Ten film pokazuje przygotowanie kultury bakteryjnej do produkcji bakteriofagów. Obejmuje etapy zaszczepienia bakterii glebowej w kolbie z przegrodami, promowanie równomiernego wzrostu poprzez napowietrzanie i potrząsanie oraz monitorowanie gęstości komórek za pomocą pomiarów gęstości optycznej. Gdy hodowla osiągnie optymalną fazę wzrostu, jest gotowa do efektywnej produkcji bakteriofagów.
Subskrypcja JoVE jest wymagana do oglądania tego materiału. Zaloguj się lub rozpocznij bezpłatny okres próbny.
Artykuł metodologiczny
Przygotowanie kultury bakteryjnej glebowej pod kątem infekcji bakteriofagami
472 wyświetleń
⸱
31 marca 2026
W tym artykule
Streszczenie
Protokół
Przygotowanie komórek Arthrobacter do izolacji fagów
- Kultura Arthrobacter sp. Kolonie KY3901 przebiegały na płycie agarowej Luria Bertani (LB), inkubowane w temperaturze 30 °C przez 2-3 dni. Wybierz kolonię i użyj sterylnej pętli, aby dodać ją do 250 ml bulionu LB w kolbie z przegrodą hodowlą, a następnie inkubuj w inkubatorze potrząsającym przy 225 obr./min w 30 °C.
- Pozwól na około 24 godziny wzrostu, aby uzyskać komórki w późnej fazie wykładniczej/wczesnej stacjonarnej do eksperymentów z infekcją fagami. Uważnie monitoruj stan wzrostu bakterii, aby zapobiec wejściu komórek w środkowy lub późny stan stacjonarny.
UWAGA: Wzrost komórek powinien składać się z gęstości optycznej OD₆₀₀₀ w zakresie 0,5-0,7 dla procedur/kroków izolacji i oczyszczania fagów.
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Materiały
| Nazwa | Firma | Numer katalogowy | Komentarze |
|---|---|---|---|
| LB Bulion w proszku | Fisher | BP9722-2 | |
| Granulowany agar | Fisher | BP1423-2 | |
| Lampy Eppendorfa | Fisher | 05-408-129 | |
| 5 ml pipety indywidualne | Fisher | 13-678-11D | |
| Stożkowe rurki 50 ml | Fisher | 76002844 | |
| Stożkowe rurki o pojemności 15 ml | Fisher | 76002845 | |
| 10 ml pipet indywidualnie | Fisher | 13-676-10J | |
| 25 ml pipety indywidualne | Fisher | 13-676-10K |
