Rak prostaty

Organoidy pochodzące z nowotworów są rodzajem modelu hodowli komórek 3D, który może zachować patologiczne cechy i specyficzną dla narządu linię komórkową guzów. W przykładowym protokole zobaczymy, jak naukowcy generują organoidy z guza prostaty z genetycznie zmodyfikowanego modelu myszy.

W tym filmie przeprowadzamy test spin-down, aby osadzić organoidy 3D raka prostaty w agarozie. Te osadzone organoidy mogą być wykorzystane do dalszej analizy histopatologicznej w celu zbadania wzrostu i rozwoju raka.

W tym filmie demonstrujemy hodowlę izolowanych komórek nabłonka prostaty myszy przy użyciu techniki hodowli opartej na pierścieniu żelowym matrycy. Takie podejście może dostarczyć uzupełniających informacji na temat zdolności różnicowania komórek nabłonka prostaty do tworzenia struktur gruczołowych 3D w odpowiedzi na manipulację genetyczną lub farmakologiczną.

W tym filmie pokazujemy ekstrakcję lizatów białkowych z organoidów prostaty hodowanych w pierścieniu macierzy błony podstawnej. Analiza wyekstrahowanych frakcji białkowych może pomóc w badaniu ekspresji markerów rodowych w organoidach.

Ten film opisuje technikę barwienia immunofluorescencyjnego nienaruszonych organoidów raka prostaty i ich obrazowania za pomocą mikroskopii konfokalnej z pełnym wierzchołkiem. Technika ta ma na celu ocenę zdolności różnicowania ex vivo podstawnych i świetlnych komórek nabłonka prostaty.

Ten film demonstruje technikę opartą na danych MRI, która pozwala na celowanie w określone regiony zawierające guz w tkance prostaty w celu pobrania próbek. Pobrane próbki z biopsji mogą być przechowywane do celów biobankowania lub wykorzystywane do późniejszej analizy.

W tym filmie pokazujemy izolację komórek raka nabłonka wykazującego ekspresję EpCAM z próbek krwi obwodowej. Technika ta polega na użyciu drutu klasy medycznej funkcjonalizowanego przeciwciałami EpCAM w celu wychwycenia komórek docelowych. Schwytane komórki są następnie ekstrahowane do roztworu buforowego.

Ten film opisuje technikę izolowania pojedynczych komórek z puli komórek docelowych w celu przeprowadzenia dalszej analizy. W tej metodzie mikromanipulator zamontowany w mikroskopie służy do bardzo precyzyjnej izolacji pojedynczej komórki docelowej.

Ten film opisuje technikę uzyskiwania pojedynczej komórki z heterogenicznej populacji komórek za pomocą mikrodysekcji laserowej. Pojedyncza wyizolowana komórka może być wykorzystana do dalszych badań genomicznych lub badań nad rakiem.

Ten film opisuje protokół generowania odpornych na taksany modeli komórkowych raka prostaty. Modele te mogą pomóc w badaniu szlaków zaangażowanych w progresję oporności na docetaksel u pacjentów z rakiem prostaty.

Ten film opisuje metodę oceny oporności na leki chemoterapeutyczne w komórkach raka prostaty za pomocą testu tworzenia kolonii. Test ten może być wykorzystany jako funkcjonalne narzędzie do identyfikacji nowych molekularnych i komórkowych mechanizmów chemooporności w komórkach nowotworowych.

W tym filmie deiminazy deiminazy demonstrujemy indukcję autofagii opartej na deiminazie w komórkach raka prostaty. Co więcej, zaawansowana mikroskopia fluorescencyjna może być wykorzystana do wizualizacji zmian związanych z indukcją autofagii, w tym powstawania i dystrybucji autofagosomów i lizosomów oraz ich fuzji w autolizosomy.

Ten film opisuje technikę ekstrakcji i trawienia białek w celu uzyskania peptydów z tkanki guza prostaty. Peptydy te, po dalszej analizie, mogą pomóc w identyfikacji nowych celów onkoterapii.

W tym filmie demonstrujemy wysokosprawną chromatografię cieczową z odwróconymi fazami do oczyszczania peptydów z mieszaniny strawionych lizatów białkowych. Te oczyszczone peptydy są następnie liofilizowane i przechowywane do dalszych zastosowań. Analiza peptydów może pomóc w zrozumieniu mechaniki związanej z sygnalizacją komórkową i rakiem.

W tym filmie pokazujemy immunologiczne wytrącanie fosfopeptydów z mieszaniny peptydów na podstawie przeciwciał. Wzbogacone fosfopeptydy są zagęszczane próżniowo i przechowywane do dalszej analizy.

Ten film demonstruje wzbogacanie fosforeptydów ekstrahowanych z tkanki guza prostaty za pomocą dwutlenku tytanu. Te wzbogacone fosfopeptydy mogą być wykorzystywane do dalszych zastosowań, takich jak charakterystyka białek, w celu zrozumienia szlaków sygnalizacji komórkowej zaangażowanych w progresję raka prostaty.

W tym filmie opisujemy procedurę sekcji układu moczowo-płciowego lub UGS od męskiego modelu myszy. Ten UGS jest dalej analizowany ex vivo w celu wyizolowania gruczołu krokowego i zbadania jego roli w rozwoju raka prostaty.

Ten film opisuje technikę pobierania pojedynczych płatów z gruczołu krokowego modelu myszy. Poszczególne płaty można następnie wykorzystać do analizy histologicznej i badań nad rakiem.

W tym filmie pokazujemy procedurę podawania komórek raka prostaty do modelu mysiego do wstrzykiwania dogruczołowo prostaty. Ortotopowe modele myszy mogą być wykorzystywane do badania pochodzenia choroby i odpowiedzi na terapie lecznicze w nieinwazyjnym i klinicznie istotnym środowisku.

W tym filmie pokazujemy wszczepianie przeszczepów tkanek raka prostaty pochodzących od człowieka do torebki nerkowej myszy biorcy z obniżoną odpornością. Technika ta może być wykorzystana do oceny progresji guza i opracowania nowych strategii terapeutycznych.

Ten film opisuje metodę edycji określonych genów w komórkach gruczołu krokowego za pomocą systemu dostarczania opartego na adenowirusie. Podejście to pozwala na ortotopową i miejscową zmianę ekspresji genów przy użyciu technologii CRISPR do opracowania nowych mysich modeli raka prostaty.