Name: Engineering en Evolutie van synthetische adeno-geassocieerd virus (AAV) gentherapievectoren via DNA Family Shuffling (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2012-04-02T12:00:00.000+00:00
Duration: 21 min 55 s
Description: Leer hoe je synthetische AAV-capsiden ontwikkelt via DNA family shuffling voor gentherapie. Deze methode creëert diverse bibliotheken met miljoenen varianten voor geoptimaliseerde genoverdracht in specifieke celtypen.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

De auteurs zeer erkentelijk voor uitstekende ondersteuning van hun lab, teamleden en werk van de Cluster of Excellence CellNetworks aan de Universiteit van Heidelberg en door de Chica en Heinz Schaller (CHS) stichting. We waarderen het dat de moleculaire AAV evolutie via DNA-familie shuffling is uitgegroeid tot een zeer actieve gebied sinds onze eerste publicatie drie jaar geleden en daarom excuses aan alle auteurs van relevante publicaties van wie het werk kon hier niet geciteerd worden als gevolg van ruimtegebrek.

<ol><li>Grimm, D., Kay, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((From+virus+evolution+to+vector+revolution%3A+use+of+naturally+occurring+serotypes+of+adeno-associated+virus+%28AAV%29+as+novel+vectors+for+human+gene+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Curr.+Gene+Ther%22%5BJournal%5D)">From virus evolution to vector revolution: use of naturally occurring serotypes of adeno-associated virus (AAV) as novel vectors for human gene therapy.</a> Curr. Gene Ther. 3, 281-304 (2003).</li>
<li>Grimm, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Production+methods+for+gene+transfer+vectors+based+on+adeno-associated+virus+serotypes%5BTitle%5D)+AND+%22Methods%22%5BJournal%5D)">Production methods for gene transfer vectors based on adeno-associated virus serotypes.</a> Methods. 28, 146-157 (2002).</li>
<li>Grimm, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vitro+and+in+vivo+gene+therapy+vector+evolution+via+multispecies+interbreeding+and+retargeting+of+adeno-associated+viruses%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Virol%22%5BJournal%5D)">In vitro and in vivo gene therapy vector evolution via multispecies interbreeding and retargeting of adeno-associated viruses.</a> J. Virol. 82, 5887-5911 (2008).</li>
<li>Muller, O. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Random+peptide+libraries+displayed+on+adeno-associated+virus+to+select+for+targeted+gene+therapy+vectors%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Biotechnol%22%5BJournal%5D)">Random peptide libraries displayed on adeno-associated virus to select for targeted gene therapy vectors.</a> Nat. Biotechnol. 21, 1040-1046 (2003).</li>
<li>Perabo, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vitro+selection+of+viral+vectors+with+modified+tropism%3A+the+adeno-associated+virus+display%5BTitle%5D)+AND+%22Mol.+Ther%22%5BJournal%5D)">In vitro selection of viral vectors with modified tropism: the adeno-associated virus display.</a> Mol. Ther. 8, 151-157 (2003).</li>
<li>Zolotukhin, S., Potter, M., Hauswirth, W. W., Guy, J., Muzyczka, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+%22humanized%22+green+fluorescent+protein+cDNA+adapted+for+high-level+expression+in+mammalian+cells%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Virol%22%5BJournal%5D)">A "humanized" green fluorescent protein cDNA adapted for high-level expression in mammalian cells.</a> J. Virol. 70, 4646-4654 (1996).</li>
<li>Wobus, C. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Monoclonal+antibodies+against+the+adeno-associated+virus+type+2+%28AAV-2%29+capsid%3A+epitope+mapping+and+identification+of+capsid+domains+involved+in+AAV-2-cell+interaction+and+neutralization+of+AAV-2+infection%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Virol%22%5BJournal%5D)">Monoclonal antibodies against the adeno-associated virus type 2 (AAV-2) capsid: epitope mapping and identification of capsid domains involved in AAV-2-cell interaction and neutralization of AAV-2 infection.</a> J. Virol. 74, 9281-9293 (2000).</li>
<li>Grimm, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fatality+in+mice+due+to+oversaturation+of+cellular+microRNA%2Fshort+hairpin+RNA+pathways%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Fatality in mice due to oversaturation of cellular microRNA/short hairpin RNA pathways.</a> Nature. 441, 537-541 (2006).</li>
<li>Nakai, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Unrestricted+hepatocyte+transduction+with+adeno-associated+virus+serotype+8+vectors+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Virol%22%5BJournal%5D)">Unrestricted hepatocyte transduction with adeno-associated virus serotype 8 vectors in mice.</a> J. Virol. 79, 214-224 (2005).</li>
<li>Koerber, J. T., Jang, J. H., Schaffer, D. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((DNA+shuffling+of+adeno-associated+virus+yields+functionally+diverse+viral+progeny%5BTitle%5D)+AND+%22Mol.+Ther%22%5BJournal%5D)">DNA shuffling of adeno-associated virus yields functionally diverse viral progeny.</a> Mol. Ther. 16, 1703-1709 (2008).</li>
<li>Li, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Engineering+and+selection+of+shuffled+AAV+genomes%3A+a+new+strategy+for+producing+targeted+biological+nanoparticles%5BTitle%5D)+AND+%22Mol.+Ther%22%5BJournal%5D)">Engineering and selection of shuffled AAV genomes: a new strategy for producing targeted biological nanoparticles.</a> Mol. Ther. 16, 1252-1260 (2008).</li>
<li>Ward, P., Walsh, C. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chimeric+AAV+Cap+sequences+alter+gene+transduction%5BTitle%5D)+AND+%22Virology%22%5BJournal%5D)">Chimeric AAV Cap sequences alter gene transduction.</a> Virology. 386, 237-248 (2009).</li>
<li>Yang, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+myocardium+tropic+adeno-associated+virus+%28AAV%29+evolved+by+DNA+shuffling+and+in+vivo+selection%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+Natl.+Acad.+Sci.+U.S.A%22%5BJournal%5D)">A myocardium tropic adeno-associated virus (AAV) evolved by DNA shuffling and in vivo selection.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 106, 3946-3951 (2009).</li>
<li>Perabo, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Combinatorial+engineering+of+a+gene+therapy+vector%3A+directed+evolution+of+adeno-associated+virus%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Gene.+Med%22%5BJournal%5D)">Combinatorial engineering of a gene therapy vector: directed evolution of adeno-associated virus.</a> J. Gene. Med. 8, 155-162 (2006).</li>
<li>Maheshri, N., Koerber, J. T., Kaspar, B. K., Schaffer, D. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Directed+evolution+of+adeno-associated+virus+yields+enhanced+gene+delivery+vectors%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Biotechnol%22%5BJournal%5D)">Directed evolution of adeno-associated virus yields enhanced gene delivery vectors.</a> Nat. Biotechnol. 24, 198-204 (2006).</li>
<li>Wu, Z., Asokan, A., Samulski, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adeno-associated+virus+serotypes%3A+vector+toolkit+for+human+gene+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Mol.+Ther%22%5BJournal%5D)">Adeno-associated virus serotypes: vector toolkit for human gene therapy.</a> Mol. Ther. 14, 316-327 (2006).</li>
<li>Kwon, I., Schaffer, D. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Designer+gene+delivery+vectors%3A+molecular+engineering+and+evolution+of+adeno-associated+viral+vectors+for+enhanced+gene+transfer%5BTitle%5D)+AND+%22Pharm.+Res%22%5BJournal%5D)">Designer gene delivery vectors: molecular engineering and evolution of adeno-associated viral vectors for enhanced gene transfer.</a> Pharm. Res. 25, 489-499 (2008).</li>
<li>Perabo, L., Huber, A., Marsch, S., Hallek, M., Buning, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Artificial+evolution+with+adeno-associated+viral+libraries%5BTitle%5D)+AND+%22Comb.+Chem.+High.+Throughput.+Screen%22%5BJournal%5D)">Artificial evolution with adeno-associated viral libraries.</a> Comb. Chem. High. Throughput. Screen. 11, 118-126 (2008).</li>
<li>McCarty, D. M., Monahan, P. E., Samulski, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Self-complementary+recombinant+adeno-associated+virus+%28scAAV%29+vectors+promote+efficient+transduction+independently+of+DNA+synthesis%5BTitle%5D)+AND+%22Gene+Ther%22%5BJournal%5D)">Self-complementary recombinant adeno-associated virus (scAAV) vectors promote efficient transduction independently of DNA synthesis.</a> Gene Ther. 8, 1248-1254 (2001).</li>
</ol>

Alle auteurs verklaren dat ze niets bekend te maken te hebben.

Hier hebben we geschetst van essentieel belang experimentele stappen en richtlijnen voor de AAV capside techniek via DNA-shuffelen en familie voor de evolutie in cellen of bij dieren. In essentie zijn deze protocollen zijn gestandaardiseerd versies van de procedures die we voor het eerst binnen de AAV gebied gemeld in 2008 3. Terwijl een vlaag van follow-up studies van anderen hebben gemeld talrijke wijzigingen bv, 10-13, onze huidige versies zijn basisstrategieën opleveren reproduceerbare...

<table border="1"><tbody><tr><td> Naam van het serum </td><td> Vennootschap </td><td> Catalogusnummer </td></tr><tr><td> DNase I </td><td> Invitrogen </td><td> 18068-015 </td></tr><tr><td> Polyethyleenimine (PEI) </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> 408727 </td></tr><tr><td> Restrictie-enzymen </td><td> NEB </td><td> Diverse </td></tr><tr><td> T4 DNA ligase </td><td> NEB </td><td> M0202T </td></tr><tr><td> Gelextractiekit </td><td> Qiagen </td><td> 28704 </td></tr><tr><td> Phusion II polymerase Kit </td><td> Finnzymes (NEB) </td><td> F-540S </td></tr><tr><td> HotStar Hifi polymerase Kit </td><td> Qiagen </td><td> 202602 </td></tr><tr><td> DMSO </td><td> Finnzymes (NEB) </td><td> F-540S (een deel van kit) </td></tr><tr><td> EDTA (25 mM) </td><td> Invitrogen </td><td> 18068-015 (een deel van kit) </td></tr><tr><td> Tris </td><td> Roth </td><td> 4855.2 </td></tr><tr><td> Ampicilin natriumzout </td><td> Roth </td><td> K029.2 </td></tr><tr><td> dNTP (10 mM, 100 ul) </td><td> Invitrogen </td><td> 18427013 </td></tr><tr><td> Iodixanol (OptiPrep) </td><td> Axis-shield </td><td> 1114739 </td></tr><tr><td> PHENOLRED </td><td> Merck </td><td> 107241 </td></tr><tr><td> Plasmide mega prep-kit </td><td> Qiagen </td><td> 12181 </td></tr><tr><td> Ultracentrifuge </td><td> Beckman Coulter- </td><td> Optima L90K </td></tr><tr><td> Quick-Seal centrifugebuizen </td><td> Beckman Coulter- </td><td> 342414 </td></tr><tr><td> Elektroporatie eenheid </td><td> Bio-Rad </td><td> GenePulserXcell </td></tr><tr><td> Thermal cycler </td><td> Eppendorf </td><td> Vapo Protect </td></tr><tr><td> Verwarming blok </td><td> BIOER </td><td> MB-102 </td></tr><tr><td> Fluorescentiemicroscoop </td><td> Olympus </td><td> IX81 </td></tr><tr><td> FACS analyse </td><td> Beckman Coulter- </td><td> Cytomics FC500 MLP </td></tr><tr><td> MEGAX DH10B T1R cellen </td><td> Invitrogen </td><td> C640003 </td></tr><tr><td> Benzonase </td><td> Merck </td><td> 101695 </td></tr><tr><td> Adenovirus-5 </td><td> ATCC </td><td> VR-5 </td></tr><tr><td> pBluescript II KS (+)-plasmide </td><td> Stratagene </td><td> 212207 </td></tr><tr><td> cap5F (Pac Ik site in geel, CAP5-specifieke sequenties in het vet): GACTCTTAATTAACAGGT ATGTCTTTTGTTGATCACCCTCC </td><td> IDTDNA </td><td> Aangepast primer </td></tr><tr><td> cap5R (Ascl site in groen, CAP5-specifieke sequenties in het vet): GTGAGGGCGCGCC TTAAAGGGGTCGGGTAAGGTATC </td><td> IDTDNA </td><td> Aangepast primer </td></tr></tbody></table>

