Pobieranie i pobieranie próbek wody morskiej

Część 1: Zbieranie wody

1. Głębokości są przypisane do każdego odlewu.
2. Określa się głębokość, z której należy pobrać próbki, oraz całkowitą objętość, która ma zostać pobrana dla bieżącego odlewu.
3. Upewnia się, że butelki Go-Flo i Niskin są otwarte, a ich zawory i kurki są zamknięte.
4. CTD jest ładowany na dno linii i opuszczany do wody.
5. Butelka o najgłębszej głębokości, z której pobierana jest próbka w odlewie jako pierwsza, jest ładowana na linię po CTD; upewnia się, że żyłka jest prawidłowo zamontowana w uchwycie, a są dokręcone.
6. Do każdej butelki (z wyjątkiem najgłębszej) przed opuszczeniem dołączany jest komunikator.
7. Lina jest obniżana na odległość między pierwszą głębokością a następną, a następnie ładowana jest kolejna butelka. Należy zauważyć, że na głębokościach, na których zbiera się 20 litrów do filtracji, w sumie 2 butelki 12 litrów są ładowane kolejno w odległości około 75 m od siebie.
8. Gdy wszystkie butelki znajdą się na linii, linka jest opuszczana na żądaną głębokość i mogą upłynąć 2 minuty.
9. Wysyłany jest posłaniec i mija kilka minut, aby upewnić się, że wszystkie butelki się zamknęły.
10. Żyłka jest zwijana, a butelki są rozładowywane, gdy pojawiają się na stojakach.
11. W przypadku głębokości, które wymagają 20 litrów próbek DNA i RNA, pobiera się dwie butelki Niskin. Jedna butelka służy do pobierania próbek parametrów chemicznych (patrz poniżej), podczas gdy druga jest spuszczana do gąsiora. RNA jest pobierane natychmiast z drugiego Nickina. Pozostała część pierwszego jest również odsączana do gąsiora, aby uzyskać ostateczną objętość ~20L. W przypadku próbek o niskiej rozdzielczości tylko 1 litr wody jest odłożony do filtracji w sterylnych butelkach Nalgene.

Część 2: Pobieranie próbek gazu

1. Jeśli potrzebne są próbki tlenu, są one pobierane w pierwszej kolejności.
2. Kawałek cienkiej rurki jest przymocowany do króćca Niskin/Go-Flo, a drugi koniec rurki umieszcza się w szklanych butelkach z serum.
3. Butelkę z serum przepłukuje się 3 razy próbką wody i napełnia do przepełnienia, tak aby nie było pęcherzyków powietrza.
4. 50 μl chlorku rtęci (HgCl₂) dodaje się do butelki surowicy w taki sposób, aby nie wprowadzać pęcherzyków powietrza do próbki.
5. Butelka jest zamykana gumowym korkiem i zaciskana aluminiową nakrętką, a następnie przechowywana na lodzie w chłodziarce.

Część 3: Pobieranie próbek składników odżywczych

1. Strzykawkę o pojemności 60 ml przepłukuje się próbką wody, następnie dołącza się (0,2 μm) w linii i przepycha się trochę wody przez acrodisc.
2. Butelkę z polietylenu przepłukuje się 3 razy ~10 ml przefiltrowanej wody (podczas płukania należy wstrząsnąć butelką).
3. Przefiltrowaną próbkę wody dodaje się do butelek wypełnionych w około 3/4 wysokości.
4. Próbka jest przechowywana na lodzie w chłodnicy.

Część 4: Pobieranie próbek amoniaku

1. Probówki z próbkami przepłukuje się próbką wody.
2. Probówki z próbkami są całkowicie wypełnione próbką wody.
3. 5 ml próbki wody pobiera się za pomocą pipety o pojemności 10 ml; resztę wody z probówki wylewa się, a 5 ml z końcówki pipety wkłada się do probówki z próbką.
4. 7,5 ml odczynnika roboczego amonu dodaje się do każdej probówki po pobraniu próbek ze wszystkich głębokości.

Część 5: Pobieranie próbek do liczenia komórek

1. Wstępnie oznakowana probówka Falcon o pojemności 50 ml zawierająca 5,4 ml 37% formaldehydu jest napełniana do góry w celu uzyskania końcowego stężenia 4%. Należy uważać, aby się nie rozlać.

Część 6: Pobieranie próbek do pomiarów siarkowodoru

1. Wstępnie oznakowana probówka Falcon o pojemności 50 ml zawierająca 20% octanu (Zn(O₂CCH₃)₂) jest napełniana do góry. Należy uważać, aby się nie rozlać.

Część 7: Mała ilość zbioru do koncentracji biomasy

1. Butelki o pojemności 1 litra są napełniane do góry.

Część 8: Duża ilość zbierania biomasy do koncentracji biomasy

1. Napełniane są 20-litrowe balony.

Część 9: Reprezentatywne wyniki

Końcowy wynik pobierania próbek wody morskiej daje około 12 próbek rozpuszczonego tlenu, 32-48 próbek gazów, 16 próbek składników odżywczych, 32 próbki amonu, 16 próbek siarkowodoru, 16 próbek do zliczania komórek, 6 20-litrowych balonów, 16 1-litrowych butelek i 4 filtry Sterivex 0,22μm zawierające biomasę mikrobiologiczną zakonserwowaną później RNA.

Autorzy nie mają nic do ujawnienia.