$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
1. Dzielenie sferoid SBNET
UWAGA: To jest zrobione dla rozszerzenia i dzielenia się z innymi badaczami.
- Za pomocą pipety P1000 mechanicznie rozbić moduł ECM i zassać moduł ECM ze sferoidami SBNET do sterylnej probówki o pojemności 1,5 ml.
- Odwirować przy 1 000 x g w temperaturze 4 °C, usunąć cały supernatant i umieścić probówkę na lodzie.
- Dodaj 2-4 razy objętość nowego ECM do osadu. Zmieszaj nowy moduł ECM ze starymi sferoidami ECM i SBNET, pipetując 10 razy w górę i w dół, unikając powstawania pęcherzyków powietrza.
- Przenieść 5-20 μl mieszaniny sferoid ECM i SBNET na nową płytkę i pozwolić ECM na zestalenie się.
- Przykryj nową pożywką SBNET i przenieś do inkubatora. Wskaźnik odzysku wynosi około 95% do 100%.
- W przypadku wysyłki sferoid SBNET do innego laboratorium, należy przenieść sferoidy SBNET z nowym ECM do kolby T25 i pozwolić ECM na zestalenie się.
- Napełnij kolbę T25 sferoidalnym podłożem SBNET, mocno dokręć nakrętkę i przygotuj paczkę wysyłkową.
- Po otrzymaniu hodowli sferoidalnej SBNET usuń pożywkę hodowlaną i wykonaj kroki od 1.1 do 1.5, aby umieścić sferoidy SBNET z powrotem w hodowli.