Przygotowanie beztlenowej kultury osadu w warunkach beztlenowych

Streszczenie

Źródło: Wagner, A. O. i wsp., Pożywka przygotowana do hodowli mikroorganizmów w warunkach ściśle beztlenowych/beztlenowych. J . Vis. Exp. (2019 rok)

Ten film pokazuje przygotowanie i inokulację kultur beztlenowych przy użyciu osadu beztlenowego w ściśle kontrolowanych, odtlenionych warunkach.

Protokół

Inokulacja pożywki

1. Przygotować inokulum z beztlenowej komory fermentacyjnej.
   1. Dodać 400 ml wody destylowanej do kolby i doprowadzić do wrzenia.
   2. Schłodzić (< 30 °C), stale przepłukując przestrzeń nad głową roztworem N₂.
   3. Dodać około 100 g osadu pochodzącego z beztlenowej komory fermentacyjnej.
      NUTA: Unikać nadmiernego kontaktu szlamu z tlenem.
   4. Zanotować dokładną masę dodanego osadu w celu dokładnego określenia rozcieńczenia.
   5. Zamienić przestrzeń nad kolbą na_N2 i zamknąć ją przegrodą z kauczuku butylowego.
   6. Potrząsać kolbą przez 30 minut przy prędkości 120 obr./min.
2. Za pomocą strzykawki + kaniuli usunąć 5 ml inokulum i wstrzyknąć do przygotowanych kolb surowicy.

Materiały

Lista materiałów użytych w tym artykule

Nazwa	Firma	Numer katalogowy	Komentarze
Kolby hodowlane (120 ml, N20)	Ochs, Niemcy	102046
Przegrody z kauczuku butylowego (N20)	Ochs, Niemcy	102049
Zaślepki aluminiowe (N20)	Ochs, Niemcy	102050
Gaz N₂	Messer, Austria		Czystość 5.0
Strzykawki + kaniule	rozmaity
Zaciskarka	Ochs, Niemcy	102051
Odtłuszczanie	Ochs, Niemcy	102052
GC2010	Shimadzu powiedział: