Pobieranie próbek tkanki raka prostaty do biobankowania: ukierunkowana technika usuwania stempli biopsyjnych ze świeżej tkanki nowotworowej pod kontrolą MRI

Wszystkie procedury z udziałem ludzi zostały przeprowadzone zgodnie z instytucjonalnymi, krajowymi i międzynarodowymi wytycznymi dotyczącymi dobrobytu ludzi i zostały sprawdzone przez lokalną komisję rewizyjną instytucji.

1. Aparat do krojenia prostaty

1. Kup aparat do krojenia prostaty (tabela materiałów). Alternatywnie wydrukuj uchwyt ostrza za pomocą drukarki 3D.

2. Celowanie w nowotwór

1. Przejrzyj uwagi kliniczne, aby zidentyfikować zmianę wskaźnikową wskazaną przez biopsję diagnostyczną, np. lewy tylny.
2. Przejrzyj obrazy MRI, aby zmierzyć lokalizację powyższego guza.
   1. Znajdź sekwencję, w której guz jest najbardziej widoczny w płaszczyźnie osiowej, np. T2-zależny
   .
   2. Przewiń obrazy osiowe, aby znaleźć obraz, na którym guz jest największy i wydrukuj obraz w celach informacyjnych.
   3. Na odpowiednim obrazie koronalnym zmierz odległość od podstawy prostaty do wybranej pozycji osiowej oraz całą długość prostaty od wierzchołka do podstawy (mm) i wydrukuj w celach informacyjnych.

3. Kolekcja prostaty

1. Sprawdź notatki pacjenta, aby upewnić się, że uzyskano odpowiednią świadomą zgodę na tę procedurę i wszelkie dalsze wnioski badawcze.
2. Po radykalnej prostatektomii zbierz prostatę do suchego garnka. Upewnij się, że do prostaty nie została dodana formalina ani inny utrwalacz.
3. Przenieść do odpowiedniego sterylnego miejsca w celu pobrania próbek, np. okapu z przepływem laminarnym w laboratorium patomorfologicznym.
4. Należy jak najszybciej przystąpić do pobierania próbek, jeżeli wymagana jest świeża tkanka.
   UWAGA: W przypadku niektórych zastosowań (np. oceny DNA, które nie powinno ulegać degradacji tak szybko jak RNA), właściwe może być schłodzić próbkę w lodówce i pobrać próbki następnego dnia.

4. Przygotowanie próbki

1. Przygotuj kaptur z przepływem laminarnym i aparat do krojenia prostaty zgodnie z lokalnymi procedurami odkażania, stosując techniki sterylne. Tutaj spryskaj 70% etanolem i przetrzyj wszystkie powierzchnie. Używaj sterylnych igieł jednorazowego użytku i skalpeli. Użyj ostrzy krajalnicy do trzech razy; Po każdym użyciu umyć w gorącej wodzie z mydłem, a następnie spryskać i przetrzeć 70% etanolem.
2. Zważ prostatę (g) za pomocą standardowej wagi.
3. Tusz na prostacie. Pomaluj lewą stronę niebieskim tuszem, a prawą stronę czarnym tuszem. Pokryj całą kapsułkę i pęcherzyki nasienne tuszem, aby później oznaczyć marginesy chirurgiczne.
   UWAGA: Procedury pisania odręcznego mogą się różnić lokalnie i mogą być odpowiednio modyfikowane.

5. Krojenie prostaty

1. Zmontuj urządzenie do krojenia, wkładając ścianki prostopadle do podstawy stojaka (Rysunek 1A).
2. Umieść prostatę tak, aby podstawa i wierzchołek były skierowane w stronę przeciwległych ścian, tylną stroną do dołu i przednią do góry. Umieść złote szpilki wokół prostaty. W razie potrzeby lekko wepchnij prostatę do środka, aby uzyskać dokładne dopasowanie, które będzie wspierać prostatę podczas krojenia.
3. Zmierz długość prostaty od podstawy do wierzchołka za pomocą linijki i porównaj ją z długością prostaty zmierzoną za pomocą rezonansu magnetycznego. Jeśli prostata się skurczyła, zastosuj doraźną korektę do przewidywanej odległości od podstawy do docelowego przekroju poprzecznego. Na przykład, jeśli pełna długość prostaty na obrazie MRI wynosi 50 mm, ale po zmierzeniu linijką w tym momencie pokazuje, że skurczyła się do 45 mm, zmniejsz przewidywaną pozycję krojenia o 10%.
4. Zmierz od podstawy do żądanego przekroju poprzecznego. Wybierz szpilkę, która znajduje się najbliżej tego pomiaru, aby ją przeciąć.
5. Zakładając rękawice z kolczugi, aby zapobiec obrażeniom, przytrzymaj urządzenie do krojenia (Rysunek 1B), umieść ostrza po obu stronach zidentyfikowanej kołki i użyj przekładki, aby utrzymać ostrza w odległości 5 mm od siebie. Weź plasterek, powoli i stanowczo przesuwając ostrza w dół, do przodu i do tyłu długimi pociągnięciami (Rysunek 1C). Upewnij się, że cały plasterek został oddzielony przed demontażem urządzenia.
6. Usuń ścianki i szpilki i ostrożnie wyjmij plasterek na sterylny arkusz tablicy korkowej za pomocą rękawiczek.

6. Pobieranie próbek tkanek

1. Sprawdź wzrokowo wycinek poprzeczny i porównaj go z osiowym obrazem MRI. W niektórych przypadkach obszar guza może wydawać się jaśniejszy niż otaczająca tkanka.
2. Delikatnie obmacuj poprzeczny plasterek. W niektórych przypadkach guz może wydawać się twardszy niż otaczająca go tkanka.
3. Korzystając z osiowego obrazu MRI jako przewodnika, wybierz jeden lub więcej obszarów do próbkowania.
4. Weź stemple biopsyjne pożądanego obszaru tkanki.
   1. Za pomocą dziurkacza o średnicy 6 mm dociśnij żądany obszar tkanki.
   2. Przekręć stempel do tkanek w miejscu i w dół do korka, aby zapewnić pełną separację i w razie potrzeby użyj ostrego skalpela, aby oddzielić.
   3. Wyjmij stempel i umieść go w rurkach/foremkach w razie potrzeby, wysuwając go za pomocą tłoka.
   4. Powtórz dla dalszych próbek guza i łagodnych w razie potrzeby, z oddzielnymi sterylnymi stemplami biopsyjnymi. Otwory, w których zostały wykonane stemple, namaluj na czerwono.
   5. Zwróć uwagę na lokalizację każdego stempla wraz z wagą prostaty i wszelkimi obserwacjami dotyczącymi koloru/jędrności tkanki.

Rycina 1: Aparat do krojenia prostaty.(A) Ściany są wkładane prostopadle do podstawy, a złote kołki są wkładane w podstawę otaczającą prostatę (prostata nie jest pokazana na zdjęciu). (B) Wymienne równoległe ostrza są włożone do uchwytu ostrza. (C) Ostrza przechodzą między złotymi szpilkami w celu przecięcia 5 mm odcinka prostaty