Name: Een eenvoudige methode van de Muis van Lung intubatie (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2013-03-21T13:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 6 s
Description: Leer een eenvoudige methode voor longintubatie bij muizen met een fiberoptische lichtbron. Deze techniek maakt mechanische ventilatie en vloeistofinstillatie mogelijk voor longonderzoek.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Ondersteund door NIH HL-10342.

1. Voorbereiding van de procedure Men moet eerst het verkrijgen van en de voorbereiding van de volgende items: <ol><li> De canule. Voor intubatie van 20-35 g muizen, gebruiken we een 1 of 1,5 cm lang, 20 gauge IV katheter (BD Insylte, Sparks, MD of Jelco Optiva, Carlsbad, CA). Een nieuwe steriele katheter kan worden gebruikt voor elke muis, maar catheters kan ook worden hergebruikt na sterilisatie door onderdompeling in 70% ethanol nacht. Hoewel noch de keelholte of de luchtpijp van de muis steriel goede hygiëne, inclusief het gebruik van steriele handschoenen en instrumenten worden gevolgd. </li><li> De glasvezelkabel. We gebruiken ≈ 70 cm van 0,5 mm optische kabel Edmund Optics, maar de lengte is niet kritisch. Het is belangrijk om ervoor te zorgen dat de vezel heeft de rand afgevlakte, want na het snijden van de kabel op lengte met een scheermes, de rand blijft relatief scherpe, en het doet veel moeite niet te doorboren de tracheale wand. Echter iis heel gemakkelijk om dit rand glad door de aan vezels ongeveer 2 cm van het einde en dan het maken van kleine cirkels voor een paar seconden met de randen van de punt aanraken van een stuk van 1.000 korrel schuurpapier (zie demonstratie in de video en figuur 1 van Macdonald, et al.. 10). Het andere uiteinde wordt via een rubber stop. Dit wordt het gemakkelijkst bereikt door eerst een 18-gauge naald door de stop, het plaatsen van de optische vezel door de naald boring vervolgens de naald. De rubberen stop is verbonden met een 150 watt halogeen lichtbron (bijvoorbeeld NCL-150, USA Volpi of andere lichtbron of zelfs minder dan 150 watt). Het is belangrijk om ervoor te zorgen om een ​​afdichting van silicone rubber (of ander hittebestendig materiaal) te gebruiken, omdat de gewone rubber of kurk kan branden wanneer zich zo dicht bij de hete lichtbron. </li></ol> 2. Het uitvoeren van de intubatie <ol><li> Zie figuren 1 en 2. Steek glasvezelkabel through een kort stuk van siliconen rubber slangen (≈ 0,8 mm ID x 4 mm OD, Cole-Palmer, EW-96410-13). Bind deze rubberen buis vrij strakke, terwijl u toch de glasvezelkabel aan te passen. Het plaatsen van de siliconenslang stevig in de Luer einde van de canule stelt de glasvezelkabel de positie in de canule. De positie van de glasvezelkabel zodat deze zich door de canule ≈ 4 mm voor de canule tip. </li><li> Plaats de verdoofde muis op een verticale steun, opgehangen aan de bovenste snijtanden (figuur 3). De meeste onderzoekers vinden van de beste visualisatie met de ventrale zijde van de muis naar zichzelf. Heel voorzichtig trek de tong en houd met duim en wijsvinger. De middelvinger wordt tussen de hals en plastic steun. Tractie op de tong met de wijsvinger en duim wordt gebruikt om de mond open te doen, en om de intubatie pad recht te maken, wordt de hoek van de kop aangepast met de middelvinger achter de nekfiguur 3. </li><li> Met de glasvezelkabel als lichtbron en introducer, schuiven door de gevisualiseerde stembanden. Indien de draden niet zichtbaar zijn, zachtjes harder te trekken op de tong met behulp van de middelvinger als ondersteuning. Wanneer geplaatst, verder te gaan de canule ≈ 5 mm. Dan, die zeer voorzichtig dat u de canule verplaatsen, trekt de glasvezelkabel. Liggen de muis en beveiligen de canule met een stuk tape en ondersteunen de canule hub op een stuk plasticine (klei), zoals weergegeven in figuur 4. </li><li> De procedure in stap 3 niet gemakkelijk geleerd of zelfs worden aangetoond, aangezien het een solo operatie. Echter, door subtiele aanpassingen van de tractie op de tong en de steun achter het hoofd bijna alle die proberen dit snel vinden van de juiste manier om de muis te positioneren om de stembanden te visualiseren. </li></ol>

<ol><li>Brown, R. H., Walters, D. M., Greenberg, R. S., Mitzner, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+method+of+endotracheal+intubation+and+pulmonary+functional+assessment+for+repeated+studies+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Appl.+Physiol%22%5BJournal%5D)">A method of endotracheal intubation and pulmonary functional assessment for repeated studies in mice.</a> J. Appl. Physiol. 87, 2362-2365 (1999).</li>
<li>Walters, D. M., Wills-Karp, M., Mitzner, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessment+of+cellular+profile+and+lung+function+with+repeated+bronchoalveolar+lavage+in+individual+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol.+Genomics%22%5BJournal%5D)">Assessment of cellular profile and lung function with repeated bronchoalveolar lavage in individual mice.</a> Physiol. Genomics. 2, 29-36 (2000).</li>
<li>Rivera, B., Miller, S., Brown, E., Price, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+method+for+endotracheal+intubation+of+mice+and+rats+used+in+imaging+studies%5BTitle%5D)+AND+%22Contemporary+Topics+in+Laboratory+Animal+Science+%2F+American+Association+for+Laboratory+Animal+Science%22%5BJournal%5D)">A novel method for endotracheal intubation of mice and rats used in imaging studies.</a> Contemporary Topics in Laboratory Animal Science / American Association for Laboratory Animal Science. 44, 52-55 (2005).</li>
<li>Hamacher, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microscopic+wire+guide-based+orotracheal+mouse+intubation%3A+description%2C+evaluation+and+comparison+with+transillumination%5BTitle%5D)+AND+%22Laboratory+Animals%22%5BJournal%5D)">Microscopic wire guide-based orotracheal mouse intubation: description, evaluation and comparison with transillumination.</a> Laboratory Animals. 42, 222-230 (2008).</li>
<li>Spoelstra, E. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+and+simple+method+for+endotracheal+intubation+of+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Laboratory+Animals%22%5BJournal%5D)">A novel and simple method for endotracheal intubation of mice.</a> Laboratory Animals. 41, 128-135 (2007).</li>
<li>Zhao, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+technique+for+retrograde+intubation+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Animal%22%5BJournal%5D)">A technique for retrograde intubation in mice.</a> Lab Animal. 35, 39-42 (2006).</li>
<li>Vergari, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+new+method+of+orotracheal+intubation+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22European+Review+for+Medical+and+Pharmacological+Sciences%22%5BJournal%5D)">A new method of orotracheal intubation in mice.</a> European Review for Medical and Pharmacological Sciences. 8, 103-106 (2004).</li>
<li>Vergari, A., Polito, A., Musumeci, M., Palazzesi, S., Marano, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Video-assisted+orotracheal+intubation+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Laboratory+Animals%22%5BJournal%5D)">Video-assisted orotracheal intubation in mice.</a> Laboratory Animals. 37, 204-206 (2003).</li>
<li>Hastings, R. H., Summers-Torres, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Direct+Laryngoscopy+in+Mice%5BTitle%5D)+AND+%22Contemporary+Topics+in+Laboratory+Animal+Science+%2F+American+Association+for+Laboratory+Animal+Science%22%5BJournal%5D)">Direct Laryngoscopy in Mice.</a> Contemporary Topics in Laboratory Animal Science / American Association for Laboratory Animal Science. 38, 33-35 (1999).</li>
<li>MacDonald, K. D., Chang, H. Y., Mitzner, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+improved+simple+method+of+mouse+lung+intubation%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Appl.+Physiol%22%5BJournal%5D)">An improved simple method of mouse lung intubation.</a> J. Appl. Physiol. 106, 984-987 (2009).</li>
<li>Ewart, S. L., Levitt, R. C., Mitzner, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Respiratory+system+mechanics+in+mice+measured+by+end-inflation+occlusion%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Applied+Physiology%22%5BJournal%5D)">Respiratory system mechanics in mice measured by end-inflation occlusion.</a> Journal of Applied Physiology. 79, 560-566 (1995).</li>
<li>MacDonald, K. D., McKenzie, K. R., Mitzner, W., Zeitlin, P. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lung+Mechanics+in+Heterozygous+CF+Mice+after+Repeated+LPS+Dosing%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Respir.+Crit.+Care+Med%22%5BJournal%5D)">Lung Mechanics in Heterozygous CF Mice after Repeated LPS Dosing.</a> Am. J. Respir. Crit. Care Med. 175 (4), A930(2007).</li>
</ol>

Geen van de auteurs om het even welke belangenconflicten bekend te maken.

De hier beschreven procedure heeft verschillende voordelen. Eerst de inrichting is eenvoudig en relatief goedkoop .. De fabricage van de inrichting vereist geen speciaal gereedschap of dure apparatuur. Het gebruik van een katheter introduceert die ook de lichtbron betekent dat men nooit uit het oog van de tracheale opening als de inbrenger de tracheale opening nadert verliest. Het gebruik van een 0,5 mm introducer dient ook te minimaliseren trauma die zich kunnen voordoen met een initiële insertie van een grotere canule...

In 1999, Brown et al.. Artikel gepubliceerd beschrijft een werkwijze voor intubatie van de muizenlong 1. Een dergelijke techniek heeft veel nut in het doen van herhaalde longfunctie of broncho-alveolaire lavage in individuele muizen in longitudinale studies 2. Sinds die originele papieren, zijn er verschillende andere papieren die verschillende benaderingen beschreven om de muis intubatie 3-9. Terwijl al deze methoden kunnen met succes worden gebruikt, ze vereisen doorgaans aanzienlijke training of kosten. Een van de belangrijkste problemen met dergelijke intubatie is dat als de intubatiecanule benaderingen van de luchtpijp in afwachting inbrengen nadert, de canule zelf blokkeert het licht en daarmee de visualisatie van waar het moet gaan. Zo is de invoeging wordt blind op de meest kritieke tijd. In dit artikel laten we zien hoe eenvoudig en goedkoop deze visualisatie probleem te elimineren, waardoor wordt gewaarborgd succesvolle intubatie met relatief weinig training ofbieden.

<table border="1"><tbody><tr><td> Materiaal </td><td> Vennootschap </td><td> Catalogus # </td><td> Commentaar </td></tr><tr><td> Intubatiecanule </td><td> BD Insylte, Sparks, MD of Jelco Optiva, Carlsbad, CA </td><td></td><td> 1-inch-lange, 20-gauge intraveneuze (IV) katheter </td></tr><tr><td> Glasvezelkabel </td><td> Edmund Optics, Barrington, NJ </td><td> # NT02-542 </td><td> Ongeveer 2-ft lengte van 0,5-mm optische vezel (Communicatie grade plastic vezel). De rand van het vezeluiteinde die wordt ingebracht in de luchtpijp moet voorzichtig worden afgerond door de aan vezels ≈ 2 cm van het einde en vervolgens het maken van kleine cirkels tijdens het slepen van de tip voor een paar seconden op 1000-korrel Emory papier. </td></tr><tr><td> Lichtbron </td><td> Volpi </td><td> NCL-150 </td><td> Hoewel we gebruik maken van een 150-W halogeen lichtbron, een gelijkwaardige lichtbron, zelfs met een veel lager wattageworden gebruikt. </td></tr><tr><td> Silicone rubber stop </td><td></td><td></td><td> A # 1 siliconen rubberen stop past bij de lichtbron die in deze demonstratie. Verschillende lichtbronnen kan een ander formaat. </td></tr><tr><td> Kleine siliconen rubber slang </td><td> Cole-Palmer </td><td> EW-96410-13 </td><td> Een ≈ 1,5 cm stuk siliconenrubber buis (0,8 binnendiameter, 4 mm buitendiameter) </td></tr><tr><td> Angled statief </td><td></td><td></td><td> Ours is constucted van plexiglas, maar elk materiaal waarvan een draad of kabel kan worden aangebracht op de muis houden in een bijna verticale hoek kan worden gebruikt. </td></tr></tbody></table>

