Monitorowanie wielosystemowe w modelu królika: metoda oceny parametrów neuro-sercowych i oddechowych w celu zbadania indukowanych doustnymi lekami wyzwalaczy arytmii i napadów padaczkowych

Streszczenie

Źródło: Bosinski, C., et al. Wielosystemowe monitorowanie w celu identyfikacji napadów, arytmii i bezdechu u przytomnych, powściągliwych królików. J. Vis. Exp. (2021).

W tym filmie opisujemy jednoczesne nagrywanie wideo, EEG, EKG i sygnałów oddechowych w modelu królika w odpowiedzi na doustnie podawany lek, aby zrozumieć sekwencję zdarzeń prowadzących do napadu. Model może być wykorzystany do testowania potencjalnych leków pod kątem ich bezpieczeństwa neuro-sercowego.

Protokół

Wszystkie procedury dotyczące modeli zwierzęcych zostały sprawdzone przez lokalny instytucjonalny komitet opieki nad zwierzętami oraz weterynaryjną komisję rewizyjną JoVE.

1. Doustne podawanie leków

1. Ponieważ wiele leków przyjmuje się doustnie, przygotuj doustne związki, mieszając je z musem jabłkowym o jakości spożywczej. Wymieszaj 0,3 mg/kg E-4031 z 3 ml musu jabłkowego i załaduj do 3 ml strzykawki doustnej/irygacyjnej bez igły.
   nuta: W ten sposób można podawać kilka leków, w tym związki testowe, leki, o których wiadomo, że zmieniają czas trwania odstępu QT (moksyfloksacyna lub E-4031) oraz kontrolę ujemną lub nośnik. Niektóre leki nie są dostępne w postaci dożylnej. Ponadto wiele leków jest przepisywanych w postaci doustnej, dlatego podawanie dożylne może mieć mniejsze znaczenie kliniczne.
2. Podnieś górną wargę i wsuń końcówkę strzykawki doustnej w bok pyska królika, który nie jest zasłonięty zębami królika, a następnie wstrzyknij cały lek i mus jabłkowy do ust królika.
3. Kontynuuj zapis wideo EEG-EKG przez 2 godziny, a następnie zwróć zwierzę do jego domowej klatki w celu rutynowej opieki.
4. W dniu eksperymentalnym 2 i 3 podłącz królika do wideo-EEG-EKG, nagraj 10-20 minut wartości wyjściowej, a następnie wstrzyknij ten sam lek i nagrywaj przez 2 godziny.
5. Po 1 tygodniu wymywania wykonaj 10-20 minut wartości wyjściowej, a następnie podawaj każdemu królikowi pojedynczą dawkę placebo przez 3 kolejne dni i zapisuj przez 2 godziny < br / > nuta: Podawanie leków doustnych może być zaprojektowane jako badanie krzyżowe, w którym placebo podaje się w 1. tygodniu, a lek w 2. tygodniu.

Materiały

Lista materiałów użytych w tym artykule

Nazwa	Firma	Numer katalogowy	Komentarze
Sos jabłkowy	Kirkland	897971	Nośnik do podawania leków doustnych
komputer	dolina	Komputer Optiplex 5040	Komputer akwizycyjny
E-4031	Tocris powiedział:	Rok 1808	Środek, o którym wiadomo, że wydłuża odstęp QT
Elektroda EKG	Łącznik rytmiczny	RLSND116-2,5	13 mm wygięte pod kątem 35 stopni (średnica 0,4 mm) podskórne elektrody szpilkowe
Elektroda EEG	Łącznik rytmiczny	RLSP513	5-skrętne proste (0,4 mm średnicy) podskórne elektrody szpilkowe
EEGLAB (2020)	Centrum Neuronauki Obliczeniowej Swartza	Otwarty dostęp	Potrafi wykonywać analizę spektralną EEG
Adapter Ethernet-to-Ethernet	Linksys powiedział:	USB3G16	Adapter do podłączenia aparatu do komputera
LabChart Pro (2019, wersja 8.1.16)	Instrumenty ADInstruments	N/a	Analiza EKG
MATLAB (R2019b, aktualizacja 5)	MathWorks (Prace matematyczne)	N/a	Wymagane do uruchomienia EEGLAB
mikrofon	Stereo Sony	Mikrofon ECM-D570P	Nagrywanie słyszalnych objawów napadów
Natus NeuroWorks	Natus (Natus)	LC101-8	Oprogramowanie do nabywania i recenzowania
Plastikowy organizer / wiązka drutu	12Vwire.com	LM-12-100-BLK	Wiązka przewodów w celu zmniejszenia hałasu
Rura PVC	rodzajowy	N/a	Zapobiega kopaniu tylnymi nogami przez małe króliki i powodowaniu urazów kręgosłupa
Wzmacniacz kwantowy	Natus (Natus)	Numer katalogowy: 13926	Wzmacniacz / digitizer
Wzmacniacz Quantum HeadBox	Natus (Natus)	Numer katalogowy: 22134	64-pinowa skrzynka rozdzielcza
Powściągliwość królika	Plas-Labs	501-TC	Dostępne są krępujące króliki o różnych rozmiarach. 6 "x 18" x 6 " w tym badaniu.
Gumowa podkładka (booster)	rodzajowy	N/a	Podnosi małe króliki w unieruchomieniu, aby zapobiec uciskowi szyi
Klips na ucho SpO2	BRAK	61000	PureSAT/SpO2
Adapter czujnika SpO2	BRAK	Numer katalogowy: 13931	XPOD PureSAT/SpO2
SRG-X120 Kamera PTZ 1080p z wyjściem HDMI, IP i 3G-SDI	Sony	Głośnik SRG-X120	Kamera Impela

powiedział: szt.