Name: Vasculaire Gene Transfer van Metallic stentoppervlakken met adenovirale vectoren Tethered via Hydrolyseerbare Cross-linkers (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-08-12T13:00:00.000+00:00
Duration: 12 min 30 s
Description: Leer de implantatie van een gen-eluerende stent in de arteria carotis communis van ratten om transgeenexpressie te evalueren. Deze methode maakt bioluminescentiebeeldvorming mogelijk voor vasculaire gentherapie-onderzoek.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

De auteurs hebben geen concurrerende financiële belangen te onthullen.

<ol><li>Boeckle, S., Wagner, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optimizing+targeted+gene+delivery%3A+chemical+modification+of+viral+vectors+and+synthesis+of+artificial+virus+vector+systems%5BTitle%5D)+AND+%22AAPS+J%22%5BJournal%5D)">Optimizing targeted gene delivery: chemical modification of viral vectors and synthesis of artificial virus vector systems.</a> AAPS J. 8, E731-E742 (2006).</li>
<li>Waehler, R., Russell, S. J., Curiel, D. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Engineering+targeted+viral+vectors+for+gene+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Genet%22%5BJournal%5D)">Engineering targeted viral vectors for gene therapy.</a> Nat Rev Genet. 8, 573-587 (2007).</li>
<li>Campos, S. K., Barry, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Current+advances+and+future+challenges+in+Adenoviral+vector+biology+and+targeting%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Gene+Ther%22%5BJournal%5D)">Current advances and future challenges in Adenoviral vector biology and targeting.</a> Curr Gene Ther. 7, 189-204 (2007).</li>
<li>Bangari, D. S., Mittal, S. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Current+strategies+and+future+directions+for+eluding+adenoviral+vector+immunity%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Gene+Ther%22%5BJournal%5D)">Current strategies and future directions for eluding adenoviral vector immunity.</a> Curr Gene Ther. 6, 215-226 (2006).</li>
<li>Barry, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Systemic+delivery+of+therapeutic+viruses%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Opin+Mol+Ther%22%5BJournal%5D)">Systemic delivery of therapeutic viruses.</a> Curr Opin Mol Ther. 11, 411-420 (2009).</li>
<li>De Laporte, L., Shea, L. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Matrices+and+scaffolds+for+DNA+delivery+in+tissue+engineering%5BTitle%5D)+AND+%22Adv+Drug+Deliv+Rev%22%5BJournal%5D)">Matrices and scaffolds for DNA delivery in tissue engineering.</a> Adv Drug Deliv Rev. 59, 292-307 (2007).</li>
<li>Gustafson, J. A., Price, R. A., Greish, K., Cappello, J., Ghandehari, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Silk-elastin-like+hydrogel+improves+the+safety+of+adenovirus-mediated+gene-directed+enzyme-prodrug+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Pharm%22%5BJournal%5D)">Silk-elastin-like hydrogel improves the safety of adenovirus-mediated gene-directed enzyme-prodrug therapy.</a> Mol Pharm. 7, 1050-1056 (2010).</li>
<li>Kidd, M. E., Shin, S., Shea, L. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fibrin+hydrogels+for+lentiviral+gene+delivery+in+vitro+and+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22J+Control+Release%22%5BJournal%5D)">Fibrin hydrogels for lentiviral gene delivery in vitro and in vivo.</a> J Control Release. 157, 80-85 (2012).</li>
<li>Lei, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Incorporation+of+active+DNA%2Fcationic+polymer+polyplexes+into+hydrogel+scaffolds%5BTitle%5D)+AND+%22Biomaterials%22%5BJournal%5D)">Incorporation of active DNA/cationic polymer polyplexes into hydrogel scaffolds.</a> Biomaterials. 31, 9106-9116 (2010).</li>
<li>Lei, Y., Rahim, M., Ng, Q., Segura, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hyaluronic+acid+and+fibrin+hydrogels+with+concentrated+DNA%2FPEI+polyplexes+for+local+gene+delivery%5BTitle%5D)+AND+%22J+Control+Release%22%5BJournal%5D)">Hyaluronic acid and fibrin hydrogels with concentrated DNA/PEI polyplexes for local gene delivery.</a> J Control Release. 153, 255-261 (2011).</li>
<li>Jang, J. H., Schaffer, D. V., Shea, L. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Engineering+biomaterial+systems+to+enhance+viral+vector+gene+delivery%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Ther%22%5BJournal%5D)">Engineering biomaterial systems to enhance viral vector gene delivery.</a> Mol Ther. 19, 1407-1415 (2011).</li>
<li>Salvay, D. M., Zelivyanskaya, M., Shea, L. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gene+delivery+by+surface+immobilization+of+plasmid+to+tissue-engineering+scaffolds%5BTitle%5D)+AND+%22Gene+Ther%22%5BJournal%5D)">Gene delivery by surface immobilization of plasmid to tissue-engineering scaffolds.</a> Gene Ther. 17, 1134-1141 (2010).</li>
<li>Moss, A. J., Hamburger, S., Moore, R. M., Jeng, L. L., Vol Howie, L. J. Advance Data. 191, National Center for Health Statistics Vital and Health Statistics. (1991).</li>
<li>Gristina, A. G., Naylor, P., Myrvik, Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Infections+from+biomaterials+and+implants%3A+a+race+for+the+surface%29%5BTitle%5D)+AND+%22Med+Prog+Technol%22%5BJournal%5D)">Infections from biomaterials and implants: a race for the surface).</a> Med Prog Technol. 14, 205-224 (1988).</li>
<li>Santerre, J. P., Woodhouse, K., Laroche, G., Labow, R. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Understanding+the+biodegradation+of+polyurethanes%3A+from+classical+implants+to+tissue+engineering+materials%5BTitle%5D)+AND+%22Biomaterials%22%5BJournal%5D)">Understanding the biodegradation of polyurethanes: from classical implants to tissue engineering materials.</a> Biomaterials. 26, 7457-7470 (2005).</li>
<li>Tang, L., Eaton, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inflammatory+responses+to+biomaterials%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Clin+Pathol%22%5BJournal%5D)">Inflammatory responses to biomaterials.</a> Am J Clin Pathol. 103, 466-471 (1995).</li>
<li>Zimmerli, W., Sendi, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pathogenesis+of+implant-associated+infection%3A+the+role+of+the+host%5BTitle%5D)+AND+%22Semin+Immunopathol%22%5BJournal%5D)">Pathogenesis of implant-associated infection: the role of the host.</a> Semin Immunopathol. 33, 295-306 (2011).</li>
<li>Fishbein, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bisphosphonate-mediated+gene+vector+delivery+from+the+metal+surfaces+of+stents%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Bisphosphonate-mediated gene vector delivery from the metal surfaces of stents.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 103, 159-164 (2006).</li>
<li>Levy, R. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Localized+adenovirus+gene+delivery+using+antiviral+IgG+complexation%5BTitle%5D)+AND+%22Gene+Ther%22%5BJournal%5D)">Localized adenovirus gene delivery using antiviral IgG complexation.</a> Gene Ther. 8, 659-667 (2001).</li>
<li>Ma, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Anchoring+of+self-assembled+plasmid+DNA%2Fanti-DNA+antibody%2Fcationic+lipid+micelles+on+bisphosphonate-modified+stent+for+cardiovascular+gene+delivery%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Nanomedicine%22%5BJournal%5D)">Anchoring of self-assembled plasmid DNA/anti-DNA antibody/cationic lipid micelles on bisphosphonate-modified stent for cardiovascular gene delivery.</a> Int J Nanomedicine. 8, 1029-1035 (2013).</li>
<li>Hu, W. W., Lang, M. W., Krebsbach, P. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+adenovirus+immobilization+strategies+for+in+situ+gene+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22J+Gene+Med%22%5BJournal%5D)">Development of adenovirus immobilization strategies for in situ gene therapy.</a> J Gene Med. 10, 1102-1112 (2008).</li>
<li>Jang, J. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Surface+immobilization+of+hexa-histidine-tagged+adeno-associated+viral+vectors+for+localized+gene+delivery%5BTitle%5D)+AND+%22Gene+Ther%22%5BJournal%5D)">Surface immobilization of hexa-histidine-tagged adeno-associated viral vectors for localized gene delivery.</a> Gene Ther. 17, 1384-1389 (2010).</li>
<li>Bengali, Z., Shea, L. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gene+Delivery+by+Immobilization+to+Cell-Adhesive+Substrates%5BTitle%5D)+AND+%22MRS+Bull%22%5BJournal%5D)">Gene Delivery by Immobilization to Cell-Adhesive Substrates.</a> MRS Bull. 30, 659-662 (2005).</li>
<li>Holmes, C. A., Tabrizian, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Substrate-mediated+gene+delivery+from+glycol-chitosan%2Fhyaluronic+acid+polyelectrolyte+multilayer+films%5BTitle%5D)+AND+%22ACS+Appl+Mater+Interfaces%22%5BJournal%5D)">Substrate-mediated gene delivery from glycol-chitosan/hyaluronic acid polyelectrolyte multilayer films.</a> ACS Appl Mater Interfaces. 5, 524-531 (2013).</li>
<li>Pannier, A. K., Wieland, J. A., Shea, L. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Surface+polyethylene+glycol+enhances+substrate-mediated+gene+delivery+by+nonspecifically+immobilized+complexes%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Biomater%22%5BJournal%5D)">Surface polyethylene glycol enhances substrate-mediated gene delivery by nonspecifically immobilized complexes.</a> Acta Biomater. 4, 26-39 (2008).</li>
<li>Wang, C. H., Pun, S. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Substrate-mediated+nucleic+acid+delivery+from+self-assembled+monolayers%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+Biotechnol%22%5BJournal%5D)">Substrate-mediated nucleic acid delivery from self-assembled monolayers.</a> Trends Biotechnol. 29, 119-126 (2011).</li>
<li>Fishbein, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Local+delivery+of+gene+vectors+from+bare-metal+stents+by+use+of+a+biodegradable+synthetic+complex+inhibits+in-stent+restenosis+in+rat+carotid+arteries%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Local delivery of gene vectors from bare-metal stents by use of a biodegradable synthetic complex inhibits in-stent restenosis in rat carotid arteries.</a> Circulation. 117, 2096-2103 (2008).</li>
<li>Fishbein, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adenoviral+vector+tethering+to+metal+surfaces+via+hydrolyzable+cross-linkers+for+the+modulation+of+vector+release+and+transduction%5BTitle%5D)+AND+%22Biomaterials%22%5BJournal%5D)">Adenoviral vector tethering to metal surfaces via hydrolyzable cross-linkers for the modulation of vector release and transduction.</a> Biomaterials. 34, 6938-6948 (2013).</li>
<li>Mittereder, N., March, K. L., Trapnell, B. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+the+concentration+and+bioactivity+of+adenovirus+vectors+for+gene+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Virol%22%5BJournal%5D)">Evaluation of the concentration and bioactivity of adenovirus vectors for gene therapy.</a> J. Virol. 70, 7498-7509 (1996).</li>
<li>Forbes, S. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Modulation+of+NO+and+ROS+production+by+AdiNOS+transduced+vascular+cells+through+supplementation+with+L-Arg+and+BH4%3A+Implications+for+gene+therapy+of+restenosis%5BTitle%5D)+AND+%22Atherosclerosis%22%5BJournal%5D)">Modulation of NO and ROS production by AdiNOS transduced vascular cells through supplementation with L-Arg and BH4: Implications for gene therapy of restenosis.</a> Atherosclerosis. 230, 23-32 (2013).</li>
<li>Niinomi, M., Nakai, M., Hieda, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+new+metallic+alloys+for+biomedical+applications%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Biomater%22%5BJournal%5D)">Development of new metallic alloys for biomedical applications.</a> Acta Biomater. 8, 3888-3903 (2012).</li>
<li>Brito, L. A., Chandrasekhar, S., Little, S. R., Amiji, M. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Non-viral+eNOS+gene+delivery+and+transfection+with+stents+for+the+treatment+of+restenosis%5BTitle%5D)+AND+%22Biomed+Eng+Online%22%5BJournal%5D)">Non-viral eNOS gene delivery and transfection with stents for the treatment of restenosis.</a> Biomed Eng Online. 9, 56(2010).</li>
<li>Egashira, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Local+delivery+of+anti-monocyte+chemoattractant+protein-1+by+gene-eluting+stents+attenuates+in-stent+stenosis+in+rabbits+and+monkeys%5BTitle%5D)+AND+%22Arterioscler+Thromb+Vasc+Biol%22%5BJournal%5D)">Local delivery of anti-monocyte chemoattractant protein-1 by gene-eluting stents attenuates in-stent stenosis in rabbits and monkeys.</a> Arterioscler Thromb Vasc Biol. 27, 2563-2568 (2007).</li>
<li>Ohtani, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stent-based+local+delivery+of+nuclear+factor-kappaB+decoy+attenuates+in-stent+restenosis+in+hypercholesterolemic+rabbits%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Stent-based local delivery of nuclear factor-kappaB decoy attenuates in-stent restenosis in hypercholesterolemic rabbits.</a> Circulation. 114, 2773-2779 (2006).</li>
</ol>

De ontwikkeling van het protocol en de studies die in dit artikel worden gepresenteerd, werden gedeeltelijk ondersteund door American Heart Association Scientist Development-subsidies (I.F. 0735110N en M.C. 10SDG4020003), U.S. National Heart, Lung, and Blood Institute-subsidie HL 72108 (R.J.L.) en U.S. National Heart, Lung, and Blood Institute T32 007915 (S.P.F.). Angioplastiekkatheters werden vriendelijk gedoneerd door NuMED (Hopkinton, NY). De auteurs willen de secretariële assistentie van mevrouw Susan Kerns graag erkennen.

<html> De gepresenteerde protocol beschrijft een operationele methode voor het substraat gemedieerde gentherapie bereikt door omkeerbare bevestiging van adenovirale vectoren van roestvaststalen oppervlakken coatless. Terwijl ontwikkeld voor specifieke doel-stent gentherapie van vasculaire restenose, deze techniek heeft veel bredere toepassingen op het gebied van biomaterialen, biomedische implantaten en gentherapie. Hoewel gepresenteerd studies hebben uitsluitend gebruikt roestvrij staal als ...

De effectiviteit van gentherapie als een therapeutische modaliteit wordt gehinderd door de slechte targeting vermogen van gentherapie vectoren 1,2. Het ontbreken van een goede targeting resultaten in sub-therapeutische niveaus van transgene expressie op de doellocatie en leidt tot een brede verspreiding van vectoren voor niet-doelwit organen 3, met inbegrip van degenen die verantwoordelijk zijn voor het monteren van de immuunrespons tegen zowel de vector en gecodeerde therapeutisch product 4, 5. Een mogelijk middel om de promiscuïteit van transductie te compenseren en te bevorderen targeting is genvectoren voeren op de gewenste locatie in een vorm die hun vrije verspreiding uitsluit via bloed en lymfe. Typisch deze inspanningen steunen op een lokaal injecteerbare afgiftesystemen bestaande uit ofwel virale of niet-virale vectoren gemengd met fibrine, collageen of hyaluronzuur hydrogel matrices 6-10 die in staat tijdelijk ondersteunen genvectoren op de injectieplaats door het fysisch invangen them in een polymeer netwerk. Een ander algemeen geaccepteerd model voor gelokaliseerde gentherapie gebruikt immobilisatie van genvectoren op het oppervlak van geïmplanteerde prothesen 11,12. Permanente medische implantaten (endovasculaire, bronchiale, urologische en gastro-intestinale stents, pacemakers, kunstgewrichten, chirurgische en gynaecologische mazen, enz.) Worden jaarlijks gebruikt in de tientallen miljoenen patiënten 13. Terwijl over het algemeen effectief, deze apparaten zijn gevoelig voor complicaties die onvoldoende onder controle is door de huidige medische praktijk 14-17. Implanteerbare prothesen presenteren een unieke kans om te dienen als proxy platforms voor gelokaliseerde gentherapie behandeling. Vanuit de farmacokinetische oogpunt, oppervlakte derivaatvorming van medische implantaten met een relatief lage input doses genvectoren resultaten in het bereiken van zowel hoge lokale concentraties van genvectoren op het implantaat / weefsel-interface en het vertragen van de kinetiek van their eliminatie van deze locatie. Als gevolg van langdurig verblijf en een verhoogde opname van de beoogde celpopulatie vector immobilisatie minimaliseert verspreiding van het gen vector. Dus de onbedoelde inoculatie van niet-doelwit weefsels wordt verminderd. Oppervlak aanbinden van genvectoren op implanteerbare biomaterialen (ook genoemd als-substraat gemedieerde gen-levering of vaste fase gentherapie) is in celcultuur en dierproeven uitgevoerd met behulp van zowel specifieke (antigeen-antilichaam 18-20, avidine-biotine 21,22) en aspecifieke 23-26 (kosten, van der Waals) interactie. De covalente binding van vectoren om het oppervlak van de geïmplanteerde inrichting is eerder beschouwd als niet-functioneel door de te sterke bindingen met het oppervlak beletsel vector internalisatie door doelcellen. Onlangs werd aangetoond dat deze beperking kan worden overwonnen door het gebruik van spontaan hydrolyseerbare vernettingsmiddel gebruikt als het tethers tussen het gemodificeerde metalen oppervlak van de stent en de capside-eiwitten van de adenovirale vector 27,28. Bovendien kan de vector afgiftesnelheid en tijdsduur van transgene expressie in vitro en in vivo worden gemoduleerd met gebruik van hydrolyseerbare verknopingsmiddelen vertonen verschillende kinetiek van hydrolyse 28. Dit document verschaft een gedetailleerd protocol voor het omkeerbare covalente binding van adenovirale vectoren aan geactiveerde metalen oppervlak voor een nuttige experimentele opstelling voor het bestuderen daaropvolgende transductie in vitro in gekweekte gladde spiercellen en endotheliale cellen en in vivo in de rat model carotis angioplastiek of stent .

<table><tbody><tr><td>316 roestvrijstalen gaasschijven</td><td>Electon Microscopy Sciences</td><td>E200-SS</td><td></td></tr><tr><td>Generieke 304-kwaliteit roestvrijstalen stents</td><td>Laserage</td><td>op bestelling</td><td></td></tr><tr><td>AdeGFP</td><td>University of Pennsylvania Vector Core</td><td>AD-5-PV0504</td><td></td></tr><tr><td>AdLuc</td><td>University of Pennsylvania Vector Core</td><td>AD-5-PV1028</td><td></td></tr><tr><td>AdEMPTY</td><td>University of Pennsylvania Vector Core</td><td>A858</td><td></td></tr><tr><td>Cy3(NHS)2</td><td>GE Healthcare</td><td>PA23000</td><td></td></tr><tr><td>Sepharose 6B</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>6B100-500ML</td><td></td></tr><tr><td>UV 96-wells platen</td><td>Costar</td><td>3635</td><td></td></tr><tr><td>Fluorometrie 96-wells platen</td><td>Costar</td><td>3915</td><td></td></tr><tr><td>Celcultuur 96-wells platen</td><td>Falcon</td><td>353072</td><td></td></tr><tr><td>Tris(2-carboxyethyl)fosfine hydrochloride (TCEP)</td><td>Pierce Thermo Scientific</td><td>20490</td><td></td></tr><tr><td>Dithiothreitol (DTT)</td><td>Pierce Thermo Scientific</td><td>20290</td><td></td></tr><tr><td>sulfo-LC-SPDP</td><td>Pierce Thermo Scientific</td><td>21650</td><td></td></tr><tr><td>Spectrofotometer</td><td>Molecular Devices&nbsp;</td><td>SpectraMax 190</td><td></td></tr><tr><td>Spectrofluorometer</td><td>Molecular Devices</td><td>SpectraMax Gemini EM</td><td></td></tr><tr><td>Orbitale shaker incubator</td><td>VWR</td><td>1575R</td><td></td></tr><tr><td>Horizontaal luchtstroom oven</td><td>Shel Lab</td><td>1350 FM</td><td></td></tr><tr><td>Centra-CL2 centrifuge&nbsp;</td><td>International Equipment Company</td><td>426</td><td></td></tr><tr><td>Digitale vortex mixer</td><td>Fisher Thermo Scientific</td><td>02-215-370</td><td></td></tr><tr><td>Eclipse TE300 fluorescentiemicroscoop</td><td>Nikon&nbsp;</td><td>TE300</td><td></td></tr><tr><td>DC 500 CCD camera</td><td>Leica</td><td>DC-500</td><td></td></tr><tr><td>7500 Real-Time PCR systeem</td><td>Applied Biosystems</td><td>niet beschikbaar</td><td></td></tr><tr><td>IVIS Spectrum bioluminescentie station</td><td>Perkins-Elmer</td><td>niet beschikbaar</td><td></td></tr><tr><td>EDTA dikaliumzout</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>ED2P</td><td></td></tr><tr><td>Bovin serum albumine fractie V (BSA)</td><td>Fisher Thermo Scientific</td><td>BP1600-100</td><td></td></tr><tr><td>Tween-20</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>P1379</td><td></td></tr><tr><td>Dumont pincetten</td><td>Fine Science Tools</td><td>11255-20</td><td></td></tr><tr><td>A10 cellijn&nbsp;</td><td>ATCC</td><td>CRL-1476</td><td></td></tr><tr><td>Bovine aorta endotheliale cellen</td><td>Lonza</td><td>BW-6002</td><td></td></tr><tr><td>Luciferine, kaliumzout</td><td>Gold Biotechnology</td><td>LUCK-1Ge</td><td></td></tr><tr><td>Pluronic F-127</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>P2443-250G</td><td></td></tr><tr><td>PBS zonder calcium en magnesium</td><td>Gibco</td><td>14190-136</td><td></td></tr><tr><td>Fetaal bovien serum</td><td>Gemini Bio-Products</td><td>100-106</td><td></td></tr><tr><td>Penicilline/Streptomycine oplossing</td><td>Gibco</td><td>11540-122</td><td></td></tr><tr><td>DMEM, hoge glucose</td><td>Corning cellgro</td><td>10-013-CV</td><td></td></tr><tr><td>0,25% Trypsin/EDTA</td><td>Gibco</td><td>25200-056</td><td></td></tr><tr><td>QIAamp DNA micro kit</td><td>Qiagen</td><td>56304</td><td></td></tr><tr><td>Power Sybr Green PCR Master Mix</td><td>Applied Biosystems</td><td>4367659</td><td></td></tr><tr><td>MicroAmp Optical 96-wells reactieplaat</td><td>Applied Biosystems</td><td>N8010560</td><td></td></tr><tr><td>MicroAmp Optical Adhesive Film</td><td>Applied Biosystems</td><td>4360954</td><td></td></tr><tr><td>Cefazolin&nbsp;</td><td>Apotex</td><td>niet beschikbaar</td><td></td></tr><tr><td>Loxicom (Meloxicam)</td><td>Norbrook</td><td>niet beschikbaar</td><td></td></tr><tr><td>Heparine natrium</td><td>APP Pharmaceuticals</td><td>niet beschikbaar</td><td></td></tr><tr><td>Ketavet (Ketamine)</td><td>VEDCO</td><td>niet beschikbaar</td><td></td></tr><tr><td>Anased (Xylazine)&nbsp;</td><td>Lloid</td><td>niet beschikbaar</td><td></td></tr><tr><td>Forane (Isoflurane)&nbsp;</td><td>Baxter</td><td>niet beschikbaar</td><td></td></tr><tr><td>Gebogen Moria iris pincetten</td><td>Fine Science tools</td><td>11370-31</td><td></td></tr><tr><td>Gebogen extra-fijn Graefe pincetten</td><td>Fine Science Tools</td><td>11152-10</td><td></td></tr><tr><td>Dumont #5 pincetten</td><td>Fine Science Tools</td><td>11252-20</td><td></td></tr><tr><td>Vannas veertang</td><td>Fine Science Tools</td><td>15018-10</td><td></td></tr><tr><td>Fijne schaar - ToughCut</td><td>Fine Science Tools</td><td>14058-09</td><td></td></tr><tr><td>Chirurgische schaar</td><td>Fine Science Tools</td><td>14101-14</td><td></td></tr><tr><td>Vicryl hechtdraad (5-0)</td><td>Ethicon</td><td>J385</td><td></td></tr><tr><td>Hechtdraad (4/0 zijde)&nbsp;</td><td>Fine Science Tools</td><td>18020-40</td><td></td></tr><tr><td>Michel hechtclips</td><td>Fine Science Tools</td><td>12040-02</td><td></td></tr><tr><td>Wond dilator (Lancaster oog specula)</td><td>KLS Martin</td><td>34-149-07</td><td></td></tr><tr><td>Hete bead sterilisator</td><td>Fine Science Tools</td><td>18000-45</td><td></td></tr><tr><td>Michel hechtclip applicator</td><td>Fine Science Tools</td><td>112028-12</td><td></td></tr><tr><td>Insyte Autoguard 24 G IV katheter</td><td>Beckton-Dickinson</td><td>381412</td><td></td></tr><tr><td>2F Fogarty katheter</td><td>Edwards Lifesciences</td><td>120602F</td><td></td></tr><tr><td>Teflon slang</td><td>Vention</td><td>041100BST</td><td></td></tr><tr><td>PTA katheter</td><td>NuMed</td><td>op bestelling</td><td></td></tr><tr><td>Gaas pads</td><td>Kendall Healthcare</td><td>9024</td><td></td></tr><tr><td>Katoenen applicators</td><td>Solon Manufacturing</td><td>WOD1003</td><td></td></tr><tr><td>Salina</td><td>Baxter</td><td>281321</td><td></td></tr><tr><td>10 ml spuit (Luer-Lok)</td><td>Beckton-Dickinson</td><td>309604</td><td></td></tr><tr><td>1 ml spuit (Luer-Lok)</td><td>Beckton-Dickinson</td><td>309628</td><td></td></tr><tr><td>Schaar met #40 mes</td><td>Oster&nbsp;</td><td>78005-314</td><td></td></tr><tr><td>Transpore chirurgisch tape</td><td>3M</td><td>MM 15271</td><td></td></tr><tr><td>Puralube dierenkliniek zalf</td><td>Pharmaderm</td><td>niet beschikbaar</td><td></td></tr></tbody></table>

vasculaire gene transfer van metallic stentoppervlakken met adenovirale vectoren tethered via hydrolyseerbare cross-linkers

Vascular Gene Transfer from Metallic Stent Surfaces Using Adenoviral Vectors Tethered through Hydrolysable Cross-linkers

In-stent restenose weer een belangrijke complicatie van stent revascularisatie procedures schaal gebruikt voor herstel van de bloedstroom door kritisch vernauwde delen van coronaire en perifere arteriën. Endovasculaire stents staat afstembare vrijlating van genen met anti-restenotische activiteit kan een alternatieve strategie te presenteren aan momenteel gebruikte drug-eluting stents. Om klinische vertaling bereiken, moet gen eluerende stents vertonen voorspelbare kinetiek van stent geïmmobiliseerde genvector afgifte en plaatsspecifieke transductie van vasculatuur, een al te grote ontstekingsreactie doorgaans geassocieerd met het polymeer coatings die fysieke invangen van de vector. Dit artikel beschrijft een gedetailleerde methodologie voor coatless aanbinden van adenovirale vectoren genen om stents op basis van een omkeerbare binding van de adenovirale deeltjes polyallylamine bisfosfonaat (PABT) -modified roestvrijstalen oppervlak via hydroliseerbare cross-linkers (HC). Een familie vanbifunctionele (amine en thiol-reactief) HC met een gemiddelde t 1/2 van de in-keten ester hydrolyse variërend tussen 5 en 50 dagen werden gebruikt om de vector te verbinden met de stent. De vector immobilisatie procedure wordt typisch uitgevoerd binnen 9 uur en omvat verschillende stappen: 1) incubatie van de metalen monsters in een waterige oplossing van PABT (4 uur); 2) ontscherming van thiolgroepen in PABT geïnstalleerd tris (2-carboxyethyl) fosfine (20 min); 3) uitbreiding van thiol reactieve capaciteit van het metaaloppervlak door reactie met polyethyleenimine de monsters gederivatiseerd met pyridyldithio (PDT) groepen (2 uur); 4) omzetting van PDT groepen om thiolen met dithiothréitol (10 min); 5) modificatie van adenovirussen met HC (1 uur); 6) zuivering van gemodificeerde adenovirale deeltjes per grootte-uitsluiting chromatografie (15 min) en 7) immobilisatie van thiol-reactieve adenovirale deeltjes op het gethioleerde staaloppervlak (1 hr). Deze techniek heeft een brede potentiële toepasbaarheid verder stents,door het faciliteren van oppervlakte-engineering van bioprothetische apparatuur naar de biocompatibiliteit te verbeteren door middel van het substraat-gemedieerde gen-levering aan de cellen interfacing de geïmplanteerde vreemd materiaal.

Vector Laat Experimenten Aanbinden van adenovirale vectoren om het oppervlak van implantaten, waaronder interventie inrichtingen zoals endovasculaire stents, benadert de vector aan de ziekteplaats gedeeltelijk wegnemen van het gebrek aan vectoren fysieke targeting. Echter, kunnen therapeutische effecten via de transductie van doelweefsel bereiken, moet de vector worden vrijgemaakt van het oppervlak (figuur 2). Gebruik van hydrolyseerbare cross-linkers werd v...

Deze studies rapporteren over de omkeerbare hechting van adenovirale genvectoren aan kapot metalen oppervlakken van stents en model mesh schijven. Duurzame afgifte van transductie-competente virale deeltjes, afhankelijk van de hydrolyse van cross-linkers die worden gebruikt voor vector immobilisatie, resulteert in een duurzame locatie-specifieke transgen expressie in vasculaire cellen en in stent-achtige slagaders.

Vasculaire Gene Transfer van Metallic stentoppervlakken met adenovirale vectoren Tethered via Hydrolyseerbare Cross-linkers

In-stent restenosis presents a major complication of stent-based revascularization procedures widely used to re-establish blood flow through critically ...

Het algemene doel van deze procedure is om een gen-afgevende stent te implanteren in de arteria carotis communis van een laboratoriumrat en om de omvang en locatie van de daaropvolgende transgen-expressie in de loop van de tijd te bepalen. Hiervoor wordt een arteriotomie uitgevoerd in de arteria carotis externa om vasculaire toegang tot de arteria carotis communis te verkrijgen. Een opgeblazen Fogarty-katheter van twee French wordt door de arteria carotis communis geleid om het endotheel te verwijderen en de mediale laag te beschadigen.Vervolgens wordt een gene-eluding stent gemonteerd op een angioplastiekkatheter die in het middensegment van de door de ballon beschadigde gemeenschappelijke halsslagader is ingebracht, en deze wordt uiteindelijk geplaatst om de arteriële luciferase-expressie te bepalen. Luciferine, samen geformuleerd met onic-gel, wordt op de perivasculaire regio aangebracht en er wordt bioluminescentie-imaging uitgevoerd. Uiteindelijk kunnen resultaten worden verkregen die een vergelijking mogelijk maken van verschillende gene-eluding stentformuleringen met betrekking tot de omvang en duur van de vasculaire weefseltransductie.Het voordeel van het voorkomen van acute restenose en stenttrombose met behulp van gentherapie is dat dit de meest directe manier is om de expressie van exogene genen uit virale vectoren in gestentte arteriën te monitoren. Hoewel onze strategie voor het binden van adenovirale vectoren aan stents volledig begrijpelijk is, is de tekstuele nuance van de chirurgische procedure voor stentimplatatie bij ratten duidelijk. Bereid, zoals visueel gedemonstreerd, de stents voor en voeg deze toe zoals beschreven in het bijbehorende schriftelijke document.Bewaar de stentderivaten van het virus in steriele PBS bij vier graden Celsius gedurende maximaal 24 uur vóór gebruik. Bepaal na het anesthetiseren van mannelijke Sprague Dawley-ratten de diepte van de anesthesie aan de hand van de pootknijprespons en spiertonus, en scheer vervolgens de nek en het bovenste borstgebied. Breng een oogzalf voor dieren aan om uitdroging van de sclera te voorkomen en dien een antibioticum, analgeticum en zoutoplossing toe.Katteniseer vervolgens de staartvene met een 24 gauge katheter en dien aseptisch heparine toe. Bereid de hals en het bovenste borstgebied voor met povidon en ethanol. Plaats het dier vervolgens in rugligging met het hoofd naar de operateur gericht.Plaats vervolgens steriele doeken met behulp van een scalpel. Maak een midline-incisie door de huid en de fascia van de nek. Gebruik botte dissectietechnieken om de linker arteria carotis externa te isoleren.Het meest kritische aspect van deze procedure is het voorbereiden van de arterie voor de ectomie. Hiervoor isoleert u de arteria carotis externa en maakt u deze volledig schoon. Ligeeer de arteria carotis externa op de meest distale bereikbare plaats.Breng vervolgens een verschuifbare tijdelijke ligatuur van 4-0 zijde aan bij de oorsprong van de arteria carotis interna. Maak daarna met veerscharen een incisie van twee millimeter in de linker arteria carotis externa via de incisie. Voer een 2 French Fogarty-katheter in de arteria carotis communis in.Zet de punt van de catheter op met zoutoplossing. Om vervolgens het endotheel te denuderen, wordt de opgeblazen ballon drie keer bewogen van de aortaboog naar de bifurcatie van de arteria carotis. Schuif een stukje slang over de Fogarty-catheter en in de arteria carotis communis.Verwijder de houder van de Fogarty-katheter, krimp deze en plaats een Luke Derivate-stent over de ballon van een angioplastiekatheter met een diameter van 1,5 millimeter. Voer de stent door de Teflon-buis en breng deze voort naar het middensegment van de arteria carotis communis. Vermijd het schuren van de stent tegen de buis of de vaatwand.Om de stent te plaatsen, verbindt u de angioplastiekkatheter met een deflatie-manometer en oefent u gedurende 30 seconden een druk van 12 atmosfeer uit. Trek de angioplastiekkatheter terug. Bind vervolgens de arteria carotis externa af proximaal van de plek van de arteriotomie en verwijder de tijdelijke ligatuur op de arteria carotis interna.Sluit de operatiewond in lagen met doorlopende 4-0 Vicryl-hechtingen en zet de huid vast met nietjes. Plaats het dier op een warmtemat voor het herstel totdat het weer kan lopen. Plaats het dier daarna terug in zijn individuele kooi.Hoewel postoperatieve dieren doorgaans geen tekenen van pijn of ongemak vertonen na de eerste 12 uur na de procedure, kan een verlenging van de meloxicam-therapie tot 72 uur worden overwogen. De tijdspunten variëren van één dag tot drie weken na het plaatsen van de stent. Bereid de bioluminescentie-imaging voor door de Living Image versie 4.2 of nieuwere software voor het IVIS-spectrumapparaat te openen.De initialisatie van de beeldvormingsapparatuur duurt ongeveer 10 minuten. Bereid vervolgens een mengsel voor van 50 mg/mL Lucifer in PBS en 25%onic F1 27 in PBS in een verhouding van één op vier, volume tot volume, en bewaar dit op ijs. De oplossing moet viskeus zijn.Nadat de rat is gebouteerd met isofluraan en de diepte van de anesthesie is gecontroleerd, worden de chirurgische klemmen aseptisch verwijderd. Bereid de plek voor en open de operatiewond opnieuw. Dien drie milligram per kilogram meloxicam subcutaan toe. Gebruik een botte dissectie om opnieuw toegang te krijgen tot de linker arteria carotis communis en scheid deze van de nervus vagus en het aangrenzende bindweefsel.Breng met een pipet 200 µL van het gekoelde luciferian onic-mengsel direct aan op het blootgestelde segment van de arteria carotis communis. Bij contact met het weefsel bij 37 °C moet de oplossing geleren. Plaats het dier vervolgens in rugligging in de beeldunit van het ivus spectrum-apparaat en breng een gezichtsmasker aan om de isofluraan-anesthesie in stand te houden.Kies vervolgens in het venster van het acquisitiecontrolepaneel van de software positie B, die overeenkomt met een camera-objectafstand van 6,6 centimeter in het vervolgkeuzemenu van het gezichtsveld, selecteer binning en stel de binningfactor in op medium. Typ vervolgens 2,5 centimeter in het vak voor de hoogte van het object en voer de belichtingstijd in. Kies minuten als tijdseenheid en selecteer de numerieke waarde twee.Pas de positie van het dier in de kamer aan zodat de nek en de bovenkant van de borstkas van de rat volledig binnen het vierkant vallen dat op de bodem van de kamer is geprojecteerd. Klik drie minuten na het aanbrengen van de Luciferian onic-gel op de acquisitieknop op het scherm om de beeldacquisitie te starten. De acquisitietijd kan variëren van één tot zes minuten, afhankelijk van de verwachte signaalsterkte.Na het verkrijgen van het beeld wordt een spuit gebruikt om de gel met zoutoplossing weg te spoelen en wordt de periarteriële ruimte drooggedabt met steriel gaas en wattenstaafjes. Sluit de wond met Vicryl-hechtingen en klem de huid vast met nietjes. Laat het dier vervolgens herstellen en plaats het terug in de kooi.Herhaal, zoals eerder beschreven, de beeldgevingsprocedure op een later tijdstip. Dit dient om het verloop in de tijd van de arteriële expressie te bestuderen die wordt teweeggebracht door de in de stent geïmmobiliseerde adenovirale vectoren voor systemische toediening. Bereid na het anesthetiseren en voorbereiden van het dier een oplossing van 50 mg/mL Lucifer in PBS.Katheteer zoals voorheen de staartвена met een 24 gauge katheter en zet deze vast door een stukje chirurgisch plakband tussen de staart en de katheter te plaatsen. Vouw vervolgens de randen van het plakband omhoog en wikkel deze meerdere keren om de staart. Injecteer één milliliter van de oplossing via de katheter over een interval van tien seconden, één minuut na de initiële injectie.Start de beeldacquisitie. Zoals eerder vermeld, dient men er rekening mee te houden dat een injectiesnelheid van minder dan 10 seconden kan leiden tot epileptische activiteit en ademstilstand om de potentiële effecten gerelateerd aan het gebruik van verschillende gehydrolyseerde crosslinkers te onderzoeken. Bij arteriële transductie werden de dieren geïmplanteerd met Luke eluding stents en werden er beelden gemaakt één en acht dagen na het plaatsen van de stent.Zoals hier te zien is één dag na stentimplantatie, vertonen dieren die behandeld zijn met stents geformuleerd met snel gehydrolyseerde crosslinker doorgaans het hoogste luminescentiesignaal; ratten die intermediair gehydrolyseerde crosslinker ontvingen, vertoonden het op één na hoogste luminescentiesignaal, gevolgd door stents met langzaam gehydrolyseerde crosslinker. Er werd geen waarneembaar signaal geobserveerd in de groep ratten waarin stents waren geïmplanteerd die waren geprepareerd met niet-gehydrolyseerde crosslinker. Dit onderstreept het belang van een ongehinderde vectorvrijgave uit de stent voor een effectieve transductie van vasculair weefsel.Tegen dag acht was de gemiddelde intensiteit van luciferase-expressie bij stents geformuleerd met RHC meerdere malen gedaald. Wanneer de intensiteiten van dag één en dag acht afzonderlijk op een logaritmische schaal werden uitgezet, werd een 1,4-voudige toename waargenomen bij stents geformuleerd met intermediair hydrolyserende crosslinkers en een 1,8-voudige toename bij stents geformuleerd met traag hydrolyserende crosslinkers. Deze bevinding is consistent met de hypothese dat een duurzamere vasculaire transductie optreedt bij gene eluding stents die een tragere kinetiek van vectorvrijgave vanuit het stentoppervlak vertonen.Na het bekijken van deze video zou u een goed begrip moeten hebben van hoe een add Luke alluding stent in de arteria carotis communis wordt geïmplanteerd en hoe de daaropvolgende vasculaire expressie van luciferase wordt afgebeeld zodra de stent is beheerst. De implantatiechirurgie kan 20 tot 25 minuten duren, terwijl de beeldvormingsprocedure 10 tot 15 minuten kan duren. We gebruiken dezelfde techniek om de anti-otische effecten van gentherapie-formuleringen en niet-genetische geneesmiddelen te bestuderen door de mate van arteriële obstructie te bepalen.Twee weken na het plaatsen van de stent.

vascular-gene-transfer-from-metallic-stent-surfaces-using-adenoviral

Research

JoVE Journal

Medicine

Geneeskunde

Een methode van gen-overdracht voor de behandeling van ischemisch hartfalen wordt beschreven met behulp van een varkens-model van een myocardinfarct. Onze eenvoudige en reproduceerbare methode stelt ons in staat om de effectiviteit van verschillende gen-overdracht gemakkelijk te evalueren met een zeer eenvoudige en reproduceerbare manier.

Gene Transfer voor ischemisch hartfalen in een preklinisch model

We beschrijven de manier van programmeren stamcellen therapeutische angiogenese factoren overexpressie bioafbreekbare polymere nanodeeltjes. Beschreven processen omvatten polymeersynthese, transfecteren vet-afgeleide stamcellen in vitro, en valideren van de werkzaamheid van geprogrammeerde stamcellen om angiogenese te bevorderen in een muizen achterbeen ischemie model.

Programmeren stamcellen voor therapeutische angiogenese gebruik van biologisch afbreekbare polymere nanodeeltjes

Een voorbeeld van adenovirale gentherapie in humane diabetische orgaan-gecultiveerde hoornvliezen wordt gepresenteerd met als doel de normalisatie van vertraagde wondgenezing en een duidelijk verminderde expressie van epitheliale stamcelmarkers in deze hoornvliezen. Het beschrijft ook de optimalisering van dit proces in stamcel-verrijkte limbale epitheelculturen.

Adenovirale Gentherapie voor Diabetische keratopathie: Effecten op wondgenezing en Stem Cell Marker Expressie in Human Organ-gekweekte Corneas en Limbale epitheelcellen

Deze methode is het introduceren van een transgenic in het endotheel van konijn halsslagaderen. Invoering van de transgenic zodat kan worden nagegaan van de biologische rol van de transgenic product in normale slagaders of ziekte modellen. De methode is ook handig voor het meten van de activiteit van regelgevende opeenvolgingen van DNA.

In Vivo Genoverdracht op het konijn gemeenschappelijke halsslagader endotheel

Deze methode beschrijft de plaatsing van de spreekbeurt ader enten bij konijnen, de transductie van de transplantaties en de verwezenlijking van duurzaam transgenic expressie. Hierdoor kan het onderzoek van fysiologische en pathologische rollen van transgenen en hun eiwitproducten in geënte aderen, en het testen van gentherapieën voor ader graft ziekte.

Een konijn Model van duurzaam transgenic expressie in de halsslagader aan gemeenschappelijke halsslagader spreekbeurt transplantaten

Dit protocol is bedoeld voor het beschrijven van varkens hepatocyte isolatie en ex vivo gene levering om te genezen van modellen van metabole ziekten via cel autologe transplantatie. Hoewel dit model geniet van unieke voordelen die succesvolle therapie gunst, is de toepassing een relevante Stichting bijkomende ziekten en aanduidingen aan te pakken.

Lentivirale Vector-gemedieerde gentherapie van hepatocyten Ex Vivo voor autologe transplantatie in varkens

Het protocol hier beschreven kan onderzoekers specifiek adenovirus capsids op geselecteerde locaties wijzigen door eenvoudige chemie. Afgeschermde adenovirus vectoren deeltjes retargeted gene transfer vectoren kunnen worden gegenereerd en vector-gastheer interacties kunnen worden bestudeerd.

Gecombineerde genetische en chemische Eiwitmantel wijzigingen van genenoverdracht Adenovirus gebaseerde vectoren voor afscherming en Targeting

Er worden methoden beschreven voor het genereren van grote hoeveelheden recombinante adenovirussen, die vervolgens kunnen worden gebruikt om het inheemse knaagdier urotheel te transduceren, waardoor expressie van transgenen of downregulatie van endogene genproducten mogelijk is.

Expressie van transgenen in native blaasurotheel met behulp van adenovirus-gemedieerde transductie

Dit protocol beschrijft hoe intrasplentische injectie van AAV8-afgeleverd klein haarspeld-RNA dezelfde gen-knockdown-efficiëntie in de lever bereikt als injectie van de poortader, wat een eenvoudigere procedure vertegenwoordigt met veel lagere perioperatieve en postoperatieve mortaliteit en complicaties.

Efficiënte genknockdown in de lever via intrasplenische injectie van adeno-geassocieerd virus serotype 8 (AAV8)-afgeleverd klein haarspeld-RNA

Hier wordt een protocol gepresenteerd voor de implantatie van een weefselgemanipuleerd vasculair transplantaat in de halsslagader van de muis met behulp van de manchettechniek, waardoor een geschikt diermodel wordt geboden voor het onderzoeken van mechanismen voor de regeneratie van vasculair weefsel.

Implantatie van weefselgemanipuleerd vasculair transplantaat in de halsslagader van muizen via manchettechniek

Leer de implantatie van een gen-eluerende stent in de arteria carotis communis van ratten om transgeenexpressie te evalueren. Deze methode maakt bioluminescentiebeeldvorming mogelijk voor vasculaire gentherapie-onderzoek.

Vasculaire Gene Transfer van Metallic stentoppervlakken met adenovirale vectoren Tethered via Hydrolyseerbare Cross-linkers

Meer video's verkennen