Name: Veiligheidsmaatregelen en operationele procedures in een (A) BSL-4 Laboratory: 4. Medical Imaging Procedures (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-10-03T11:30:00.000+00:00
Duration: 9 min 36 s
Description: Leer veilige medische beeldvormingsprocedures in een ABSL-4 laboratorium met CT-scanning van besmette cavia's. Deze methode toont effectieve protocollen voor niet-invasieve ziekteprogressie-evaluatie bij dodelijke pathogenen.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

De inhoud van deze publicatie weerspiegelt niet noodzakelijk de opvattingen of beleidslijnen van het Amerikaanse Ministerie van Volksgezondheid en Sociale Diensten (DHHS) of van de instellingen en bedrijven die aangesloten zijn bij de auteurs. Dit werk werd gedeeltelijk gefinancierd via het hoofdcontract van Battelle Memorial Institute met het Amerikaanse National Institute of Allergy and Infectious Diseases (NIAID) onder Contractnr. HHSN272200700016I. M.R.H., K.J., D.P., L.B. en J.W. hebben dit werk uitgevoerd als werknemers van Battelle Memorial Institute. Onderaannemers van Battelle Memorial Institute die dit werk hebben uitgevoerd, zijn: R.B., een werknemer van Charles River Laboratories - Insourcing Solutions; L.K. en M.R.L., werknemers van MEDRelief Staffing Inc.; M.G.L. als werknemer van Lovelace Respiratory Research Institute, Inc.; en J.H.K. als werknemer van Tunnell Government Services, Inc.

Dit protocol houdt zich aan de volgende richtlijnen verzorging van dieren. De dieren werden gehuisvest in een faciliteit geaccrediteerd door de Vereniging voor evaluatie en accreditatie van Laboratory Animal Care International. Alle experimentele procedures werden goedgekeurd door het Nationaal Instituut voor Allergie en Besmettelijke Ziekten, Afdeling Klinische Research, Animal Care en gebruik Comite en waren in overeenstemming met de Animal Welfare Act regelgeving, GGD-beleid, en de Gids voor de zorg en het gebruik van Laboratory Animals aanbevelingen. 1. Bereid CT Scanner (op &quot;koude zijde&quot;) <ol><li> Conditioneren van de X-Ray Tube <ol><li> Controleer of er geen medewerker is in de scan kamer en het onderwerp tafel is leeg. </li><li> Voer de buis conditioning procedure in overeenstemming met de specificaties van de fabrikant van de scanner. </li></ol></li><li> Voer Air Calibration <ol><li> Zorg dat er geen voorwerpen in het gebied scannen. </li&gt; <li> Voer de lucht kalibratie procedure in overeenstemming met de specificaties van de fabrikant van de scanner. Op veel platforms, dit kalibratie automatisch of semi-automatisch. </li></ol></li><li> Voer Quality Control Scan (op &quot;warme kant&quot;) <ol><li> De vermelding voltooien procedures ABSL-4 pak laboratorium (in detail beschreven in referentie 5) met de toevoeging van een extra stap. Als procedures betrekken blootstelling aan radioactieve stoffen, clip een dosimeter aan de scrubs onder de beschermende kleding. Lever de dosimeter elke 2 maanden voor de berekening van de blootstelling aan straling. </li><li> Plaats de CT hoofd en lichaam fantoom, dat bestaat uit lucht, water en Teflon, in de juiste houder op aftasttafel. </li></ol></li><li> Voer Quality Control Scan (over &quot;koude zijde&quot;) <ol><li> Van de koude kant, vooraf de fantoom in het midden van de boring 6. </li><li> Het verwerven van een scan met behulp van laboratorium gestandaardiseerde kwaliteitscontrole (QC) parameters om ensure de scanner is binnen de specificaties van de fabrikant. </li><li> Voer QC geautomatiseerde analyse van de beelden naar gemiddelde en standaarddeviaties van de intensiteit van het signaal binnen de regio van belang zijn gecentreerd op elk type materiaal (lucht, water of Teflon) volgens het protocol van de fabrikant te berekenen. </li><li> Houd CM personeel dat de CT scanner is klaar voor gebruik. </li><li> Controleer of het dier gegevens (identificatienummer, het gewicht, de datum van geboorte) met de CM personeel. </li></ol></li><li> Registreer vakinformatie in de patiënt database. <ol><li> Bij de CT scanner console (de &quot;koude zijde&quot;), toegang radiologie informatiesysteem van de scanner (RIS). Controleer of de RIS wordt gevuld met de details van het scannen schema. </li><li> Selecteer de huidige onderwerp en demografische gegevens, zoals identificatienummer, leeftijd, geboortedatum en examen datum; dan moet het examen soort automatisch bevolken. </li><li> handmatig invoeren onderwerp gewicht. </li><li> Kies de juiste subject oriëntatie in CT gantry (bv, hoofd eerst, voeten eerst, gevoelig, rugligging). </li></ol></li></ol> 2. Bereid Werk gebieden in de ABSL-4 Suit Laboratory <ol><li> Bereid de klasse II bioveiligheid kast (BSC) of afzuigtafel in de Animal Procedure Room. Schakel BSC (of Downdraft Table) ten minste 10 min voorafgaand aan het gebruik. <ol><li> Reinigen en desinfecteren binnenoppervlakken van de BSC of het bovenvlak van de afzuigtafel met een erkend ontsmettingsmiddel zoals 5% dual quaternair ammonium (n-alkyl dimethyl benzyl ammoniumchloride, n-alkyl dimethyl benzyl ammoniumchloride ethyl) ontsmettingsmiddel. Spray binnenoppervlakken van de BSC of het bovenvlak van de afzuigtafel en veeg oppervlakken droog na 10 minuten contacttijd. Spray en veeg oppervlakken met 70% ethanol om de resterende desinfectiemiddel te verwijderen. </li><li> Plaats apparatuur en benodigdheden die nodig zijn in de BSC of afzuigtafel, met inbegrip van de anesthesie-inductie doos en dier handling handschoenen. </li></<html> ol&gt; </li><li> Bereid de CT-scanner Bed. <ol><li> Set-up van het dier vasthoudinrichting op de CT bed. </li><li> Set-up van de vitale functies te controleren om de hartslag en zuurstofverzadiging te sporen. Als het scannen sessie is langer dan 10 min, bewaken temperatuur. </li></ol></li><li> Bereid de anesthesie Machine. <ol><li> Controleer de isofluraan volume in de verdamper en voeg meer isofluraan indien nodig. </li><li> Voer een lektest door het onder druk van de verdoving ademhaling circuit met zuurstof, controleren op ontsnapte gas, en visueel inspecteren van de anesthesie machine op lekkages 1. <ol><li> Als een lek wordt ontdekt, bepalen de bron, het probleem te verhelpen, en het uitvoeren van een follow-up lektest om correcties naar behoren zijn uitgevoerd te controleren. </li></ol></li><li> Weeg de disposable opruiming bus die afval narcosegas vangt. Als de bus is ≥50 g over de oorspronkelijke gewicht van de bus, vervang bus 7. </li></ol></li></ol>title &quot;&gt; 3. Animal Transport van Animal Procedure Room en voorbereiding van anesthesie inductie in CT-scanner Kamer (op&quot; warme kant &quot;) <ol><li> Breng de Kooi Housing de Cavia uit een van de knaagdieren Holding Rooms Grenzend aan de Imaging Suite in de klasse II BSC. <ol><li> Controleer of het dier ID. </li><li> Verwijder de kooi en bewaar het dier. </li></ol></li><li> Open het deksel om de kooi en don dier beschermende lederen handschoenen over de positieve druk pak handschoenen. Voorzichtig pak de cavia, plaatst dier in de anesthesie-inductie doos, en hebben betrekking op de doos met het deksel. </li><li> Verwijder de anesthesie-inductie doos met het dier uit de klasse II BSC en plaats deze op een transportwagen. </li><li> Met behulp van de wagen, neemt het dier naar de CT-scanner kamer. </li><li> In de CT-scanner kamer, direct verbinding de opruiming bus en anesthesie machine om de inductie box. Zet de zuurstofgas aan de inductie en stel de verdamper te Deliver 4% isofluraan voor de initiële inductie van de anesthesie 8. </li><li> Monitor het dier tijdens de anesthesie-inductie voor een adequate diepte van de anesthesie (bijvoorbeeld niet reageren op externe prikkels, spiertonus, stabiele ademhaling en hartslag) 8. </li><li> Schakel de anesthesie aan de inductie box wanneer de cavia volledig verdoofd. </li></ol> 4. Schik onderwerp op Imaging Bed in de CT-scanner (op &quot;Hot kant&quot;) <ol><li> Verwijder de verdoofde Guinea Pig uit de Inductie Box en leg ze op de Imaging Bed. <ol><li> Zet de cavia op het bedrijf kussen in een buikligging. </li><li> Toepassen oogzalf in beide ogen het hoornvliesepitheel beschermen tegen uitdrogen. </li></ol></li><li> Dien Onderhoud isofluraananesthesie. <ol><li> Plaats de neuskegel op de cavia en zet gas tot 1 l / min zuurstof te leveren aan de neuskegel 8. </li><li> Stel de verdamper tot 2-3% van het leverenisofluraan aan de cavia via de neuskegel. </li><li> Zodra het onderwerp de gewenste vlak van anesthesie (geen beweging, ~ 60 ademhalingen per minuut) heeft bereikt, vermindert de verdamper instellen op 1,0-1,5% van isofluraan te leveren voor het onderhoud van de anesthesie. </li><li> Bewaak de vitale functies zoals lichaamstemperatuur, hartslag en ademhaling. Als ademhaling begint om het percentage van isofluraan te versnellen of vertragen, te verhogen of te verlagen, respectievelijk 9. </li></ol></li><li> Zorgen bijverwarming cavia lichaamstemperatuur tussen 37 en 39 ° C, indien noodzakelijk, afhankelijk van de verwachte duur van data-acquisitie en anesthesieniveau 8,9 gehandhaafd. </li><li> Bevestig een plastic hoes over de bovenkant van het bedrijf kussen. </li><li> Advance imaging bed in containment buis. </li></ol> 5. Instellen van de Image Field of View <ol><li> Activeer het lasersysteem (imaging personeel) aan de &quot;koude zijde&quot; van de CT scAnner ruimte om de cavia voor CT-scan te positioneren. Gebruik de tabel &quot;in&quot; en &quot;out&quot; knoppen om de anatomie van belang te dekken onder de laserkruisdraden. </li><li> Om het gezichtsveld te stellen, gebruikt u de laser-knop om het startpunt op de anatomie van belang in te stellen. </li><li> Contact CM personeel op &quot;warme kant&quot; naar een lead schild te plaatsen tussen henzelf en de CT-scanner. </li></ol> 6. Acquire Images <ol><li> Acquire enquête scan slice plaatsing voor CT studie beelden volgens het protocol van de fabrikant. </li><li> Voorschrijven slice plaatsing voor CT onderzoek beelden op survey beelden. </li><li> Coördineren met &quot;hot-side&quot; personeel als contrast injectie moet worden gebruikt. </li><li> Acquire studie scan volgens het protocol van de fabrikant. </li><li> Reconstrueren CT-beelden op de scanner console volgens het protocol van de fabrikant. </li><li> Stuur foto&#39;s naar een Picture Archiving and Communication System. Voer verder kwalitatief en quantitative analyses van deze archiveringssysteem volgens het protocol van de fabrikant. </li></ol> 7. Post-scan Recovery <ol><li> Transfer cavia van scanner bed om een ​​schone microisolator kooi met voedsel en traktaties. </li><li> Met behulp van de kar, vervoer de kooi met dier terug naar zijn woongebied. </li><li> Bewaken van de dieren tot ze volledig hersteld van de anesthesie. </li><li> Eenmaal volledig hersteld, de terugkeer van de kooi aan de high-efficiency deeltjes lucht (HEPA) -filtered geventileerd racks. </li></ol> 8. Ontsmetting van Scanner Bay and Equipment <ol><li> Ontsmet de scanner bay area (bijvoorbeeld oppervlakken die in direct contact met het dier, scanner bed, scanner vloer, deurklinken waren) met een 5% dual quaternaire ammoniumverbindingen oplossing voor een contacttijd van 10 min. </li><li> Spoel oppervlakken met een 70% ethanoloplossing na 10 min blootstelling aan dubbele quaternaire ammonium oplossing. </li><li> Veeg items die niet direct kunnen worden gespotenmet dubbele quaternaire ammonium-oplossing (gevoelige elektronische apparatuur) met een dual-quaternaire-ammonium verzadigde doek, gevolgd door een-ethanol verzadigd doek. </li></ol>

<ol><li>Jahrling, P. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+NIAID+Integrated+Research+Facility+at+Frederick%2C+Maryland%3A+a+unique+international+resource+to+facilitate+medical+countermeasure+development+for+BSL-4+pathogens%5BTitle%5D)+AND+%22Pathog+Dis%22%5BJournal%5D)">The NIAID Integrated Research Facility at Frederick, Maryland: a unique international resource to facilitate medical countermeasure development for BSL-4 pathogens.</a> Pathog Dis. , (2014).</li>
<li>de Kok-Mercado, F., Kutlak, F. M., Jahrling, P. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+NIAID+Integrated+Research+Facility+at+Fort+Detrick%5BTitle%5D)+AND+%22Appl+Biosafety%22%5BJournal%5D)">The NIAID Integrated Research Facility at Fort Detrick.</a> Appl Biosafety. 16, 58-66 (2011).</li>
<li>Keith, L., et al. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aKeith%2C+L+%22Preclinical+imaging+in+BSL-3+and+BSL-4+envrionments%3A+imaging+pathophysiology+of+highly+pathogenic+infectious+diseases%22">Preclinical imaging in BSL-3 and BSL-4 envrionments: imaging pathophysiology of highly pathogenic infectious diseases</a>. Moyer, B. R., Cheruvu, N. P. S., Hu, T. , Springer-Verlag. New York, NY. (2014).</li>
<li>Chosewood, L. C., Wilson, D. E. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aChosewood%2C+LC+%22Biosafety+in+microbiological+and+biomedical+laboratories%22">Biosafety in microbiological and biomedical laboratories</a>. , 5th, U.S. Dept. of Health and Human Services. Washington, D.C. . Accessed Sept. 4, 2014 (2009)
 <a target="_blank" href="http://www.cdc.gov/biosafety/publications/bmbl5/.">http://www.cdc.gov/biosafety/publications/bmbl5/.</a> (2009).</li>
<li>Janosko, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Safety+precautions+and+operating+procedures+in+an+%28A%29BSL-4+laboratory%3A+1.+Laboratory+suite+entry+and+exit+procedures%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Safety precautions and operating procedures in an (A)BSL-4 laboratory: 1. Laboratory suite entry and exit procedures.</a> J Vis Exp. , (2016).</li>
<li>Diagnostic Radiology Committee Task Force on CT Scanner Phantoms. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22Phantoms+for+evaluation+and+quality+assurance+of+CT+scanners%22">Phantoms for evaluation and quality assurance of CT scanners</a>. , American Association of Physicists in Medicine. Chicago, IL. (1977).</li>
<li>Collins, B. ACUP 712.01 Waste anesthetic gas scavenging systems. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aCollins%2C+B+%22Institutional+Animal+Care+and+Use+Committee%22">Institutional Animal Care and Use Committee</a>. , Cornell University. Ithaca, NY. Available from: 
 <a target="_blank" href="http://www.research.cornell.edu/care/documents/ACUPs/ACUP712.pdf">http://www.research.cornell.edu/care/documents/ACUPs/ACUP712.pdf</a> (2013).</li>
<li>Gargiulo, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mice+anesthesia%2C+analgesia%2C+and+care%2C+Part+I%3A+anesthetic+considerations+in+preclinical+research%5BTitle%5D)+AND+%22ILAR+J%22%5BJournal%5D)">Mice anesthesia, analgesia, and care, Part I: anesthetic considerations in preclinical research.</a> ILAR J. 53, E55-E69 (2012).</li>
<li>Office of the Press Secretary. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22Executive+order+13546.+Optimizing+the+security+of+Biological+Select+Agents+and+Toxins+in+the+United+States.+The+White+House%22">Executive order 13546. Optimizing the security of Biological Select Agents and Toxins in the United States. The White House</a>. , Washington, DC. Available from: 
 <a target="_blank" href="http://www.whitehouse.gov/the-press-office/executive-order-optimizing-security-biological-select-agents-and-toxins-united-stat">http://www.whitehouse.gov/the-press-office/executive-order-optimizing-security-biological-select-agents-and-toxins-united-stat</a> (2010).</li>
<li>Escaffre, O., Borisevich, V., Rockx, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pathogenesis+of+Hendra+and+Nipah+virus+infection+in+humans%5BTitle%5D)+AND+%22J+Infect+Dev+Ctries%22%5BJournal%5D)">Pathogenesis of Hendra and Nipah virus infection in humans.</a> J Infect Dev Ctries. 7, 308-311 (2013).</li>
<li>Sueblinvong, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Critical+care+for+multiple+organ+failure+secondary+to+Ebola+virus+disease+in+the+United+States%5BTitle%5D)+AND+%22Crit+Care+Med%22%5BJournal%5D)">Critical care for multiple organ failure secondary to Ebola virus disease in the United States.</a> Crit Care Med. , (2015).</li>
<li>Mazur, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Safety+precautions+and+operating+procedures+in+an+%28A%29BSL-4+laboratory%3A+2.+General+practices%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Safety precautions and operating procedures in an (A)BSL-4 laboratory: 2. General practices.</a> J Vis Exp. , (2016).</li>
<li>Bohannon, J. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Safety+precautions+and+operating+procedures+in+an+%28A%29BSL-4+laboratory%3A+3.+Aerobiology%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Safety precautions and operating procedures in an (A)BSL-4 laboratory: 3. Aerobiology.</a> J Vis Exp. , (2016).</li>
</ol>

De auteurs hebben niets te onthullen.

Vorige artikelen in deze serie hebben de uitgebreide training, aandacht voor detail, veiligheidsprocedures, en aanvullende technische controles die nodig zijn om veilig in een maximum containment laboratorium 12,13 werken benadrukt. Het uitvoeren van werk veilig is de hoogste prioriteit in deze laboratoria. Deze filosofie is nog belangrijker bij het werken met levende dieren door extra gevaren zoals de mogelijkheid van geïnfecteerde dieren beten of krassen toebrengen of aërosols 7 genereren. Deze p...

De missie van het Nationaal Instituut voor Allergie en Besmettelijke Ziekten (NIAID) Integrated Research Facility in Fort Detrick in Frederick MD (IRF-Frederick) is om te presteren opkomende infectieziekten onderzoek naar de klinische ziekte processen die correleren met de ernst van de te begrijpen-microbiële geïnduceerde ziekte. De IRF-Frederick heeft een unieke mogelijkheid voor medische beeldvorming in diermodellen van hoge gevolg pathogenen presteren in een ABSL-4 laboratorium 1. De beeldvormende modaliteiten waarover onderzoekers zijn: computed tomography (CT), magnetische resonantie beeldvorming (MRI), positron emissie tomografie (PET), enkel foton computed tomography (SPECT), ultrageluid, röntgen, fluoroscopie en. Onderzoekers gebruik staan ​​ter beschikking imaging-mogelijkheden tot progressie van de ziekte te monitoren en evalueren van de werkzaamheid van interventies, zoals de behandeling met geneesmiddelen en vaccinatie, in longitudinale studies. De beeldvormende modaliteiten van het IRF-Frederick waren specifiekontworpen om de belangrijkste onderdelen van de uitrusting buitenkant van high containment 2,3 te houden en toegankelijk zijn voor onderhoud en reparatie. Dit ontwerp scheidt de imaging suite in &quot;hot&quot; (met pathogeen) en &quot;cold kanten.&quot; Om deze scheiding te bereiken, zijn speciaal ontworpen buizen geconstrueerd voor hoge containment ruimte tot in de boringen van elke beeldvormende modaliteit (figuur 1). Naast het leveren van fysische inperking, deze buizen beschermen beeldvormingsapparatuur uit gassen en chemicaliën om de hoge-containment laboratorium decontamineren. Imaging wetenschappers en technologen werken de scanners uit de &quot;koude zijde&quot; terwijl Comparative Medicine (CM) handvat personeel en dieren op de &quot;warme kant&quot; monitor. Aangezien de CM personeel nauw moeten samenwerken met imaging wetenschappers om deze experimenten te coördineren, kan deze scheiding resulteren in communicatie-uitdagingen. Na evaluatie van opties beschikbaar, CM personeel warenuitgerust met Bluetooth oor stukken die korte golflengte ultra-hoge frequentie radiogolven uitzenden om telefoons gebruikt om de beeldvorming personeel bellen buiten containment. Door het ontwerp van de installatie, draadloze toegangspunten had in elke kamer worden geïnstalleerd om signaalinterferentie veroorzaakt door de lagen van cement en staal tussen de &quot;warme&quot; en &quot;koude zijde&quot; overwinnen. Zo, de communicatie tussen CM personeel het dragen van noisy positieve druk pakken en imaging personeel buiten de high-containment is nu betrouwbaar. Camera&#39;s zijn ook geïnstalleerd op de warme zijde van de beeldvormende kamers voor beeldvorming medewerkers activiteiten zien op het &quot;warme zijde&quot;. Met de camera&#39;s, kan de beeldvorming personeel CM technici begeleiden met dierlijke positioneren of op het laatste moment wijzigingen in de beeldvorming protocol. Alle werkzaamheden in de IRF-Frederick ABSL-4 pak laboratorium vereist personeel om positieve druk chemiepakken 4 te dragen. Het dragen van deze kostuums vermindert de mobiliteit, en de zware latex handschoenen aan het pak plus maximaal drie extra lagen handschoenen compromitteert beweeglijkheid. Het resultaat is dat de procedures langer duren om te voltooien en taken die fijne motorische vaardigheden vereisen, zijn veel moeilijker. Naarmate de bioveiligheid niveau stijgt, handling van dieren en manipulaties worden meer uitdagend en tijdrovend, vooral met kleine dieren. Procedures in een ABSL-4 laboratorium kan tot 2-3 keer langer mee dan een ABSL-2 laboratorium. Het doel van dit artikel is om visueel de uitdagingen in verband met beeldvorming diermodellen in een ABSL-4 omgeving met behulp van CT-scan procedure van een cavia als voorbeeld te tonen.

<table><tbody><tr><td>Micro-Chem Plus</td><td>National Chemical Laboratories</td><td>255</td><td></td></tr><tr><td>CT scanner</td><td>Philips Healthcare</td><td></td><td></td></tr><tr><td>CT phantom</td><td>Philips Healthcare</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Isovue-300 (CT contrast reagent)</td><td>Bracco Diagnostics</td><td>NDC 0270-1315-30</td><td></td></tr><tr><td>Ventilated rack</td><td>Lab Products</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Micro-isolator cage</td><td>Lab Products</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Biosafety cabinet</td><td>Nuaire</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Anesthesia machine</td><td>SurgiVet</td><td>WWV9000</td><td></td></tr><tr><td>Anesthesia induction box</td><td>VetEquip</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Anesthesia mask</td><td>Henry Schein</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Isoflurane</td><td>Henry Schein</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Waste gas scavenging canister</td><td>Fisher</td><td>F/AIR</td><td></td></tr><tr><td>Holding cushion</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Ophthalmic ointment</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Vital signs monitor</td><td>Bionet</td><td>BM3Vet</td><td></td></tr><tr><td>Mobile phone</td><td>Spectralink</td><td>8440</td><td></td></tr><tr><td>Blue Tooth ear piece</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Wireless access points</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Sperian positive-pressure suit</td><td>Honeywell Safety Products</td><td>BSL 4-2</td><td></td></tr><tr><td>Outer suit gloves (latex, Ansell Canners and Handlers)</td><td>Fisher</td><td>19-019-601</td><td></td></tr><tr><td>Outer suit gloves (nitrile/rubber, MAPA)</td><td>Fisher</td><td>2MYU1</td><td></td></tr><tr><td>Scrubs</td><td>Cintas</td><td>60975/60976</td><td></td></tr><tr><td>Socks</td><td>Cintas</td><td>944</td><td></td></tr><tr><td>Duct tape</td><td>Pack-N-Tape</td><td>51131069695</td><td></td></tr><tr><td>Towels</td><td>Cintas</td><td>2720</td><td></td></tr><tr><td>Zip lube</td><td>Amazon</td><td>B000GKBEJA</td><td></td></tr></tbody></table>

veiligheidsmaatregelen en operationele procedures in een (a) bsl-4 laboratory: 4. medical imaging procedures

Safety Precautions and Operating Procedures in an (A)BSL-4 Laboratory: 4. Medical Imaging Procedures

Medisch beeldvorming met behulp van diermodellen voor menselijke ziekten wordt al decennialang toegepast; echter, tot voor kort was medische beeldvorming van ziekten veroorzaakt door hoog-gevaarlijke pathogenen niet mogelijk. In 2014 opende het National Institutes of Health, National Institute of Allergy and Infectious Diseases, Integrated Research Facility at Fort Detrick een Animal Biosafety Level 4 (ABSL-4) faciliteit om het klinische beloop en de pathologie van infectieziekten bij experimenteel geïnfecteerde dieren te beoordelen. Er zijn meerdere beeldvormingsmodaliteiten beschikbaar voor onderzoekers voor deze evaluaties, waaronder computertomografie (CT), magnetische resonantie beeldvorming, positronemissietomografie en single foton emissie computertomografie. Het doel van dit artikel is om de workflow te beschrijven voor het veilig verkrijgen van een CT-beeld van een levend cavia in een ABSL-4 faciliteit. Deze procedures omvatten dierhantering, anesthesie en het voorbereiden en monitoren van het dier tot herstel van sedatie. We zullen ook ingaan op het voorbereiden van de beeldvormingsapparatuur, het uitvoeren van kwaliteitscontroles, communicatiemethoden van de 'hot side' (bevattende pathogenen) naar de 'cold side' en het verplaatsen van het dier van de wachtruimte naar de beeldvormingsruimte.

Strikte naleving van alle veiligheidsprocedures en standard operating procedures voor de behandeling van dieren is essentieel voor het veilig werken in een ABSL-4 laboratorium. Overbrengen besmette dieren in de inductie box van het dier procedurekamer de beeldvormingskamer minimaliseert het risico van besmetting van gemeenschappelijke corridors. Door het volgen van de procedures die nodig zijn, is er geen laboratorium verworven infecties of kruisbesmetting van proefdieren is opgenomen ti...

Hier presenteren we een overzicht van de voorbereiding en dierbehandelingsprocedures die nodig zijn om veilig medisch beeldvorming uit te voeren in een bioveiligheidslaboratorium voor dieren van niveau 4. Computertomografie van een namaak-geïnfecteerde cavia illustreert deze procedures die kunnen worden gebruikt om de ziekte te evalueren die wordt veroorzaakt door een pathogeen met hoge consequenties.

Veiligheidsmaatregelen en operationele procedures in een (A) BSL-4 Laboratory: 4. Medical Imaging Procedures

Medical imaging using animal models for human diseases has been utilized for decades; however, until recently, medical imaging of diseases induced by ...

Het algemene doel van deze beeldgevingsprocedure is het demonstreren van de veiligheidsprocedures die vereist zijn voor het uitvoeren van medische beeldvorming van dieren in een faciliteit voor dierbioveiligheid niveau 4. Door beeldvorming in de omgeving van dierbioveiligheid niveau 4 kan de ziekteprogressie non-invasief worden beoordeeld en kunnen biomarkers worden geïdentificeerd die helpen bij potentiële evaluaties van therapieën en vaccins. Aangezien beeldvormingssuites zijn verdeeld in een warme en een koude zijde, worden geïnfecteerde dieren veilig op de warme zijde in beeld gebracht, terwijl het grootste deel van de beeldvormingsapparatuur buiten, aan de koude zijde, blijft voor eenvoudig onderhoud.Ons doel is om aan te tonen dat we deze diermodellen van dodelijke virusziekten op een veilige manier in beeld kunnen brengen, en om de beperkingen van het werken in een dergelijke omgeving te bespreken. Russ Byrum, de manager van de dierfaciliteit bij het geïntegreerde onderzoekscentrum, zal de dierprocedures demonstreren. Onze beeldvormingstechnoloog, Chris Bartos, werkt samen met het personeel van de comparatieve geneeskunde om de plaatsing van het dier in de scanner te coördineren en de beelden te verkrijgen.Procedures met proefdieren zijn goedgekeurd door de commissie voor dierenzorg en gebruik (Animal Care and Use Committee) en de institutionele commissie voor bioveiligheid (Institutional Biosafety Committee). Controleer ter voorbereiding van de computertomografiescanner of er geen personeelsleden aanwezig zijn aan de warme of koude zijde van de scanruimte en of de onderzoekstafel leeg is. Zorg ervoor dat een object dat de dichtheid van het hoofd en lichaam van een subject representeert, een zogenaamd fantoom, bestaande uit lucht, water en Teflon, in de juiste houder op de scantafel aan de warme zijde is geplaatst.Controleer vanaf de koude zijde of het fantoom correct aan de tafel is bevestigd. Schuif het fantoom naar het midden van de gantry. Maak een scan van het fantoom met behulp van laboratoriumgestandaardiseerde kwaliteitscontroleparameters om te garanderen dat de scanner voldoet aan de specificaties van de fabrikant.Stel het personeel van de vergelijkende geneeskunde op de hoogte dat de computertomografie, of CT-scanner, klaar is voor gebruik. Schakel de downdraft-tafel in de dierenprocedurekamer ten minste tien minuten voor gebruik in. Reinig en desinfecteer de oppervlakken van de downdraft-tafel met een goedgekeurd desinfectiemiddel, zoals een 5% dual quaternary ammonium desinfectieoplossing.Spray de binnenkant van de oppervlakken en veeg deze na 10 minuten inwerktijd droog, spray de oppervlakken vervolgens en veeg ze af met 70% ethanol om resterend desinfectiemiddel te verwijderen. Plaats de benodigde apparatuur en materialen op de downdrafttafel, inclusief de inductiebox voor anesthesie en de handschoenen voor dierbehandeling. Plaats het fixatieapparaat voor dieren op de tafel van de computertomografiescan en stel vervolgens de vitale functiemonitor in.Controleer het volume isofluraan in de verdampers en voeg indien nodig meer isofluraan toe. Inspecteer het anesthesieapparaat visueel op lekken en corrigeer, indien nodig, elk probleem dat tot een lek leidt. Weeg de opvangsilo die het afval van het anesthesiegas opvangt.Verplaats de kooi met het cavia vanuit een van de knaagdierruimtes naast de beeldvormingssuite naar de afzuigtafel. Controleer het identificatienummer van het dier op de kooikaart. Open het deksel van de kooi en trek leren beschermende handschoenen voor dieren over de handschoenen van het overdrukpak.Pak het cavia voorzichtig op. Plaats het dier in de inductiebox voor anesthesie en sluit de box met het deksel. Verwijder de handschoenen voor dierbehandeling en de handschoenen van het reinigingspak met een 5% duale quaternaire ammonium-desinfectieoplossing.Verwijder de box voor anesthesie-inductie met het dier en de kooi van de afzuigtafel en plaats deze op een transportkar. Breng het dier met de kar naar de ruimte voor computertomografiescans. Sluit in de CT-scanruimte direct de opvangcanister en het anesthesieapparaat aan op de inductiebox.Nadat de anesthesie is gestart zoals beschreven in het tekstprotocol, dient u in het warme gedeelte van de CT-scanruimte het dier tijdens de inductie van de anesthesie te monitoren op een adequate anesthesiediepte door te controleren of het dier niet reageert op externe prikkels en door de spierspanning te controleren. Verwijder het geanestheseerde cavia uit de inductiebox en plaats het in buikligging op het kussen van de beeldvormingstafel. Voor aanvullende onderhoudsanesthesie plaatst u de neusconus op het cavia en opent u het gas om zuurstof toe te dienen met een debiet van 1 liter per minuut.Dien isofluraan toe zoals aangegeven in het tekstprotocol. Controleer of de ademhalings- en hartslag stabiel zijn. Schakel de anesthesie naar de inductiebox uit wanneer het cavia volledig is geanestheseerd.Breng in beide ogen oogzalf aan om het hoornvliepithileum tegen uitdroging te beschermen. Activeer het lasersysteem aan de koude zijde van de CT-scanruimte om het cavia te positioneren voor de CT-scan. Gebruik de knoppen voor het naar binnen en buiten bewegen van de tafel om de anatomie van belang onder het laserkruis te plaatsen.Om het gezichtsveld in te stellen, gebruikt u de laserknop om het startpunt over de betreffende anatomie te bepalen. Neem contact op met het personeel van de vergelijkende geneeskunde aan de warme zijde om een loden schild tussen henzelf en de computertomografie-scanner te plaatsen. Voer een survey-scan uit voor de plakplaatsing voor CT-studiebeelden volgens het protocol van de fabrikant.Bepaal de plaatsing van de coupes voor de CT-onderzoeksbeelden op de survey-beelden. Stem dit af met het personeel aan de warme zijde indien contrastmiddel wordt toegediend. Voer de onderzoeksscan uit volgens het protocol van de fabrikant en reconstrueer vervolgens de computed tomography-beelden op de console van de scanner, eveneens volgens het protocol van de fabrikant.Verzend de beelden naar een PACS (picture archiving and communication system). Voer indien nodig verdere kwalitatieve en kwantitatieve analyses uit op deze gegevens die in het archiveringssysteem zijn opgeslagen. Verplaats het cavia vanaf de scantafel naar een micro-isolatiekooi met voedsel in de CT-scanruimte.Maak de nitril handschoenen schoon na het hanteren van het dier. Gebruik de kar om de kooi terug te transporteren naar het huisvestingsgedeelte in de dierproefruimte. Bewaak het dier totdat het volledig is hersteld van de anesthesie voordat de kooi wordt teruggeplaatst in de HEPA-geventileerde rekken.Desinfecteer zowel de afzuigtafel in de dierprocedurekamer als het scannereinde met een 5% dual quaternary ammonium-oplossing. Veeg de oppervlakken af met een 70% ethanoloplossing na een blootstelling van 10 minuten aan de dual quaternary ammonium-oplossing. Veeg items die niet direct gespoten kunnen worden, zoals gevoelige elektronische apparatuur (bijvoorbeeld de monitor en het anesthesieapparaat), af met een doek verzadigd met dual quaternary ammonium, gevolgd door een met ethanol verzadigde doek.Strikte naleving van alle veiligheidsprocedures en standaardwerkwijzen voor het omgaan met dieren is essentieel om veilig te kunnen werken in een ABSL4-laboratorium. Het transporteren van geïnfecteerde dieren in de inductiebox van de procedurekamer voor dieren naar de beelduitsuite minimaliseert het risico op contaminatie van gemeenschappelijke gangen. De invoering van communicatiesystemen, met Bluetooth-telefoons en headsets voor het personeel van de beeldvorming aan de koude zijde om contact op te nemen met het personeel van de vergelijkende geneeskunde aan de warme zijde, evenals visuele communicatie, vermindert de kans op miscommunicatie tussen het gescheiden personeel.Door de juiste procedures te volgen, zijn er geen laboratorium-verworven infecties of kruisbesmettingen van dierproefpersonen geregistreerd tijdens het uitvoeren van onderzoek op dierbiologische veiligheidsniveau 4 (ABSL4) bij het IRF Frederic. ABSL4-virale pathogenen kunnen longgerelateerde pathologieën induceren, en CT is een waardevol instrument voor het monitoren van de ziekteprogressie in diermodellen van infectie. CT-beelden worden gecreëerd op basis van de absorptie van röntgenstraling in weefsels.Bij CT verschijnt een object hoe hoger de dichtheid, zoals bij bot, des te lichter het object wordt weergegeven. Dichte organweefsels zoals het hart en de lever hebben doorgaans een gemiddelde intensiteit, terwijl met lucht gevulde weefsels, zoals gezonde longen, zwart verschijnen. CT verzamelt meerdere röntgenfoto's over een beeldveld van 360 graden, wat wordt gereconstrueerd tot een driedimensionaal beeld van het lichaam.Zodra deze techniek onder de knie is, kan deze in ongeveer 30 minuten worden uitgevoerd mits deze correct wordt toegepast. Door vergelijkbare procedures te volgen, kunnen andere beeldvormingsmodaliteiten, zoals PET, SPECT en MRI, worden ingezet om aanvullende vragen over de pathogenese van de ziekte te beantwoorden, en mogelijk zelfs om het virus zelf in beeld te brengen. Na het bekijken van deze video zou u een goed inzicht hebben in de complexiteit van de procedure en de middelen die nodig zijn om medische beeldvorming bij laboratoriumdieren uit te voeren in een faciliteit met bioveiligheidsniveau 4 voor dieren.

safety-precautions-operating-procedures-an-bsl-4-laboratory-4-medical

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Immunologie en Infectie

Hoewel onderzoekers over het algemeen goed bekend zijn met de procedures en veiligheidsmaatregelen die vereist zijn voor bioveiligheidsniveau 1 of 2 (BSL-1/2) experimenten, zijn ze mogelijk niet bekend met experimentele procedures in BSL-4 paklaboratoria. Dit artikel biedt een gedetailleerde visuele demonstratie van BSL-4 paklaboratorium systemencontrole, laboratoriumtoegang, beweging en uitgangsprocedures.

Veiligheidsmaatregelen en operationele procedures in een (A) BSL-4 Laboratory: 1. Biosafety Level 4 Suit Laboratory Suite Entry en Exit Procedures

Het uitvoeren van virale tests in een BSL-4 laboratorium is complexer vergeleken met werk in een BSL-2 laboratorium vanwege de vereiste aanvullende veiligheidsmaatregelen. Hier presenteren we een overzicht van de praktijken en procedures die in een BSL-4 laboratorium worden gebruikt, waaronder het correct gebruik van klasse II bioveiligheidskasten, afvalbeheer/verwijdering en monsterverwijdering.

Veiligheidsmaatregelen en operationele procedures in een (A) BSL-4 Laboratory: 2. Algemene Practices

Aangezien pathogenen met hoge gevolgen potentieel proefpersonen kunnen infecteren via luchtdruppeltjes, is aerobiologie steeds meer toegepast in pathogeneseonderzoek en de ontwikkeling van medische tegenmaatregelen. We presenteren een gedetailleerde visuele demonstratie van aerobiologieprocedures tijdens een aerosoluitdaging bij niet-menselijke primaten in een maximumbeveiligingsomgeving op bioveiligheidsniveau 4.

Veiligheidsmaatregelen en operationele procedures in een (A) BSL-4 Laboratory: 3. Aerobiology

Een snel-inzetbare, off-grid laboratorium is ontworpen en gebouwd voor externe, beperkt resource-globale instellingen. De functies en de kritieke aspecten van de modules van de logistiek-enhanced, uitbreidbaar, multifunctionele laboratorium worden onderzocht. Een checklist voor een basic Labor werkstroom en een protocol voor een respiratoire virale diagnostische test zijn ontwikkeld en gepresenteerd.

Externe Laboratoriumbeheer: Respiratoir Virus diagnostiek

Dit protocol beschrijft een eenvoudige zelfklevende tape-gebaseerde aanpak voor de bemonstering van de tomaten en andere verse producten oppervlakken, gevolgd door een snelle volledige cel detectie...

Combinatie van Adhesive-tape-gebaseerde Sampling en fluorescentie In situ Hybridisatie voor snelle detectie van Salmonella Op Fresh Produce

Anti-retrovirale therapie van HIV / aids te behandelen wordt bewaakt in Zuid-Afrika op grote schaal. Flowcytometrie is gecombineerd voor hematologie (CD45), immunologie (CD4) en virale-load verbonden CD38 test. Opgenomen in NHLs-SA laboratoria, Johannesburg, deze moderne methoden zijn kostenefficiënt met een verhoogde lokale interne kwaliteitszorg, die als rolmodellen voor de resource-beperkte diagnostiek.

Uitgebreide &amp; Rendabele laboratorium controle van HIV / AIDS: een Afrikaanse Role Model

Aaseters hebben potentieel om besmettelijke overdraagbare spongiforme encefalopathie prionen translokeren in hun uitwerpselen te ziektevrije gebieden. We detail methoden die worden gebruikt om te bepalen of de muis aangepast scrapie prionen infectieus blijven na passage al is het spijsverteringskanaal van de Amerikaanse kraaien (Corvus brachyrhynchos), een gemeenschappelijke consument van dode dieren.

Procedures voor het identificeren van Besmettelijke Prions na passage door het spijsverteringsstelsel van een vogelsoort

In dit artikel wordt de toepassing van fluorescerende beeldvorming beschreven met behulp van een activeerbare optische beeldsensor om de in vivo activiteit van belangrijke matrixmetalloproteinasen te visualiseren in twee verschillende experimentele modellen van ontsteking.

Niet-invasieve<em&gt; In Vivo</em&gt; Fluorescentie Optische Imaging van Inflammatorische MMP Activiteit Met behulp van een Activateerbare Fluorescerende Imaging Agent

We beschrijven een methode om GFP-gelabeld γδ IELs met behulp van intravital Imaging van muizen dunne darm te visualiseren door omgekeerde spinnen schijf confocale microscopie. Deze techniek maakt het bijhouden van levende cellen in het slijmvlies voor maximaal 4 uur en kan worden gebruikt om een verscheidenheid van intestinale immuun-epitheel interacties te onderzoeken.

Intravital beeldvorming van epitheliale lymfocyten in muizen dunne darm

Dit artikel beschrijft de generatie van een orthotopic muismodel van menselijke pleura mesothelioom door implantatie van H2052/484 mesothelioom cellen in de pleuraholte van immuungecompromitteerde athymische muizen. De longitudinale monitoring van de ontwikkeling van intrapleurale tumoren werd beoordeeld door niet-invasieve multimodale [18F] -2-Fluoro-2-deoxy-D-glucose positron emissie tomografie en computertomografie beeldvorming.

Implantatie en monitoring door PET/CT van een Orthothematisch model van menselijk pleura mesothelioom in Athymic muizen

Leer veilige medische beeldvormingsprocedures in een ABSL-4 laboratorium met CT-scanning van besmette cavia's. Deze methode toont effectieve protocollen voor niet-invasieve ziekteprogressie-evaluatie bij dodelijke pathogenen.

Veiligheidsmaatregelen en operationele procedures in een (A) BSL-4 Laboratory: 4. Medical Imaging Procedures

Meer video's verkennen