engineering en evolutie van synthetische adeno-geassocieerd virus (aav) gentherapievectoren via dna family shuffling

Engineering and Evolution of Synthetic Adeno-Associated Virus (AAV) Gene Therapy Vectors via DNA Family Shuffling

Adeno-geassocieerde virale (AAV) vectoren zijn enkele van de meest krachtige en veelbelovende voertuigen voor therapeutische menselijke gen-overdracht als gevolg van een unieke combinatie van gunstige eigenschappen: 1. Deze omvatten de apathogenicity van de onderliggende wild-type virussen en de zeer geavanceerde methoden voor de productie van high-titer, hoge zuiverheid en klinisch-grade recombinante vectoren 2. Een ander bijzonder voordeel van de AAV-systeem ten opzichte van andere virussen is de beschikbaarheid van een schat van natuurlijk voorkomende serotypen die verschillen in essentiële eigenschappen nog kunnen allemaal gemakkelijk worden gemanipuleerd als vectoren met behulp van een gemeenschappelijk protocol 1,2. Bovendien hebben een aantal groepen met inbegrip van onze eigen onlangs bedacht strategieën om deze natuurlijke virussen gebruiken als sjablonen voor het maken van synthetische vectoren die ofwel een combinatie van de activa van multiple input serotypen, of die verbetering van de eigenschappen van een enkele isoleren. De respectieve technologieën om deze doelen te bereiken are ofwel DNA-familie schudden 3, dat wil zeggen de versnippering van de verschillende AAV capside genen gevolgd door hun re-assemblage gebaseerd op gedeeltelijke homologieën (meestal&gt; 80% voor de meeste AAV serotypes), of peptide-display 4,5, dat wil zeggen het inbrengen van meestal zeven aminozuren in een blootgestelde lus van het virale capside waarbij het peptide voorkeur medieert opnieuw richten een gewenste celtype. Voor een maximaal resultaat zijn beide methoden toegepast in een hoge-doorvoer wijze waarbij de protocollen opgeschaald bibliotheken van ongeveer een miljoen verschillende capside varianten opleveren. Elke kloon wordt dan uit een unieke combinatie van vele virussen ouderlijke (DNA-shuffelen benadering) of bevat een karakteristieke peptide in dezelfde virale ruggengraat (peptide elkaar benadering). De daaropvolgende laatste stap is iteratief selectie van een dergelijke bibliotheek op doelcellen om te verrijken voor individuele capsiden vervullen van de meeste of idealiter aan alle eisen van het selectieproces. De laatste bij voorkeur kamines overdruk, zoals groei op een bepaald celtype van belang met negatieve selectie bijvoorbeeld verwijdering van alle capsiden reageren met anti-AAV antilichamen. Deze combinatie verhoogt de kans dat de synthetische capsiden het overleven van de selectie van de behoeften van de specifieke toepassing op een manier die waarschijnlijk niet zou zijn in een van nature voorkomende AAV isoleren evenaren. Hier richten we ons op de DNA-familie shuffelwerkwijze als het theoretisch en experimenteel grotere uitdaging van de twee technologieën. We beschrijven en demonstreren van alle essentiële stappen voor het genereren en selectie van geschud AAV bibliotheken (afb. 1), en dan bespreken de valkuilen en kritische aspecten van de protocollen die men moet zich bewust zijn van om te slagen met moleculaire AAV evolutie.

