Śledzenie swobodnie chodzących much: metoda oceny lokomocji u Drosophila

Streszczenie

Źródło: Sun, M. and Chen, L. L. Nowatorska metoda modelowania przewlekłej encefalopatii pourazowej u Drosophila. J. Vis. Exp. (2017).

Ten film opisuje, jak śledzić swobodnie chodzące muchy, aby ocenić ich ogólną zdolność poruszania się. Prezentowany protokół demonstruje konfigurację testu i analizę danych za pomocą oprogramowania do śledzenia wideo.

Protokół

Ten protokół jest fragmentem artykułu Sun and Chen, A Novel Method to Model Chronic Traumatic Encephalopathy in Drosophila, J. Vis. Exp. (2017).

1. Śledzenie ruchu wspomagane wideo

1. Wypełnij szalkę Petriego o średnicy 6 cm przezroczystym elastomerem silikonowym, aby uzyskać arenę śledzenia. Pozostaw 3 mm odstępu między silikonem a pokrywką naczynia, aby muchy mogły swobodnie chodzić, ale nie latać.
2. Za każdym razem znieczulaj cztery muchy z grupy pozorowanej lub leczonej i umieszczaj je na arenie. Pozostaw muchy w temperaturze 22 °C na 1 godzinę.
3. Umieść kamerę z urządzeniem sprzężonym z ładunkiem (CCD) nad arenami i nagrywaj przez 5 minut.
4. Analizuj zarejestrowane trajektorie ruchu za pomocą oprogramowania Ctrax (dostępnego bezpłatnie w Caltech). Eksportuj śledzone dane w formacie zgodnym z językiem programowania (np. Matlab) i analizuj dane na podstawie odległości przebytej na klatkę. Obliczyć średnią odległość przebytą pieszo dla każdej muchy i połączyć ją ze wszystkimi innymi zarejestrowanymi muchami/grupą, aby uzyskać średnią skumulowaną odległość przebytą przez populację plików w tej samej grupie.

Materiały

Lista materiałów użytych w tym artykule

Nazwa	Firma	Numer katalogowy	Komentarze
60 mm szalki Petriego	Fisher Naukowy	FB0875713A	Używany jako areny śledzące
Regulator przepływu	Genesee Scientific	59-122WC
Drobny pędzel	Genesee Scientific	59-204 Rozdział 19-204
Poduszka muchowa	Genesee Scientific	59-114
Sylgard Elastomer silikonowy	Dow Corning	4019862
Kamera CCD	Firmy Microsoft	Dysk HD-5000
Śledzenie much spacerowych Ctrax	Caltech	Ctrax 0.2.11
Przybornik do przetwarzania obrazów MATLAB	MATLAB (MATLAB)	Czynnik chłodniczy R2015b

powiedział: