Przeszczep mięśni jako chirurgiczna strategia przywracania przepływu krwi do mózgu myszy po udarze

Streszczenie

Źródło: Paro, M. R., et.al. Model leczenia encefalomiozyangiozy po udarze wywołanym niedrożnością środkowej tętnicy mózgowej u myszy. J. Vis. Exp. (2022).

Ten film przedstawia zabieg chirurgiczny polegający na przeszczepieniu unaczynionego mięśnia na powierzchnię mózgu po przejściowym zgryzie tętnicy środkowej mózgu. Przeszczep wspomaga tworzenie nowych naczyń krwionośnych w obszarze niedokrwiennym, poprawiając zaopatrzenie w tlen i składniki odżywcze. Z biegiem czasu zintegrowany mięsień wspomaga przeżycie neuronów i pomaga w powrocie do zdrowia po udarze.

Protokół

Wszystkie procedury z udziałem modeli zwierzęcych zostały zweryfikowane przez lokalny instytucjonalny komitet ds. opieki nad zwierzętami i weterynaryjną komisję rewizyjną JoVE.

1. Operacja encefalomiozyangiozy (EMS)
   1. Po 60 minutach niedrożności środkowej tętnicy mózgowej (MCAo), losowo przydzielaj myszy do grup tylko MCAo lub MCAo + EMS. Wykonaj EMS 4 godziny po MCAo (grupa MCAo + EMS) lub pozorowanej operacji dla wybranych eksperymentów (grupa tylko EMS). Zmień na nową parę sterylnych rękawiczek chirurgicznych przed operacją.
      UWAGA: Myszy wyzdrowiały ze znieczulenia po 60 minutach MCAo i zostały ponownie znieczulone przed operacją EMS.
   2. W przypadku grup, które otrzymują EMS (MCAo + EMS lub grupy tylko EMS), wykonaj 10-15 mm nacięcie skóry nożyczkami, rozciągające się od 1-2 mm rostral do prawego ucha do 1-2 mm ogonowo do prawego oka.
      UWAGA: Użyto sterylnych nożyczek, aby zapobiec przypadkowemu uszkodzeniu mięśni skroniowych pod spodem.
   3. Cofnij płaty skóry za pomocą zacisków i wizualnie zidentyfikuj mięsień skroniowy i czaszkę.
   4. Tępo wypreparuj mięsień skroniowy z dala od czaszki za pomocą nożyczek z techniką rozprowadzania. Wykonaj miotomię 2-3 mm skierowaną brzusznie wzdłuż ogonowej granicy mięśnia, aby ułatwić odbicie brzuszne.
   5. Wykonaj kraniotomię o średnicy ~5 mm w czaszce pod odbitym mięśniem skroniowym za pomocą mikrowiertła.
   6. Usuń oponę twardą za pomocą pęsety, aby odsłonić powierzchnię mózgu w mózgu. Zachowaj szczególną ostrożność, aby uniknąć przypadkowego uszkodzenia mózgu.
   7. Zszyj grzbietową granicę mięśnia skroniowego z tkanką podskórną płata skóry grzbietowej za pomocą włókien monokrylnych 6-0, tak aby przylegała do odsłoniętej kory mózgowej.
   8. Zamknij nacięcie skóry szwem monofilamentowym 6-0. Umieść mysz z powrotem w klatce i monitoruj, aż dojdzie do znieczulenia. Umieść mysz z powrotem w jej obudowie.

Materiały

Lista materiałów użytych w tym artykule

Nazwa	Firma	Numer katalogowy	Komentarze
6-0 szew monokrylowy	Ethilon	697G
70% etanol do dezynfekcji powierzchni operacyjnej	Walgreen
Bupivacaine 0,25% roztwór	Midwest Vet
Zaciski do retrakcji tkanek	Nici Roboz
Doccal z powłoką nylonową	Doccal corporation Sharon MA	602145PK10Re
Elektryczna poduszka grzewcza do powierzchni
Znieczulenie izofluranem	Piramal Critical Care Inc
Aparat do dostarczania izofluranu	- B6Surgivet (Isotech 4)
Mikro wiertarka	Aparat
Pęseta do mikropreparacji, zakrzywiona x2	Piramal Critical Care Inc
Panel angiogenezy myszy arrat	R& D biotech	ARY015
Sterownik igłowy	Ethilon
Operacyjny mikroskop	Olympus
Powierzchnia operacyjna	Olympus
Nożyczki chirurgiczne	Roboz

operacyjnejHarvarda