een eenvoudige methode van de muis van lung intubatie

A Simple Method of Mouse Lung Intubation

Een eenvoudige procedure aan muizen gedurende longfunctie metingen intuberen zouden verscheidene voordelen in longitudinale studies waar weinig of dure dier. Een van de redenen dat dit niet meer routinematig gedaan is dat het relatief moeilijk, hoewel er een aantal gepubliceerde onderzoeken die manieren om dit te bereiken beschrijven. In dit artikel tonen een procedure die een van de belangrijkste hindernissen bij dit intubatie dat het visualiseren van de trachea gedurende de gehele tijd van intubatie elimineert. De methode gebruikt een 0,5 mm vezeloptische lichtbron die dient als een introducer de intubatiecanule direct in de muis trachea. We tonen aan dat het mogelijk is met deze procedure long mechanica in individuele muizen meten over een tijdsverloop van ten minste verscheidene weken. De techniek kan worden ingesteld met relatief weinig kosten en expertise, en het kan routinematig worden bereikt met relatief weinig training. Dit moet MAKE het mogelijk voor elk laboratorium om routinematig uitvoeren van deze intubatie, waardoor longitudinale studies in individuele muizen, om zo het aantal benodigde muizen en het verhogen van de statistische power met behulp van elke muis als zijn eigen controle.

Een evaluatie van de werkwijze, we vier 20 weken oude mannelijke BALB / c muizen gebruikt met een gemiddeld gewicht (± SEM) van 27,7 ± 0,40 g. Ze werden onderzocht op vijf opeenvolgende weken, waarbij de long werd gemeten met behulp van een systeem zoals eerder beschreven 11. Elke muis werd verdoofd met ketamine (100 ug / g BW) en xylazine (15 ug / g BW) in saline via IP injectie. Ze werden daarna geïntubeerd zoals hierboven beschreven. Als er enige twijfel of de canule in de luchtpijp en de slokdarm niet kan...

Dit artikel beschrijft een striaghforward en efficiënte methode van intubatie muizen voor longfunctie metingen of pulmonale instillatie, die het mogelijk maakt de muizen om te herstellen en studeerde worden op latere tijdstippen. Deze procedure houdt een goedkope optische vezel lichtbron die direct verlicht de luchtpijp.

Een eenvoudige methode van de Muis van Lung intubatie

A  simple procedure to intubate mice for pulmonary function measurements would  have several advantages in longitudinal studies with limited numbers or  ...

Het algemene doel van deze procedure is om een muis te intuberen om mechanische ventilatie of het toedienen van vloeistoffen mogelijk te maken. Dit wordt bereikt door eerst de canule en de lichtbron te assembleren. De tweede stap is om de muis verticaal op te hangen aan de bovenste snijtanden.Nadat het hoofd en het lichaam zijn gemanipuleerd om een recht pad voor intubatie mogelijk te maken, worden de glasvezelintroducer en de canule door de stembanden ingebracht. Uiteindelijk wordt de optische vezel verwijderd en wordt de muis met de canule op zijn plaats in rugligging geplaatst voor ventilatie of installatie. Oké, vandaag gaan we een eenvoudige procedure demonstreren om een muizenlong te intuberen.Visualisatie is belangrijk omdat de positionering van de muis vaak een kritieke stap is bij het inbrengen van de canule, en daarom is er wat oefening voor nodig. Het zou voor iedereen mogelijk moeten zijn om dit herhaaldelijk in relatief korte tijd te doen. De procedure wordt vandaag gedemonstreerd door Dr. Sandy Doss, een junior faculteitslid van de afdeling Longgeneeskunde en de medische faculteit. De eerste stap is de voorbereiding.Bereid de canule voor voor volwassen muizen; hiervoo

Research

JoVE Journal

Medicine

Geneeskunde

Herhaalde metingen van knaagdieren respiratoire fysiologie en bemonstering van de luchtwegen ontstekingscellen wenselijk zijn, maar over het algemeen niet haalbaar. Hier beschrijven we een herhaalbare methode voor het mondeling intuberen muizen dat herhaalde metingen van de luchtwegen hyperreactiviteit en de bemonstering van de luchtwegen ontstekingscellen vergunningen.

Een reversibele, niet-invasieve methode voor Airway Resistance Metingen en bronchoalveolaire lavage Fluid Sampling in Muizen

This video describes a simple and reliable method of introducing liquid into the trachea for lung instillation, fixation, and lung volume measurement.

Lung Instillation and Fixation: Introducing Liquid into the Trachea and Fixing Lungs to Measure the Fixed Lung Volume

We hebben een eenvoudige, betrouwbare en relatief goedkope methode voor endotracheale intubatie bij muizen via directe laryngoscopie behulp van een otoscoop met een 2,0 mm speculum ontwikkeld. Deze techniek is atraumatische en kan worden gebruikt voor herhaalde metingen in chronische experimenten. We vinden het superieur aan tracheostomie of eerder gerapporteerde niet-chirurgische technieken.

Luchtpijpintubatie in Muizen<em&gt; Via</em&gt; Directe laryngoscopie behulp van een otoscoop

Het gebruik van een model dat de toestand van longziekten bij mensen nabootst is kritiek voor het bestuderen van de pathofysiologie en / of etiologie van een bepaalde ziekte en ontwikkelen van therapeutische interventie. Hier een niet-invasieve intratracheaal intubatie methode die direct exogene materialen kunnen leveren aan muizenlongen wordt gepresenteerd.

Niet-invasieve Intratracheaal intubatie om te studeren de Pathologie en Fysiologie van Mouse Lung

Intratracheale intubatie-gemedieerde (IMIT) instillatie van reagentia is een uitstekend invasieve methode voor het bestuderen ademhalingsziekte, alsmede een werkwijze voor het indruppelen therapeutische reagentia direct in de longen. Het is een snelle en zeer reproduceerbare werkwijze die geschikt is voor preklinische proeven.

Intubatie-gemedieerde Intratracheaal (IMIT) Blaasinstillatie: een niet-invasieve, Lung-specifieke Delivery System

Het doel van dit artikel is om eenvoudige methoden die sterk zal helpen bij de opzet en analyse van de muis longen met longkanker of andere aandoeningen te beschrijven. We presenteren 3 protocollen eenvoudig en betrouwbaar uit te voeren long instillaties, fixatie, en longvolume metingen.

Instillatie en Fixatie Methoden Nuttig in Mouse Lung Cancer Research

Dit artikel presenteert een snelle en eenvoudige methode voor het toedienen van bleomycine rechtstreeks in de muis luchtpijp via intubatie. Belangrijkste voordelen van deze werkwijze zijn dat het zeer reproduceerbaar, gemakkelijk onder de knie, en vereist geen gespecialiseerde apparatuur of lange hersteltijden.

Een verbeterde werkwijze voor snelle intubatie van de trachea in muizen

Intratracheal (IT) toediening van experimentele agentia bij muizen resulteert vaak in asymmetrische afgifte aan de distale longen.  In dit rapport beschrijven we een directe intrabronchiale (IB) benadering om elke Long in levende muizen niet-operatief te cannuleren.  Deze aanpak kan worden gebruikt om agenten selectief te beheren tot één Long of kan worden aangepast om de symmetrische agent levering aan beide longen te verbeteren.

Directe Intrabronchiale toediening om de selectieve depositie van de agent binnen de muis Long te verbeteren

Het doel van dit artikel is het beschrijven van een verfijnde methode van intubatie van de laboratoriummuis. De methode is niet-invasief en daarom ideaal voor studies die seriële controle van de ademhalingsfunctie en/of instillatie van behandelingen in de long vereisen.

Herhaalde Orotracheale intubatie bij muizen

Een muischirurgisch model om reperfusie (IR) -letsel in de linkerlong te creëren met behoud van ventilatie en het vermijden van hypoxie.

Een muismodel van orotracheale intubatie en beademde longischemie reperfusiechirurgie

Dit protocol laat zien hoe het optimaal positioneren van een muis en het transoraal inbrengen van een op camera's gebaseerde otoscoop visualisatie van de glottis, snelle intubatie met minimaal weefseltrauma en consistente vloeistofafgifte aan de longen mogelijk maakt.

Verbeterde methodologie voor vloeistofafgifte aan de muizenlong: intubatie met behulp van een consumentenotoscoop

Leer een eenvoudige methode voor longintubatie bij muizen met een fiberoptische lichtbron. Deze techniek maakt mechanische ventilatie en vloeistofinstillatie mogelijk voor longonderzoek.

Een eenvoudige methode van de Muis van Lung intubatie

Meer video's verkennen