We tonen de basistechniek om moleculair ingenieur en synthetische adeno-geassocieerde virale (AAV) gentherapievectoren evolueren via DNA-familie shuffelen. Bovendien geven we algemene richtlijnen en representatieve voorbeelden voor de selectie en analyse van individuele chimere capsiden met verbeterde eigenschappen op doel cellen in cultuur of in muizen.

Engineering en Evolutie van synthetische adeno-geassocieerd virus (AAV) gentherapievectoren via DNA Family Shuffling

Adeno-geassocieerde virale (AAV) vectoren vormen enkele van de meest potente en veelbelovende dragers voor therapeutische gentransfer bij mensen vanwege een unieke ...

Het algemene doel van het volgende experiment is het creëren van een zeer diverse bibliotheek van synthetische adeno-geassocieerde virale capsiden, waaruit partikels met een gewenste eigenschap kunnen worden geselecteerd. Dit wordt bereikt door eerst de capsidogenen van aav te fragmenteren, te kloneren en te selecteren via een gecontroleerde DNAse I-digestie, om hun daaropvolgende reassemblage in chimere sequenties via twee PCR-reacties mogelijk te maken. Als tweede stap wordt het resulterende PCR-product teruggekloneerd in een replicatie-competent aav-construct om een plasmidenbibliotheek te verkrijgen die ten minste 1 miljoen verschillende aav-capsidogenen bevat.Vervolgens wordt deze plasmidenbibliotheek getransfecteerd in 2 9 3 T-cellen, samen met een adenoviraal helperplasmide, om een chimere virusbibliotheek te produceren die vervolgens kan worden geselecteerd op doelcellen of in dieren. De resultaten tonen de succesvolle moleculaire manipulatie en evolutie van nieuwe synthetische A A V-vectoren aan, gebaseerd op verbeterde of specifiekere expressie van het reportergen in gecultiveerde cellen of in volwassen muizen. Het belangrijkste voordeel van deze techniek ten opzichte van

engineering-evolution-synthetic-adeno-associated-virus-aav-gene

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Immunologie en Infectie

Hier beschrijven we een efficiënte en reproduceerbare strategie om te produceren, titer en kwaliteitscontrole batches van adeno-associated virus vectoren. Het stelt de gebruiker om de voorbereiding van een vector met hoge-titer (≥1 x 1013 vector genomen/mL) en een hoge zuiverheid, in vitro of in vivo gebruiksklaar.

Productie, zuivering en kwaliteitscontrole voor Adeno-associated Virus gebaseerde vectoren

Hier bieden we een gedetailleerde procedure voor grootschalige productie van onderzoekskwaliteit AAV-vectoren met behulp van adherente HEK 293-cellen gekweekt in celstapels en affiniteitschromatografiezuivering. Dit protocol levert consequent &gt;1 x 1013 vectorgenomen /ml op, wat vectorhoeveelheden oplevert die geschikt zijn voor grote dierstudies.

Productie van Adeno-geassocieerde virusvectoren in celstapels voor preklinische studies in grote diermodellen

AAV-peptideweergavebibliotheek generatie en daaropvolgende validatie door de barcodering van kandidaten met nieuwe eigenschappen voor het maken van AAV's van de volgende generatie.

Isolatie van gentherapievectoren van de volgende generatie door middel van engineering, barcoding en screening van adeno-geassocieerde virus (AAV) capsid-varianten

Hier presenteren we een protocol voor de ontwikkeling en validatie van goede laboratoriumpraktijken in de conforme detectie van adeno-geassocieerde virale vectoren in menselijke tranen door druppel digitale polymerasekettingreactie ter ondersteuning van de klinische ontwikkeling van gentherapievectoren.

Een valideerbare druppel digitale polymerasekettingreactietest voor de detectie van adeno-geassocieerde virale vectoren in biosheddingstudies van tranen

Recombinant adeno-geassocieerd virus (rAAV) wordt veel gebruikt voor klinische en preklinische genafgifte. Een ondergewaardeerd gebruik van rAAV's is de robuuste transductie van gekweekte cellen zonder dat zuivering nodig is. Voor onderzoekers die nieuw zijn op het gebied van rAAV, bieden we een protocol voor het klonen van transgencassettes, de productie van ruwe vectoren en de transductie van celculturen.

Transgenexpressie in gekweekte cellen met behulp van ongezuiverde recombinante adeno-geassocieerde virale vectoren

Adeno-geassocieerd virus wordt geproduceerd in suspensiecelkweek en gezuiverd door centrifugatie met dubbele jodixanoldichtheidsgradiënt. Er zijn stappen opgenomen om de totale virusopbrengst te verhogen, het risico op virusneerslag te verminderen en het uiteindelijke virusproduct verder te concentreren. De verwachte uiteindelijke titers bereiken 10tot 12 virale deeltjes/ml en zijn geschikt voor preklinisch in vivo gebruik.

Productie en zuivering van adeno-geassocieerd virus door centrifugatie met diodixanoldichtheidsgradiënt voor in-vivotoepassingen

Dit manuscript beschrijft een gedetailleerd protocol voor het genereren en zuiveren van adeno-geassocieerde virale vectoren met behulp van een geoptimaliseerde op heparine gebaseerde affiniteitschromatografiemethode. Het biedt een eenvoudige, schaalbare en kosteneffectieve aanpak, waardoor ultracentrifugatie niet nodig is. De resulterende vectoren vertonen een hoge zuiverheid en biologische activiteit, wat hun waarde bewijst in preklinische studies.

Isolatie van adeno-geassocieerde virale vectoren door middel van een eenstaps en semi-geautomatiseerd heparine-affiniteitschromatografieprotocol

Nauwkeurige kwantificering van kopieën van het vectorgenoom van adeno-geassocieerd virus (AAV) is van cruciaal belang, maar er moet nog een gestandaardiseerd protocol worden opgesteld. Dit protocol beschrijft een gevalideerde methode voor het bereiden van gezuiverde AAV-monsters en het uitvoeren van een digitale druppelpolymerasekettingreactie (dd_PCR) om de virale genoomtiter betrouwbaar te kwantificeren.

Kwantificering van adeno-geassocieerde virale genomen in gezuiverde vectormonsters door digitale druppelpolymerasekettingreactie

Dit protocol heeft als doel een methode te introduceren om mesenchymale stamcel (MSC)-afgeleide extracellulaire vesikelbiomimetica te produceren en te zuiveren voor gentherapie. De nanovesikel is ingesloten met MSC-afgeleide lipide-dubbellagen en kapselt recombinante AAV's die het gen van belang dragen in het lumen. Deze nanovesikel biedt een verbeterde vector voor in vivo genlevering.

Ontwikkeling van mesenchymale stamcelmembraan-omhulde nanovesikels voor verbeterde genlevering

Redding van influenza A-virussen uit het plasmide DNA is een fundamentele en essentiële experimentele techniek die het mogelijk maakt influenza onderzoekers recombinante virussen te genereren om meerdere aspecten in de biologie van influenza virus te bestuderen en om te worden gebruikt als potentiële vectoren of vaccins.

Generatie van recombinant griepvirus uit plasmide-DNA

Leer hoe je synthetische AAV-capsiden ontwikkelt via DNA family shuffling voor gentherapie. Deze methode creëert diverse bibliotheken met miljoenen varianten voor geoptimaliseerde genoverdracht in specifieke celtypen.

Engineering en Evolutie van synthetische adeno-geassocieerd virus (AAV) gentherapievectoren via DNA Family Shuffling

Meer video's verkennen