Usuwanie błony nictitacyjnej: zabieg chirurgiczny mający na celu usunięcie błony naszywowej z oka królika

Streszczenie

Źródło: Honkanen, R. A., et al. Ustanowienie modelu ciężkiego suchego oka przy użyciu całkowitej dacryoadenektomii u królików. J. Vis. Exp. (2020).

W tym filmie pokazujemy zabieg chirurgiczny mający na celu usunięcie błony nazębnej z oka królika.

Protokół

Wszystkie procedury dotyczące modeli zwierzęcych zostały sprawdzone przez lokalny instytucjonalny komitet opieki nad zwierzętami oraz weterynaryjną komisję rewizyjną JoVE.

1. Usunięcie błony ochronnej

UWAGA: Dla uproszczenia, technika dla prawego oka jest opisana poniżej. Wykonaj tę procedurę na lewym oku w identyczny sposób. Usuń błonę nazębną obustronnie w okresie aklimatyzacji (zwykle w pierwszym tygodniu).

1. Umieść królika w odpowiedniej wielkości torbie krępującej.
2. Podać podskórne wstrzyknięcie acepromazyny (1 mg/kg) w ramiona za pomocą strzykawki o pojemności 1 cm3 i igły 26 G w celu uspokojenia królika. Punktem końcowym tej łagodnej sedacji jest sytuacja, w której zwierzę utrzymuje zrelaksowaną pozycję głowy bez normalnych ruchów skanowania, a jego uszy nie są już w pełni wyprostowane.
3. Za pomocą mikropipety nanieś na oko 25 μl lidokainy bez konserwantów (1%). Włóż wziernik z drucianej powieki między powieki.
4. Chwyć błonę nazębną na jej wierzchołku za pomocą kleszczy 0,3 (lub równoważnego) i przeciągnij ją po powierzchni rogówki. Wstrzyknąć 1% lidokainy z epinefryną w skali 1:100 000 do przestrzeni podspojówkowej błony mitynacyjnej za pomocą igły 26 G. Wstrzyknąć około 0,3 ml, aby utworzyć niewielką ilość pęcherzyka na błonie miężącej. Objętości wstrzyknięć powyżej 1 ml mieszczą się w bezpiecznym zakresie dawek dla królików (2-4 mg/kg).
5. Usuń wziernik drutu. Odczekaj około 5 minut, aż lidokaina i epinefryna zaczną działać. W tym czasie wykonaj tę samą procedurę w drugim oku.
6. Wymień wziernik pokrywy drucianej. Chwyć i rozciągnij błonę nazębną na powierzchni rogówki za pomocą kleszczy 0,3. Przeciąć błonę u podstawy nożyczkami do tenotomii lub ich odpowiednikiem.
   nuta: Krwawienie jest zwykle minimalne, ale trzymaj w pobliżu wysokotemperaturowy kauteryzator akumulatorowy i używaj go w razie potrzeby, aby zminimalizować krwawienie. Bezpośredni nacisk na przeciętą podstawę błony nazębnej może być również wykorzystany do zatrzymania niewielkiego krwawienia, jeśli ono wystąpi.
7. Zdejmij wziernik pokrywy drucianej. Umieść miejscową maść z antybiotykiem (neomycyna, polimyksyna, bacytracyna i hydrokortyzon) na powierzchni rogówki.
8. Wykonaj identyczną procedurę jak w innym oku, jak wskazano w protokole.
9. Umieść zwierzęta z powrotem w oddzielnych klatkach i pozwól im się zagoić przez co najmniej tydzień lub do momentu, gdy powierzchnia spojówki całkowicie się zagoi z klinicznego punktu widzenia, przed wykonaniem jakichkolwiek dalszych testów lub interwencji.
   nuta: Całkowite wygojenie kliniczne wskazuje na brak obrzęku, iniekcji lub wydzieliny z powierzchni spojówek. Zwierzęta powinny mieć oczy normalnie otwarte, bez obecności ochronnego opadania powieki.

Materiały

Lista materiałów użytych w tym artykule

Nazwa	Firma	Numer katalogowy	Komentarze
acepromazyna, Aceproinj	Henry Schein Animal Health, Dublin, OH	NDC11695-0079-8	0,1 ml / kg wstrzyknięcie podskórne w celu uspokojenia królika
Torba do krępowania zwierząt	Henry Schein Animal Health, Dublin, OH	Jorvet J0170	Użyj torby o odpowiednim rozmiarze.
Jednostka kauteryzująca, wysokotemperaturowa, zasilana bateryjnie	Medline Industries Inc, Northfield, Illinois	NR KAT. ESCT001	Przechowywać pod ręką w przypadku krwawienia, protokół 2.7
kleszcze, 0,3	Bausch and Lomb (Storz), Bridgewater, NJ	ET6319	W celu usunięcia błony niktacyjnej protokół 2.5
wziernik pokrywy, drut	Bausch and Lomb (Storz), Bridgewater, NJ	Barraquer SUH01	W celu usunięcia błony niktacyjnej protokół 2.4
lidokaina 2% z epinefryną mieszanina 1:100 000; 50:50	Hospira Inc, Jezioro Leśne IL	NDC 0409-3182-02	Obróbka wstępna przed usunięciem błon niktynowych, protokół 2.4
lidokaina, bez konserwantów	Sigma-Aldrich, St. Louis, MO	L5647	1% w PBS dla środka znieczulającego, do aplikacji do oka, protokół 2.4
Mikropipeta	Eppendorf	Badania Plus 100 uL	Do stosowania lidokainy bez konserwantów do oczu, protokół 2.4
Końcówki do mikropipet	Produkty medyczne na całym świecie	41071052	Do stosowania lidokainy bez konserwantów do oczu, protokół 2.4
Igła, rozmiar 26	BD, Franklin Lakes, Nowy Jork	NR KAT. 305115	Do wstrzykiwania lidokainy/epinefryny, protokół 2.3 i 2.5
królik, Nowa Zelandia Biały	Charles River Labs, Waltham, Massachusetts (NZW)	2-3 kg	Zwierzęta badawcze
nożyczki, tenotomia Westcotta	McKesson Medical-Surgical, San Francisco, Kalifornia	Miltex 18-1480	W celu usunięcia błony niktycyjnej, protokół 2.7
strzykawka, 1 ml	BD, Franklin Lakes, Nowy Jork	Nr kat. 309659	Do wstrzykiwania lidokainy/epinefryny, protokół 2.3 i 2.5

powiedział: powiedział: powiedział: powiedział: