Name: Vooruitgang in de metabole profilering van driedimensionale hersentumorsferoïden voor screening op geneesmiddelen (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-09-05T13:40:00.000+00:00
Duration: 6 min 50 s
Description: Leer metabole profilering van 3D glioma-sferoïden met Seahorse-technologie voor het evalueren van geneesmiddelresponsen. Deze methode verbetert de analyse van tumorstofwisseling en weerstandsmechanismen.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<ol><li>Wu, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Glioblastoma+multiforme+%28GBM%29%3A+An+overview+of+current+therapies+and+mechanisms+of+resistance%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmacol+Res%22%5BJournal%5D)">Glioblastoma multiforme (GBM): An overview of current therapies and mechanisms of resistance.</a> Pharmacol Res. 171, 105780(2021).</li>
<li>Crowley, A. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((85th+annual+report+on+medical+education+in+the+United+States.+Executive+summary%5BTitle%5D)+AND+%22Jama%22%5BJournal%5D)">85th annual report on medical education in the United States. Executive summary.</a> Jama. 254 (12), 1553-1554 (1985).</li>
<li>Zhang, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nutritionally+physiological+cell+culture+medium+and+3D+culture+influence+breast+tumor+proteomics+and+anticancer+drug+effectiveness%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmacol+Res%22%5BJournal%5D)">Nutritionally physiological cell culture medium and 3D culture influence breast tumor proteomics and anticancer drug effectiveness.</a> Pharmacol Res. 210, 107519(2024).</li>
<li>Edmondson, R., Broglie, J. J., Adcock, A. F., Yang, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Three-dimensional+cell+culture+systems+and+their+applications+in+drug+discovery+and+cell-based+biosensors%5BTitle%5D)+AND+%22Assay+Drug+Dev+Technol%22%5BJournal%5D)">Three-dimensional cell culture systems and their applications in drug discovery and cell-based biosensors.</a> Assay Drug Dev Technol. 12 (4), 207-218 (2014).</li>
<li>Bahl, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Growing+desmoplastic+three-dimensional+pancreatic+cancer+spheroids+from+coculture%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Growing desmoplastic three-dimensional pancreatic cancer spheroids from coculture.</a> J Vis Exp. 211, e66625(2024).</li>
<li>Faubert, B., Solmonson, A., Deberardinis, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Metabolic+reprogramming+and+cancer+progression%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Metabolic reprogramming and cancer progression.</a> Science. 368 (6487), eaaw5473(2020).</li>
<li>Baksh, S. C., Finley, L. W. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Metabolic+diversity+drives+cancer+cell+invasion%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Metabolic diversity drives cancer cell invasion.</a> Nature. 605 (7911), 627-628 (2022).</li>
<li>Yoshida, G. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Metabolic+reprogramming%3A+The+emerging+concept+and+associated+therapeutic+strategies%5BTitle%5D)+AND+%22J+Exp+Clin+Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">Metabolic reprogramming: The emerging concept and associated therapeutic strategies.</a> J Exp Clin Cancer Res. 34, 111(2015).</li>
<li>Plitzko, B., Loesgen, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Measurement+of+oxygen+consumption+rate+%28OCR%29+and+extracellular+acidification+rate+%28ECAR%29+in+culture+cells+for+assessment+of+the+energy+metabolism%5BTitle%5D)+AND+%22Bio+Protoc%22%5BJournal%5D)">Measurement of oxygen consumption rate (OCR) and extracellular acidification rate (ECAR) in culture cells for assessment of the energy metabolism.</a> Bio Protoc. 8 (10), e2850(2018).</li>
<li>Hong, X., Muñoz-Cánoves, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Measuring+oxygen+consumption+rate+%28OCR%29+and+extracellular+acidification+rate+%28ECAR%29+in+muscle+stem+cells+using+a+Seahorse+analyzer%3A+Applicability+for+aging+studies%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">Measuring oxygen consumption rate (OCR) and extracellular acidification rate (ECAR) in muscle stem cells using a Seahorse analyzer: Applicability for aging studies.</a> Methods Mol Biol. 2640, 73-88 (2023).</li>
<li>Yoo, I., Ahn, I., Lee, J., Lee, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Extracellular+flux+assay+%28Seahorse+assay%29%3A+Diverse+applications+in+metabolic+research+across+biological+disciplines%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Cells%22%5BJournal%5D)">Extracellular flux assay (Seahorse assay): Diverse applications in metabolic research across biological disciplines.</a> Mol Cells. 47 (8), 100095(2024).</li>
<li>Kapałczyńska, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((2D+and+3D+cell+cultures+-+a+comparison+of+different+types+of+cancer+cell+cultures%5BTitle%5D)+AND+%22Arch+Med+Sci%22%5BJournal%5D)">2D and 3D cell cultures - a comparison of different types of cancer cell cultures.</a> Arch Med Sci. 14 (4), 910-919 (2018).</li>
<li>Rybkowska, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+metabolic+changes+between+monolayer+%282D%29+and+three-dimensional+%283D%29+culture+conditions+in+human+mesenchymal+stem%2Fstromal+cells+derived+from+adipose+tissue%5BTitle%5D)+AND+%22Cells%22%5BJournal%5D)">The metabolic changes between monolayer (2D) and three-dimensional (3D) culture conditions in human mesenchymal stem/stromal cells derived from adipose tissue.</a> Cells. 12 (1), 178(2023).</li>
<li>Białkowska, K., Komorowski, P., Bryszewska, M., Miłowska, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spheroids+as+a+type+of+three-dimensional+cell+cultures-examples+of+methods+of+preparation+and+the+most+important+application%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Mol+Sci%22%5BJournal%5D)">Spheroids as a type of three-dimensional cell cultures-examples of methods of preparation and the most important application.</a> Int J Mol Sci. 21 (17), 6225(2020).</li>
<li>Pinto, B., Henriques, A. C., Silva, P. M. A., Bousbaa, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Three-dimensional+spheroids+as+in+vitro+preclinical+models+for+cancer+research%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmaceutics%22%5BJournal%5D)">Three-dimensional spheroids as in vitro preclinical models for cancer research.</a> Pharmaceutics. 12 (12), 1186(2020).</li>
<li>Juarez-Moreno, K., Chávez-García, D., Hirata, G., Vazquez-Duhalt, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Monolayer+%282D%29+or+spheroids+%283D%29+cell+cultures+for+nanotoxicological+studies%3F+Comparison+of+cytotoxicity+and+cell+internalization+of+nanoparticles%5BTitle%5D)+AND+%22Toxicol+In+Vitro%22%5BJournal%5D)">Monolayer (2D) or spheroids (3D) cell cultures for nanotoxicological studies? Comparison of cytotoxicity and cell internalization of nanoparticles.</a> Toxicol In Vitro. 85, 105461(2022).</li>
<li>Renner, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+fully+automated+high-throughput+workflow+for+3D-based+chemical+screening+in+human+midbrain+organoids%5BTitle%5D)+AND+%22Elife%22%5BJournal%5D)">A fully automated high-throughput workflow for 3D-based chemical screening in human midbrain organoids.</a> Elife. 9, e52904(2020).</li>
<li>Beaufort, I. N., et al. Author commentary on Ilse N. Beaufort et al. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aBeaufort%2C+IN+%22Endoscopy%22">Endoscopy</a>. 56 (5), v6(2024).</li>
<li>Liu, D., Chen, S., Win Naing, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+review+of+manufacturing+capabilities+of+cell+spheroid+generation+technologies+and+future+development%5BTitle%5D)+AND+%22Biotechnol+Bioeng%22%5BJournal%5D)">A review of manufacturing capabilities of cell spheroid generation technologies and future development.</a> Biotechnol Bioeng. 118 (2), 542-554 (2021).</li>
<li>Trettner, K. J., Hsieh, J., Xiao, W., Lee, J. S. H., Armani, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nondestructive%2C+quantitative+viability+analysis+of+3D+tissue+cultures+using+machine+learning+image+segmentation%5BTitle%5D)+AND+%22APL+Bioeng%22%5BJournal%5D)">Nondestructive, quantitative viability analysis of 3D tissue cultures using machine learning image segmentation.</a> APL Bioeng. 8 (1), 016121(2024).</li>
<li>Dominijanni, A. J., Devarasetty, M., Forsythe, S. D., Votanopoulos, K. I., Soker, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cell+viability+assays+in+three-dimensional+hydrogels%3A+A+comparative+study+of+accuracy%5BTitle%5D)+AND+%22Tissue+Eng+Part+C+Methods%22%5BJournal%5D)">Cell viability assays in three-dimensional hydrogels: A comparative study of accuracy.</a> Tissue Eng Part C Methods. 27 (7), 401-410 (2021).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>10 cm schaal</td><td>Corning</td><td>430167</td><td></td></tr><tr><td>15 mL centrifugeerbuisje</td><td>Corning</td><td>430791</td><td></td></tr><tr><td>50 mL centrifugeerbuisje</td><td>Corning</td><td>430828</td><td></td></tr><tr><td>Calcein, AM</td><td>Invitrogen</td><td>C1430</td><td></td></tr><tr><td>Countess 3</td><td>Thermo Fisher</td><td></td><td>Automatische celteller</td></tr><tr><td>Fetaal bovien serum</td><td>Gibco</td><td>A5669701</td><td></td></tr><tr><td>Harmony 5.2</td><td>PerkinElmer</td><td></td><td>Beeldvormingssoftware</td></tr><tr><td>Hoechst 33342</td><td>Solarbio</td><td>C0031</td><td></td></tr><tr><td>MEM EBSS Medium</td><td>HyClone</td><td>SH30024.01</td><td></td></tr><tr><td>Operetta CLS</td><td>PerkinElmer</td><td></td><td>High-content beeldanalysesysteem</td></tr><tr><td>PBS</td><td>HyClone</td><td>SH30256.01</td><td></td></tr><tr><td>Poly-D Lysine hydrobromide</td><td>Sigma&nbsp;</td><td>P7280</td><td></td></tr><tr><td>Rond-bodem ultra-lage hechting 96-well platen</td><td>Corning</td><td>4515</td><td></td></tr><tr><td>Seahorse Wave Desktop software</td><td>Agilent</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Seahorse XFe96</td><td>Agilent</td><td></td><td>Extracorporaal metabolisch testapparaat</td></tr><tr><td>Sorvall ST8R</td><td>Thermo Fisher</td><td></td><td>Centrifuge</td></tr><tr><td>TRYPSIN 0.25% EDTA</td><td>Gibco</td><td>25200072</td><td></td></tr><tr><td>U87MG cel lijn&nbsp;</td><td>National Infrastructure of Cell Resource</td><td></td><td></td></tr><tr><td>XF 1.0 M Glucose Oplossing, 50 mL</td><td>Agilent</td><td>103577-100</td><td></td></tr><tr><td>XF 100 mM Pyruvaat Oplossing, 50 mL</td><td>Agilent</td><td>103578-100</td><td></td></tr><tr><td>XF 200 mM Glutamine Oplossing, 50 mL</td><td>Agilent</td><td>103579-100</td><td></td></tr><tr><td>XF Calibrant Oplossing 500 mL&nbsp;</td><td>Agilent</td><td>100840-000</td><td></td></tr><tr><td>XF Cell Mito Stress Test Kit</td><td>Agilent</td><td>103015-100</td><td></td></tr><tr><td>XF DMEM Medium, pH 7.4, 500 mL</td><td>Agilent</td><td>103575-100</td><td></td></tr><tr><td>XFe96/XF Pro Fluxpak-Detectie Sonde Array</td><td>Agilent</td><td>103792-100</td><td></td></tr><tr><td>XFe96/XF Pro Fluxpak-Metabolische Assay Platen</td><td>Agilent</td><td>103792-100</td><td></td></tr></tbody></table>

vooruitgang in de metabole profilering van driedimensionale hersentumorsferoïden voor screening op geneesmiddelen

Advancements in the Metabolic Profiling of Three-Dimensional Brain Tumor Spheroids for Drug Screening

Vooruitgang in de metabole profilering van driedimensionale hersentumorsferoïden voor screening op geneesmiddelen

Brain tumors, especially gliomas, are challenging to treat because of their aggressive nature, complex tumor microenvironment, and resistance to ...

advancements-metabolic-profiling-three-dimensional-brain-tumor

Research

JoVE Journal

Cancer Research

Kankeronderzoek

Invasie van omliggende normale weefsels is een typerend kenmerk van kwaadaardige tumoren. We bieden hier een eenvoudige, semi-geautomatiseerde microplaattest van invasie in een natuurlijke 3D biomatrix die met een aantal modellen van gevorderde menselijke kankers is geëxemplifeerd.

Driedimensionale (3D) Tumor Spheroid Invasion Assay

Van patiënten afgeleide xenografts van glioblastoma multiforme kunnen worden geminiaturiseerd tot levende microtumoren met behulp van een 3D-menselijke biogel-kweeksysteem. Deze in vivo-achtige 3D-tumortest is geschikt voor het testen van de reactie op geneesmiddelen en moleculair profileren, inclusief kinoomanalyse.

Genereren van Microtumors Met behulp van 3D Human Biogel Cultuur System en Patient afgeleide glioblastoma Cellen voor Kinomic Profiling and Drug Response Testen

Hier, wordt een methode beschreven voor de bereiding van 3-dimensionale (3D) sferoïde co cultuur van pancreatic kankercellen en fibroblasten, gevolgd door meting van metabolische functies met behulp van een extracellulaire flux-analyzer.

Voorbereiding en metabole kwantitatieve analyse van 3-dimensionale sferoïde co culturen van Pancreatic kankercellen en fibroblasten

Over een breed scala van indicaties van de ziekte, meer fysiologisch relevante modellen worden ontwikkeld en uitgevoerd in drug discovery-programma's. Het nieuwe modelsysteem hier beschreven demonstreert hoe driedimensionale tumor spheroïden kunnen worden gekweekt en vertoond in een high-throughput 1536-well plaat-gebaseerd systeem om te zoeken naar nieuwe oncologie drugs.

Generatie van High-Throughput driedimensionale Tumor spheroïden voor Drug Screening

Optische coherentie tomografie (OCT), een driedimensionale imaging technologie, werd gebruikt om te controleren en te karakteriseren de kinetiek van de groei van meercellige tumor spheroïden. Precieze volumetrische kwantificering van tumor spheroïden met behulp van een voxel tellen aanpak, en label-vrije dood weefsel detectie in de spheroïden op basis van intrinsieke optische demping daarentegen werden gedemonstreerd.

Longitudinale morfologische en fysiologische Monitoring van driedimensionale Tumor spheroïden met behulp van optische coherentie tomografie

De effecten van migraine remmers op glioom kanker Celmigratie in driedimensionale (3D) invasie testen met behulp van een histon deacetylase (HDAC) inhibitor worden gekenmerkt door een hoge resolutie confocale microscopie.

Karakterisering van de effecten van migraine remmers op de invasie van 3D-tumor Spheroid door confocale microscopie met hoge resolutie

Hier beschrijven we een gebruiksvriendelijke invasietest voor glioblastoom. Deze test is geschikt voor glioblastoom stamcellen-achtige cellen. Een Fiji macro voor eenvoudige kwantificering van invasie, migratie en proliferatie wordt ook beschreven.

Een 3D Spheroid Model voor Glioblastoom

Deze protocollen zullen gebruikers helpen bij het onderzoeken van mitochondriaal energiemetabolisme in 3D-kankercellijn-afgeleide sferoïden met behulp van Seahorse extracellulaire fluxanalyse.

Onderzoek naar mitochondriaal energiemetabolisme van enkelvoudige 3D-microtissue-sferoïden met behulp van extracellulaire fluxanalyse

Het huidige protocol beschrijft het genereren van 3D-tumorcultuurmodellen van primaire kankercellen en het evalueren van hun gevoeligheid voor geneesmiddelen met behulp van cel-levensvatbaarheidstests en microscopische onderzoeken.

Het vaststellen van 3-dimensionale sferoïden uit van de patiënt afgeleide tumormonsters en het evalueren van hun gevoeligheid voor geneesmiddelen

Dit artikel demonstreert een gestandaardiseerde methode voor het construeren van driedimensionale tumorsferoïden. Een strategie voor sferoïde observatie en beeldgebaseerde deep-learning analyse met behulp van een geautomatiseerd beeldvormingssysteem wordt ook beschreven.

Generatie van 3D-tumorsferoïden voor geneesmiddelenevaluatiestudies

Leer metabole profilering van 3D glioma-sferoïden met Seahorse-technologie voor het evalueren van geneesmiddelresponsen. Deze methode verbetert de analyse van tumorstofwisseling en weerstandsmechanismen.

Vooruitgang in de metabole profilering van driedimensionale hersentumorsferoïden voor screening op geneesmiddelen

Meer video's verkennen