Stymulacja o wysokiej częstotliwości w celu zwiększenia aktywacji neuronów i neurogenezy w zakręcie zębatym myszy

Streszczenie

Źródło: Zhao, Z. i wsp. Inwazyjna metoda aktywacji zakrętu zębatego myszy poprzez stymulację o wysokiej częstotliwości. J. Vis. Exp. (2018)

Ten film demonstruje protokół dostarczania głębokiej stymulacji mózgu o wysokiej częstotliwości do zakrętu zębatego hipokampa myszy, szczegółowo opisując jego wpływ na aktywację neuronów, plastyczność synaptyczną i neurogenezę.

Protokół

Wszystkie procedury z udziałem modeli zwierzęcych zostały zweryfikowane przez lokalną instytucjonalną komisję ds. opieki nad zwierzętami oraz weterynaryjną komisję rewizyjną JoVE.

1. High-Frequency Stimulation Delivery
   1. Podłącz elektrodę wszczepioną w mózg myszy do programowalnego stymulatora za pomocą przewodów. Skonfiguruj interfejs oprogramowania, jak pokazano na rysunku 1. Ustaw parametry stymulacji wysokiej częstotliwości (HFS) jako 6 serii po 6 ciągów po 6 impulsów przy 400 Hz (rysunek 2B, 100 ms między ciągami, 20 s między seriami). Ustaw intensywność stymulacji na 200 μA.
   2. Dostarczaj HFS przez żądany okres czasu zgodnie z ustawieniami. Dostarczaj stymulację 2x dziennie o 8:00 i o 20:00
   .
   3. W przypadku grupy kontrolnej wszczepia się elektrody myszom i nie wykonuje stymulacji.
   4. W przypadku barwienia c-fos należy ostro stymulować myszy eksperymentalne (2 razy dziennie). W celu znakowania bromodeoksyurydyny (BrdU) podziel myszy eksperymentalne na grupę ostrej stymulacji (stosowaną 2 razy dziennie) i grupę przewlekłej stymulacji (stosowaną 10 razy w ciągu 5 dni, 2 razy dziennie). W trakcie stymulacji upewnij się, że mysz nie śpi. Pamiętaj, aby upewnić się, że przewody nie są skręcone.
      UWAGA: W ostatnim dniu zabiegu myszy w grupie ostrej stymulacji były stymulowane jednocześnie.
   5. Po zakończeniu stymulacji ostrożnie odłącz sworzeń elektrody od uchwytu elektrody i złącza systemu nagrywającego.

Wyniki

Rysunek1. Interfejs i parametry multistymulatora. Stymulator został podłączony do przetwornika cyfrowo-analogowego i aktywowany autorskim oprogramowaniem. Rodzaj bodźca stymulacji wysokiej częstotliwości (HFS) był jednofazowy....

Materiały

Lista materiałów użytych w tym artykule

Nazwa	Firma	Numer katalogowy	Komentarze
Stymulator	Systemy A-M	Model 3800	MultiStim 8-kanałowy programowalny stymulator
Digidata 1550 Digitizer	Urządzenia molekularne	AXON 1550	Akwizycja danych o wysokiej rozdzielczości