringen op korte en lange termijn te vormen door respectievelijk massale en gespreide training. Hier worden gedetailleerde protocollen beschreven voor de conditionering van C. elegans door 1-propanol en zoutzuur te koppelen als respectievelijk geconditioneerde en ongeconditioneerde stimuli om een aversief associatief geheugen te vormen.

Aversief associatief leren en geheugenvorming door twee chemicaliën te koppelen bij Caenorhabditis elegans

Hier presenteren we een protocol om associatief leren te testen door klassieke conditionering uit te voeren in het modelorganisme C. elegans. Het paradigma is gebaseerd op het koppelen van de concentratie zout in het milieu aan de aan- of afwezigheid van voedsel, waardoor hun chemotaxis verandert in de richting van of weg van zout.

Meten van associatief leren bij chemotaxis van de nematode Caenorhabditis elegans

In vivo Laser axotomy in C. elegans

Leer hoe je associatief leren en geheugen bij C. elegans evalueert met chemotaxis naar butanon. Deze methode meet kort- en langetermijngeheugen om inzicht te geven in cognitieve veroudering.

C. elegans Positieve Butanon Learning, op korte termijn en lange termijn geheugen Associatieve Assays

Meer video's verkennen